Sampleswith cycle threshold (Ct) va

Samples
with cycle threshold (Ct) values less than 35 were considered to
be positive for A. citrulli. To ensure that there was no PCR inhibition
in samples that yielded negative results, 5 ng/μl of A.
citrulli genomic DNA was added to DNA preparations from 10
control seed samples and subjected to real-time PCR as described
The mean percentage of A. citrulli-positive seed sections was
determined for each seed lot. To confirm real-time PCR assay
results, attempts were made to isolate A. citrulli from seed sections.
Samples (n = 20 seeds/lot) were dissected into testa, PE
layer and embryo tissues as described above and the tissues were
macerated separately in PBS and 100-μl aliquots were spread onto
Nunhems semiselective medium. Plates were incubated for 5 days
at 28°C and the percentage of A. citrulli-positive seed sections
was compared for seeds inoculated by each method. For statistical
analysis the mean percentage of A. citrulli-positive seed tissues
for each lot (as determined by real-time PCR assay and plating on
semiselective media) were compared by factorial analysis using
the Student’s t test (P < 0.05) in SAS (version 8.1 for Windows;
SAS Institute Inc., Cary, NC).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตัวอย่างมีวงจรจำกัด (Ct) ค่า น้อยกว่า 35 ได้ถือเป็นค่าบวกสำหรับ citrulli อ. เพื่อให้แน่ใจว่า มีไม่ยับยั้งการ PCRในตัวอย่างที่ให้ผลลบผลลัพธ์ ng 5 μl ของอ.citrulli genomic DNA เพิ่มการเตรียมดีเอ็นเอจาก 10ตัวอย่างเมล็ดพันธุ์ควบคุม และอยู่ภายใต้การ PCR จริงดังที่หมายถึงเปอร์เซ็นต์ของ A. citrulli บวกเมล็ดส่วนกำหนดสำหรับแต่ละเมล็ดมาก ยืนยันแบบ real-time PCR assayผล พยายามได้ทำการแยก citrulli A. จากส่วนเมล็ดตัวอย่าง (n =ล็อต 20 เมล็ด) ถูก dissected เป็น testa, PEตัวอ่อนและชั้นเนื้อเยื่อที่อธิบายข้างต้นและเนื้อเยื่อmacerated แยกต่างหากใน PBS และ 100 μl aliquots ถูกแพร่กระจายไปNunhems semiselective ปานกลาง แผ่นถูก incubated สำหรับ 5 วันที่ 28° C และเปอร์เซ็นต์ส่วนเมล็ดบวก citrulli อ.มีการเปรียบเทียบสำหรับเมล็ดพันธุ์ inoculated โดยแต่ละวิธี สำหรับสถิติวิเคราะห์เปอร์เซ็นต์เฉลี่ยของเนื้อเยื่อเมล็ดบวก citrulli อ.สำหรับแต่ละล็อต (จริง PCR assay และชุบบนสื่อ semiselective) ได้เปรียบเทียบ โดยใช้การวิเคราะห์แฟกทดสอบ t ของนักเรียน (P < 0.05) ใน SAS (เวอร์ชัน 8.1 สำหรับ WindowsSAS สถาบัน Inc. แครีแกรนต์ NC)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตัวอย่างกับเกณฑ์วงจร (CT) ค่าน้อยกว่า 35 ได้รับการพิจารณาให้เป็นบวกสำหรับเอcitrulli เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการยับยั้ง PCR ในตัวอย่างที่ส่งผลเชิงลบ 5 ng / ไมโครลิตรของเอcitrulli ดีเอ็นเอถูกบันทึกอยู่ในการเตรียมดีเอ็นเอจาก 10 การควบคุมตัวอย่างเมล็ดพันธุ์และยัดเยียดให้ PCR เวลาจริงตามที่อธิบายไว้ร้อยละเฉลี่ยของA. ส่วนเมล็ด citrulli บวกถูกกำหนดสำหรับแต่ละเมล็ดจำนวนมาก เพื่อยืนยันแบบ real-time PCR ทดสอบผลความพยายามที่จะแยกจากcitrulli A. ส่วนเมล็ด. ตัวอย่าง (n = 20 เมล็ด / มาก) ถูกชำแหละออกเป็น Testa, PE ชั้นและเนื้อเยื่อตัวอ่อนที่อธิบายข้างต้นและเนื้อเยื่อที่ถูกหมักแยกต่างหากในพีบีเอสและ aliquots 100 ไมโครลิตรกระจายอยู่บนกลางNunhems semiselective แผ่นถูกบ่มเป็นเวลา 5 วันที่28 ° C และร้อยละของ A. ส่วนเมล็ด citrulli บวกเมื่อเทียบเมล็ดเชื้อโดยแต่ละวิธี สำหรับสถิติการวิเคราะห์ร้อยละเฉลี่ยของเอเนื้อเยื่อเมล็ด citrulli บวกมากแต่ละคน(ตามที่กำหนดโดยเวลาจริงการทดสอบ PCR และชุบในสื่อsemiselective) ถูกนำมาเปรียบเทียบโดยการวิเคราะห์ปัจจัยโดยใช้การทดสอบค่าทีนักศึกษา(P <0.05) ในเอสเอ ( รุ่น 8.1 สำหรับ Windows; SAS Institute Inc. ซึ่งนิวเคลียส NC)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ตัวอย่าง
กับวัฏจักรธรณี ( CT ) มีค่าน้อยกว่า 35 ถือว่า
เป็นบวก . citrulli . เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มียีนยับยั้ง
ในตัวอย่างที่ให้ผลผลลัพธ์ลบ 5 ng / μ l .
citrulli genomic DNA ที่ถูกเพิ่มเข้าไปในการเตรียมดีเอ็นเอจากตัวอย่างเมล็ดพันธุ์ควบคุม 10
และ PCR แบบเรียลไทม์ตามที่อธิบายไว้ภายใต้
หมายถึงร้อยละของ citrulli บวกเมล็ดส่วนถูก
Aกำหนดให้แต่ละเมล็ดมาก เพื่อยืนยันผลการทดสอบ PCR แบบเรียลไทม์
พยายามทำขึ้นเพื่อแยก . citrulli จากส่วนของเมล็ด
ตัวอย่าง ( n = 20 เมล็ด / มาก ) ถูกตัดไป เทสต้า , PE
ชั้นและเนื้อเยื่ออ่อนตามที่อธิบายไว้ข้างต้นและเนื้อเยื่อถูก
macerated แยกกันใน PBS และ 100 - μผมเฉยๆได้แพร่กระจายไปยัง
nunhems semiselective ปานกลาง จานถูกบ่ม 5 วัน
ที่ 28 ° C และร้อยละของ citrulli บวกส่วนเมล็ด
เทียบเมล็ดเชื้อแต่ละวิธี การวิเคราะห์ค่าเฉลี่ย ร้อยละของ citrulli บวกเนื้อเยื่อเมล็ดแต่ละมาก

( ตามที่กำหนดโดยสถิติวิธี PCR แบบเรียลไทม์ และชุบบน
semiselective สื่อ ) มาเปรียบเทียบโดยการวิเคราะห์แบบทดสอบโดยใช้
t ของนักเรียนอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ ( P < 0.05 ) ใน SAS ( รุ่น 8.1 สำหรับ Windows ;
สถาบัน SAS อิงค์ แครี่ , NC )