The mantle epithelial cells are dir

The mantle epithelial cells are directly responsible for pearl formation in pearl oyster, Pinctada fucata, by the deposition of aragonitic CaCO3 crystals and the secretion of organic protein matrix to hold them [1]. Thus the culture of outer epithelial cells of the mantle tissue is important to study the pearl-formation process [2]. However, the establishment of cell lines from marine invertebrates has encountered obstacles, mainly due to the low level of cell proliferation and viability and there is no single permanent cell line from pearl oyster to be successfully established [3], [4] and [5].

The 67 kDa laminin receptor (67 kDa LR), also termed the 67 kDa laminin binding protein, is a non-integrin receptor of laminin. The mature 67 kDa receptor is formed by homo- or hetero-dimerization of the acylated 37 kDa precursor (37 kDa LRP), by non-covalent bonds [6]. Laminin is the main non-collagenous glycoprotein found in the basement membrane. Various laminin isoforms are involved in many physiological and pathological processes [7], [8] and [9]. Two laminin binding sites were identified on the 37 kDa LRP [10], the first is called G peptide [11], [12] and [13], and the second is at the carboxy terminal [14] and [15]. The 67 kDa laminin receptor therefore recognizes various binding sites on laminin which are different from the sites recognized by integrins [10], [12], [14] and [16], allowing for higher overall binding affinity and different signal transduction options. The receptor is involved in several physiological processes such as implantation [17], invasive phenotype of trophoblastic tissue [18], angiogenesis [19] and [20], T-cell biology [16] and shear stress-dependent endothelial nitric oxide synthase expression [15]. It has also been found that the 67 kDa laminin receptor is identical to the oncofetal antigen protein that is expressed by tumors [21]. The overexpression of the receptor has been implicated in laminin-induced cell attachment and migration, as well as in tumor growth, invasion and metastasis [22], [23], [24] and [25]. In the previous attempts to establish oyster cell line and culture pearl-sac in vitro, a migration and proliferation along the extracellular matrix of mantle epithelial cell was observed [26] and [27]. Thus, an investigation on the 37 kDa LRP in P. fucata was undertaken.

In this study, a putative 37 kDa LRP was first cloned by RT-PCR and rapid amplification of cDNA ends (RACE) from the mantle tissue of pearl oyster P. fucata. The expression sites of this laminin receptor were examined by RT-PCR and in situ hybridization analysis.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เซลล์ epithelial หิ้งรับผิดชอบโดยตรงสำหรับผู้แต่งมุกในหอยมุก ปินค์ fucata โดยการสะสมของผลึกของ CaCO3 aragonitic และหลั่งของอินทรีย์โปรตีนเมตริกซ์เพื่อเก็บพวกเขา [1] ดังนั้น วัฒนธรรมของเซลล์นอก epithelial ของหิ้งเนื้อเยื่อจะต้องศึกษากระบวนการก่อตัวเพิร์ล [2] อย่างไรก็ตาม จัดรายการเซลล์จาก invertebrates ทะเลพบอุปสรรค ส่วนใหญ่เนื่องจากเซลล์การงอกและชีวิตในระดับต่ำ และมีไม่บรรทัดเดียวเซลล์ถาวรจากหอยมุกจะ ก่อตั้งสำเร็จ [3] , [4] [5]67 kDa laminin ตัวรับ (67 kDa LR), ยัง เรียกว่า laminin 67 kDa ผูกโปรตีน integrin ไม่ใช่ตัวรับของ laminin ได้ ตัวรับ kDa 67 ผู้ใหญ่จะเกิดโดยตุ๊ด - หรือ hetero-dimerization ของการ acylated 37 kDa สารตั้งต้น (37 kDa LRP), โดยไม่ - โคเวเลนต์พันธบัตร [6] Laminin เป็นตัวหลักไม่ใช่ collagenous ไกลโคโปรตีนพบในเมมเบรนชั้นใต้ดิน Isoforms laminin ต่าง ๆ เกี่ยวข้องในหลายทางพยาธิวิทยา และสรีรวิทยากระบวนการ [7], [8] และ [9] ระบุสอง laminin รวมไซต์บน kDa 37 LRP [10], แรกจะเรียกว่าเพปไทด์ G [11], [12] [13], และอย่างที่ carboxy เทอร์มินัล [14] [15] ตัวรับ laminin 67 kDa รู้จักเว็บไซต์รวมต่าง ๆ ดังนั้นใน laminin ที่แตกต่างจากไซต์ที่รู้จัก integrins [10], [12], [14] [16], และอนุญาตให้สูงขึ้นโดยรวมผูกความสัมพันธ์และตัวเลือก transduction สัญญาณต่าง ๆ ตัวรับเกี่ยวข้องในกระบวนการสรีรวิทยาต่าง ๆ ประดิษฐ์ [17] phenotype รุกรานเนื้อเยื่อ trophoblastic [18], angiogenesis [19] และ [20], T เซลล์ชีววิทยา [16] และไนตริกออกไซด์บุผนังหลอดเลือดขึ้นอยู่กับความเครียดเฉือน synthase นิพจน์ [15] ก็ยังพบว่าตัวรับ laminin 67 kDa เหมือนกับ oncofetal ตรวจหาโปรตีนที่แสดง โดยเนื้องอก [21] Overexpression ของตัวรับมีการเกี่ยวข้อง ในเซลล์ทำให้เกิด laminin ที่แนบมาและการย้ายถิ่น รวม ทั้ง ในการเจริญเติบโตของเนื้องอก บุกรุก และ metastasis [22], [23], [24] [25] และ ในความพยายามก่อนหน้านี้เพื่อสร้างบรรทัดหอยเซลล์ และวัฒนธรรมเพิร์ล-sac ใน ย้าย และขยายตัวตามการเคลือบของหิ้ง epithelial เซลล์ถูกสังเกต [26] และ [27] ดังนั้น ได้ดำเนินการสอบสวนใน 37 kDa LRP ใน P. fucataในการศึกษานี้ putative 37 kDa LRP แรกโคลน โดย RT-PCR และขยายอย่างรวดเร็วของ cDNA สิ้นสุด (แข่ง) จากเนื้อเยื่อของหอยมุก P. fucata หิ้ง ไซต์นิพจน์ของตัวรับ laminin นี้ถูกตรวจสอบ โดย RT-PCR และวิเคราะห์ใน situ hybridization

