5. Tissue metabolomicsPreparation o

5. Tissue metabolomics
Preparation of tissue samples is a very time-consuming, laborintensive procedure. In particular for global metabolomics, when the primary goal is extraction of the highest possible number of metabolites, a multi-step solvent extraction is required to recover both hydrophobic and hydrophilic species. Comparative studies of six solvent-based sample-preparation protocols for LC-MS analysis showed that the most efficient method in terms of reproducibility and number of metabolite features obtained used methanol/ water for extraction of polar compounds with subsequent use of a dichloromethane/methanol mixture for recovery of non-polar compounds [7]. The two-step extraction was followed by re-suspension of the dried extracts in methanol/water. The protocol offers com- prehensive analyte coverage of a few thousand molecular features. However, this coverage involves a compromise with the total time of the experiment. The overall time of the final sample prepara- tion approach proposed by the same group was ~8–10 h using a 96- well plate format [81]. For the analysis of organs, where collection of biopsy is relatively easy (e.g., liver), the standard protocols can be effectively used, while, in the situations of tissue shortage (e.g., problem with sample collection, need for repeated analysis, and danger of side effects related to tissue collection), there is a need for other analytical approaches able to overcome the challenge of the time required. As explained before, SPME can be used as an ex- traction method for ex vivo/in vitro analysis, and, when applied to in vivo analysis, it allows for the omission of a sample-collection step. Due to the small dimension of the probe, SPME offers minimal invasiveness and no side effects. To date, in vivo tissue metabolomics by DI-SPME analysis reported in the literature were performed using the mix-mode coating (C18 and benzenesulfonic acid) [6,74]. In both cases, coverage of analytes was not comparable to the one reported for solvent-based methods, but the investigations exhibited benefits of the technology not available with standard methods.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

5. เนื้อเยื่อ metabolomicsเตรียมตัวอย่างเนื้อเยื่อจะใช้เวลามาก laborintensive กระบวนงาน โดยเฉพาะ ในโลก metabolomics เมื่อเป้าหมายหลักคือ แยกจำนวนสูงสุดของ metabolites สกัดตัวทำละลายมีหลายขั้นตอนจะต้องกู้คืนชนิด hydrophilic และ hydrophobic หกตัวทำละลายที่ใช้เตรียมสารตัวอย่างโปรโตคอลสำหรับ LC MS วิเคราะห์ศึกษาเปรียบเทียบพบว่ามากที่สุด efficient วิธี reproducibility และหมายเลขของ metabolite รับใช้เมทานอล / น้ำสำหรับสกัดสารโพลาร์มีใช้ต่อมาผสมระหว่าง dichloromethane/เม ทานอลสำหรับการกู้คืนของสารประกอบมีขั้วโลก [7] แยกสองขั้นตอนถูกตาม ด้วยระบบกันสะเทือนใหม่ของสารสกัดแห้งในเมทานอล/น้ำ โพรโทคอลมีความครอบคลุมของ analyte com prehensive ของหลายพันโมเลกุล อย่างไรก็ตาม ความครอบคลุมนี้เกี่ยวข้องกับการประนีประนอมกับเวลารวมของการทดลอง เวลาโดยรวมของ final ตัวอย่าง prepara-สเตรชันวิธีนำเสนอ โดยกลุ่มเดียวกัน h ~ 8 – 10 โดยใช้รูปแบบแผ่นดี 96 [81] สำหรับการวิเคราะห์ของอวัยวะ ง่ายของการตรวจชิ้นเนื้อ (เช่น ตับ), โพรโทคอลมาตรฐานสามารถจะใช้ได้อย่างมีประสิทธิภาพ ขณะที่ ในสถานการณ์ของการขาดแคลนเนื้อเยื่อ (เช่น ปัญหากับการเก็บตัวอย่าง จำเป็นสำหรับการวิเคราะห์ซ้ำ และอันตรายจากผลข้างเคียงที่เกี่ยวข้องกับเนื้อเยื่อคอลเลกชัน), มีความต้องการอื่นๆ วิเคราะห์แจ้งสามารถเอาชนะความท้าทายของเวลาที่ต้องการ ตามที่อธิบายไว้ก่อน SPME สามารถใช้เป็นวิธีการลากอดีตในอดีตวิเคราะห์เครื่อง vivo/ใน และ เมื่อใช้วิเคราะห์ในสัตว์ทดลอง จะช่วยให้การกระทำการอันเป็นขั้นตอนการเก็บตัวอย่าง เนื่องจากขนาดเล็กของโพรบ SPME มี invasiveness น้อยและไม่มีผลข้างเคียง วันที่ metabolomics เนื้อเยื่อในสัตว์ทดลอง โดย DI SPME วิเคราะห์รายงานในวรรณคดีได้ดำเนินการโดยใช้โหมดผสมเคลือบ (กรด C18 และ benzenesulfonic) [6,74] ในทั้งสองกรณี ความครอบคลุมของ analytes ไม่สามารถเปรียบเทียบกับรายงานสำหรับวิธีใช้ตัวทำละลาย แต่การสืบสวนจัดแสดง benefits ของเทคโนโลยีไม่พร้อมใช้งาน ด้วยวิธีการมาตรฐาน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

