Effects of gossypol from cottonseed meal and dietary vitamin E on the reproductive characteristics of superovulated beef heifers
Materials and Methods
Animals,Diets,and Management.Twenty-fourHere- ford-Anguscrossbredheifersaveraging397kgBWand 20.7moofagewereusedina90-dexperiment.Animals were assigned randomly to one of four dietary supple- ments. Diets were as follows: 1) SBM (soybean meal + 30 IU vitamin E/kg of diet DM), 2) SBM+E (soybean meal + 4,000 IU vitamin E animal−1 d−1), 3) CSM (cottonseed meal + 30 IU vitamin E/kg of diet DM); and 4) CSM+E (cottonseed meal+ 4,000 IU vitamin E animal−1 d−1). Supplements based on cottonseed meal provided 43.5 g of total gossypol/d (37% negative iso- mer (−) and 63% positive isomer (+)) (Table 1 and 2). Vitamin E was provided as all rac-α-tocopheryl ace- tate. Diets were analyzed for α-tocopherol (Table 1) and were formulated to provide equal amounts of CP and TDN and to meet NRC (1996) nutritional require- ments. Heifers were fed the supplement (Table 1) daily via Calan gates and had free access to water and poor- quality mature bermudagrass (Cynodon dactylon) hay with an α-tocopherol (α-T) concentration of 9.1 IU/kg DM. The protocol for all heifer procedures had been approved by the University Animal Use Committee. Blood and Tissue Sampling and Analyses. Blood was collected every 3 wk via jugular venipuncture with an 18-gauge needle into heparinized vacutainer blood collection tubes for a total of five collections. Blood
was analyzed for erythrocyte osmotic fragility (EOF), hemoglobin, and hematocrit. Erythrocyte osmotic fra- gility, measured as percentage hemolysis, was evalu- ated in a 0.65% buffered saline solution as described by Risco et al. (1993). Hemoglobin was determined using a colorimetric procedure (Sigma Chemical, St. Louis,MO).Hematocritwasdeterminedusingamicro- hematocrit centrifuge (IEC MB Centrifuge, Needham Heights, MA). Blood was centrifuged for 25 min at 700 × g, and plasma was removed and stored at −20°C until ana- lyzedfor α-T (all collections) and gossypol isomers (last collection). At the end of the experiment, animals were slaughtered, and portions of liver, corpus luteum (CL), endometrium, and muscle (psoas major) were collected and frozen at −20°C until analyzed for α-T, (+)- and (−)- gossypol isomers, and total gossypol. α-Tocopherol was determined following the procedure described by Njeru et al. (1992) for plasma and by Njeru et al. (1995) for tissue and feed samples. Samples of plasma, tissues, and supplements were shipped on dry ice to Texas A & M University Agricul- tural Center at San Angelo, TX, for gossypol analyses. High performance liquid chromatography procedures were used to determine concentrations of (+)- and (−)- gossypol isomers in plasma, tissues, and feed supple- ments (Velasquez-Pereira et al., 1998 a,b,c). Free and total gossypol (TG) concentrations in the supplements were also determined by AOCS (1985 a,b). Superovulation and Embryo Collection and Quality. After 70 d of receiving diets, superovulatory treatment was performed following the procedure described by Garcia-Bojalil et al. (1994). Heifers were slaughtered on d 6 to 7 after AI. At slaughter, whole reproductive tracts were recovered and brought to the laboratory, where embryos were flushed with a known amount of Dulbecco’s PBS (Gibco, Grand Island, NY). The recov- ered flush was filtered and embryos recovered for qual- ity assessment.