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เสื้อคลุมเซลล์เยื่อโดยตรงรับผิดชอบการสร้างมุกในหอยมุก pinctada , fucata โดยการสะสมของผลึกแคลเซียมคาร์บอเนต aragonitic และหลั่งสารโปรตีน แมทริกซ์อินทรีย์เพื่อจับพวกเขา [ 1 ] ดังนั้นวัฒนธรรมภายนอกเซลล์เยื่อเนื้อเยื่อแมนเทิลของสำคัญเพื่อศึกษาขั้นตอนการสร้างมุก [ 2 ] อย่างไรก็ตามจัดตั้งเซลล์จากสัตว์ทะเลไม่มีกระดูกสันหลังได้พบอุปสรรค เนื่องจากระดับต่ำของการขยายเซลล์และความมีชีวิตและไม่มีเซลล์เดียวถาวรบรรทัดจากหอยมุกได้ก่อตั้ง [ 3 ] , [ 4 ] และ [ 5 ] .

67 kDa และลามินิน รีเซพเตอร์ ( 67 ( LR ) นอกจากนี้ 67 kDa และโปรตีนที่เรียกว่า ลามินิน คือ ไม่ใช่ตัวรับอินทีกรินของลามินิน .ผู้ใหญ่ 67 kDa ตัวรับ เกิดจากโฮโม - หรืออื่น acylated 37 kDa สหชาตของสารตั้งต้น ( 37 ( LRP ) โดยไม่โควาเลนต์พันธบัตร [ 6 ] ลามินินเป็นไม่หลัก collagenous โปรตีนที่พบในชั้นใต้ดินของเยื่อแผ่น ไอโซฟอร์มลามินินต่าง ๆมีส่วนร่วมในกระบวนการทางสรีรวิทยาและพยาธิสภาพมากมาย [ 7 ] , [ 8 ] และ [ 9 ] สองเว็บไซต์ลามินินผูกถูกระบุบน 37 kDa LRP [ 10 ]ส่วนแรกเรียกว่า G เปปไทด์ [ 11 ] , [ 12 ] และ [ 13 ] , และสองคือ Carboxy Terminal ที่ [ 14 ] และ [ 15 ] รุ่น 67 kDa และลามินินตัวรับจึงตระหนักถึงเว็บไซต์ผูกพันต่างๆในลามินิน ซึ่งต่างจากเว็บไซต์ได้รับการยอมรับโดย integrins [ 10 ] [ 12 ] , [ 14 ] และ [ 16 ] ให้สูงขึ้นโดยรวมผูกความสัมพันธ์และตัวเลือกการส่งสัญญาณที่แตกต่างกันรับมีส่วนร่วมในกระบวนการทางสรีรวิทยาหลายอย่าง เช่น การใส่ [ 17 ] , การรุกรานของเยื่อ trophoblastic [ 18 ] เจเนซิส [ 19 ] และ [ 20 ] จากชีววิทยา [ 16 ] และความเค้นเฉือน ( endothelial nitric oxide synthase การแสดงออก [ 15 ] ก็ยังได้รับพบว่า 67 kDa และลามินินตัวรับเหมือนกันกับ oncofetal โปรตีนแอนติเจนที่แสดงโดยเนื้องอก [ 21 ]การ overexpression ของตัวรับเข้าไปพัวพัน กับการยึดติดเซลล์และลามินินโยกย้าย รวมทั้งในการเจริญเติบโตของเนื้องอก การรุกราน และการแพร่กระจายของเนื้อร้าย [ 22 ] [ 23 ] , [ 24 ] และ [ 25 ] ในความพยายามที่จะสร้างเซลล์วัฒนธรรมและหอยนางรมไข่มุกในหลอดทดลอง , การย้ายถิ่นและการงอกด้วยเมทริกซ์ภายนอกเซลล์ของแมนเทิลเซลล์เยื่อบุผิว ) [ 26 ] และ [ 27 ] ดังนั้นการสืบสวนใน 37 kDa LRP ในหน้า fucata มีปัญหา

ในการศึกษานี้ สมมุติว่า 37 kDa LRP ก่อนโคลนโดยวิธี RT-PCR ) และขยายอย่างรวดเร็วของ cDNA Ends ( แข่ง ) จากเนื้อเยื่อแมนเทิลของหอยมุกหน้า fucata . การแสดงออกของเว็บไซต์นี้และลามินินตัวรับถูกวินิจฉัยโดยวิธี hybridization ในการวิเคราะห์แหล่งกำเนิด