5 . เนื้อเยื่อเมตะโบโลมิก
เตรียมตัวอย่างเนื้อเยื่อมากใช้เวลานาน laborintensive ขั้นตอน โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับทั่วโลกเมตะโบโลมิก เมื่อเป้าหมายหลักคือการสกัดสูงสุดจำนวนสาร , ปรับตัวทำละลายการสกัดจะต้องกู้ทั้งในและ hydrophobic น้ำชนิดการศึกษาเปรียบเทียบผลของการใช้สารละลายตัวอย่าง 6 การเตรียมระบบการวิเคราะห์อินซูลิน พบว่าส่วนใหญ่ E ffi cient วิธีในแง่ของการตรวจสอบคุณสมบัติและจำนวนอาหารที่ได้รับใช้เมทานอลต่อน้ำในการสกัดสารประกอบโพลาร์ด้วยต่อมาใช้ของสิ่ง / เมทานอลผสมสำหรับการกู้คืนของสารประกอบไม่มีขั้ว [ 7 ]การสกัดแบบสองขั้นตอน ตามด้วยการเป็นแห้งสารสกัดเมทานอลต่อน้ำ โปรโตคอลเสนอ com - prehensive ครูครอบคลุมคุณสมบัติโมเลกุลไม่กี่พัน อย่างไรก็ตาม ความคุ้มครองนี้เกี่ยวข้องกับการประนีประนอมกับเวลาทั้งหมดของการทดลองเวลาโดยรวมจึง prepara นาล ตัวอย่าง , วิธีการที่เสนอโดยกลุ่มเดียวกันคือ ~ 8 – 10 H ใช้ 96 - ดีแผ่นรูปแบบ [ 81 ] สำหรับการวิเคราะห์ของอวัยวะที่รวบรวมเนื้อค่อนข้างง่าย ( ตับเช่น ) , โปรโตคอลมาตรฐาน สามารถใช้งานได้อย่างมีประสิทธิภาพ ในขณะที่ในสถานการณ์การขาดแคลนเนื้อเยื่อ ( เช่นปัญหาตัวอย่างคอลเลกชัน ต้องซ้ำ การวิเคราะห์และอันตรายจากผลข้างเคียงที่เกี่ยวข้องกับคอลเลกชันเนื้อเยื่อ ) , ต้องมีวิธีการวิเคราะห์อื่น ๆสามารถที่จะเอาชนะความท้าทายของเวลาที่จำเป็น . ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ spme สามารถใช้เป็นวิธีการดึงอดีต - ex vivo / วิเคราะห์ หลอดทดลองและเมื่อใช้ในการวิเคราะห์ซึ่งจะช่วยให้เพื่อการละเลยของการเก็บตัวอย่างขั้นตอน เนื่องจากขนาดที่เล็กของโพรบspme เสนอการผ่าตัดน้อยที่สุดและไม่มีผลข้างเคียง วันที่ในร่างกายเนื้อเยื่อเมตะโบโลมิก โดย di-spme การวิเคราะห์รายงานในวรรณคดี คือการใช้ส่วนผสมเคลือบ ( c18 โหมด และ benzenesulfonic acid ) [ 6,74 ] ในทั้งสองกรณี , กรณีความไม่เทียบเท่ากับหนึ่งรายงานสำหรับตัวทำละลายตามวิธีการแต่การสอบสวนแสดงดีจึง TS ของเทคโนโลยีไม่สามารถใช้ได้กับวิธีมาตรฐาน