ผลของ gossypol จากอาหารส่วนเกินและวิตามินอาหารลักษณะการสืบพันธุ์ของ superovulated heifers เนื้อ
วัสดุและวิธีการ
สัตว์ อาหาร และ Management.Twenty-fourHere-ฟอร์ด-Anguscrossbredheifersaveraging397kgBWand 20.7moofagewereusedina90-dexperimentสัตว์ถูกกำหนดแบบสุ่ม 4 อาหารนุ่ม-ments อย่างใดอย่างหนึ่ง อาหารมีดังนี้: 1) SBM (ถั่วเหลืองอาหาร 30 IU วิตามิน/กก.ของอาหาร DM), E 2) SBM (ถั่วเหลืองอาหาร 4000 IU วิตามิน animal−1 d−1), 3) ร่วม (ส่วนเกินอาหาร 30 IU วิตามินกิโลกรัมของอาหาร DM); และ 4) ร่วม E (ส่วนเกินอาหาร 4000 IU วิตามิน animal−1 d−1) ตามส่วนเกินอาหารเสริมให้ 43.5 g ของ gossypol d ทั้งหมด (37% ลบ iso แมร์ (−) และ 63% หลังบวก ()) (ตาราง 1 และ 2) วิตามินอีได้รับเป็นหน่วยสากลα rac ทุกเอเท อาหารถูกวิเคราะห์ในα-tocopherol (ตาราง 1) และมีสูตรให้จำนวนเท่ากับ CP และ TDN และตาม NRC (1996) โภชนาการต้อง-ments Heifers ได้รับอาหารเสริม (ตาราง 1) ผ่านประตู Calan วัน และได้เข้าฟรีน้ำเฮย์คุณภาพแย่ผู้ใหญ่ bermudagrass (หญ้าแพรก) กับความเข้มข้นα-tocopherol (α-T) 9.1 IU/kg DM โพรโทคอลสำหรับ heifer ทุกขั้นตอนได้รับการอนุมัติ โดยคณะกรรมการใช้สัตว์มหาวิทยาลัย เลือด และเนื้อเยื่อสุ่มตัวอย่าง และวิเคราะห์ เลือดถูกเก็บทุก wk 3 ผ่านการเจาะหลอดเลือดดำ jugular มีเข็มวัด 18 ตัวเป็น heparinized vacutainer หลอดเก็บเลือดสำหรับคอลเลกชัน five เลือด
ถูกวิเคราะห์ความการออสโมติกของเม็ดเลือดแดง (EOF), ฮีโมโกลบิน และ hematocrit ของเม็ดเลือดแดงการออสโมติก fra-gility วัดเป็นเปอร์เซ็นต์ hemolysis ถูกเส้น evalu ในการ65% buffered เกลือตามที่อธิบายไว้โดย Risco et al. (1993) ฮีโมโกลบินที่ถูกกำหนดโดยใช้กระบวนการเทียบเคียง (ซิกเคมี St. Louis, MO)Hematocritwasdeterminedusingamicro-hematocrit เครื่องหมุนเหวี่ยง (เครื่องหมุนเหวี่ยง MB IEC ไฮท์ Needham, MA) เลือดถูก centrifuged ในนาที 25 ที่ 700 × g และพลาสมาถูกเอาออก และเก็บไว้ที่ −20 ° C จนอานา lyzedfor α-T (ทุกชุด) และ gossypol isomers (ชุดสุดท้าย) เมื่อสิ้นสุดการทดลอง มีฆ่าสัตว์ และบางส่วนของตับ คอร์พัสคริ luteum (CL), endometrium และกล้ามเนื้อ (psoas สำคัญ) ถูกรวบรวม และหยุด −20 ° C จนกว่าจะวิเคราะห์ความα-T, ()- (−) และ -gossypol isomers และรวม gossypol Α-Tocopherol ได้กำหนดขั้นตอนที่อธิบายไว้โดย Njeru et al. (1992) ในพลาสมา และโดย Njeru et al. (1995) ในเนื้อเยื่อ และอาหารตัวอย่าง ตัวอย่างของพลาสมา เนื้อเยื่อ และอาหารเสริมจัดส่งในน้ำแข็งแห้งไปเท็กซัส&เป็น M ศูนย์มหาวิทยาลัยดี tural ที่ซานแองเจโล่ TX สำหรับวิเคราะห์ gossypol ใช้วิธี chromatography เหลวประสิทธิภาพสูงในการกำหนดความเข้มข้นของ()- (−) และ -isomers gossypol ในพลาสมา เนื้อเยื่อ และอาหารนุ่ม-ments (Velasquez Pereira et al., 1998 a, b, c) ยังฟรี และรวม gossypol (TG) ความเข้มข้นในผลิตภัณฑ์เสริมอาหารที่ถูกตามให้ AOCS (1985 a, b) Superovulation และชุดอ่อน และคุณภาพ หลัง d 70 รับอาหาร superovulatory บำบัดที่ดำเนินการตามขั้นตอนที่อธิบายไว้โดยการ์เซีย Bojalil et al. (1994) Heifers ถูกฆ่าบน d 6-7 หลังจาก AI ที่ฆ่า รามิดทั้งหมดสืบพันธุ์ถูกกู้ และนำไปปฏิบัติ ที่โคลนได้ flushed กับจำนวนของดุลเบกโก PBS (Gibco เกาะแกรนด์ NY) รู้จัก flush recov ered เป็น filtered และโคลนกู้สำหรับประเมิน qual ity
การแปล กรุณารอสักครู่..
ผลกระทบของการ gossypol จากกากเมล็ดฝ้ายและใยอาหารวิตามินอีในลักษณะการสืบพันธุ์ของโคเนื้อ superovulated
วัสดุและวิธีการ
เลี้ยงสัตว์, อาหาร, และ Management.Twenty-fourHere- ฟอร์ด-Anguscrossbredheifersaveraging397kgBWand 20.7moofagewereusedina90-dexperiment.Animals ถูกสุ่มให้ได้หนึ่งในสี่ของอาหารที่อ่อนนุ่ม - ments อาหารมีดังนี้: 1) อาหาร SBM (ถั่วเหลือง + 30 IU วิตามิน E / กิโลกรัม DM อาหาร) 2) อาหาร SBM + E (ถั่วเหลือง + 4,000 IU วิตามินอีสัตว์-1 D-1), 3) CSM (? ฝ้ายอาหาร + 30 IU วิตามิน E / กิโลกรัม DM อาหาร); และ 4) การ CSM + E (มื้อที่ฝ้าย + 4,000 IU วิตามินอี? สัตว์-1? d-1) ผลิตภัณฑ์เสริมอาหารขึ้นอยู่กับอาหารที่มีให้ฝ้าย 43.5 กรัมจากทั้งหมด gossypol / วัน (37% ลบ iso- แมร์ (-) และ 63% isomer บวก (+)) (ตารางที่ 1 และ 2) วิตามินอีเป็นที่ที่ทุก RAC-α-โทโคเฟ ace- tate อาหารที่ถูกนำมาวิเคราะห์สำหรับαโทโคฟีรอ (ตารางที่ 1) และสูตรที่จะให้จำนวนเงินที่เท่ากันของซีพีและ TDN และเพื่อตอบสนองอาร์ซี (1996) ข้อกำาหนดทางโภชนาการ วัวได้รับอาหารเสริม (ตารางที่ 1) ในชีวิตประจำวันผ่านประตู Calan และมีอิสระในการเข้าถึงคุณภาพน้ำและความยากจนของมิวผู้ใหญ่ (Cynodon dactylon) หญ้าแห้งที่มีα-โทโคฟีรอ (α-T) เข้มข้น 9.1 IU / กิโลกรัม DM โปรโตคอลสำหรับขั้นตอนวัวทั้งหมดที่ได้รับการอนุมัติจากคณะกรรมการสัตว์ใช้มหาวิทยาลัย เลือดและเนื้อเยื่อการเก็บตัวอย่างและการวิเคราะห์ เลือดถูกเก็บรวบรวมทุก 3 สัปดาห์ผ่านทางเส้นเลือดดำที่แขนคอด้วยเข็ม 18 วัดใน heparinized หลอดเก็บเลือด Vacutainer รวมเป็นไฟและคอลเลกชัน เลือด
ได้รับการวิเคราะห์ความเปราะบางของเม็ดเลือดแดงออสโมติก (EOF), ฮีโมโกลและ hematocrit เม็ดเลือดแดง gility fra- ออสโมติกวัด hemolysis ร้อยละได้ทำการประเมิน ated ในน้ำเกลือ 0.65% บัฟเฟอร์ตามที่อธิบาย Risco และคณะ (1993) ฮีโมโกลถูกกำหนดโดยใช้ขั้นตอนการสี (Sigma เคมีเซนต์หลุยส์) centrifuge hematocrit .Hematocritwasdeterminedusingamicro- (IEC MB ปั่นเหวี่ยงนีแดมไฮ MA) เลือดหมุนเหวี่ยงสำหรับ 25 นาทีที่ 700 ×กรัมและพลาสม่าจะถูกลบออกและเก็บไว้ที่ -20 ° C จน ana- lyzedfor α-T (คอลเลกชันทั้งหมด) และไอโซเมอ gossypol (คอลเลกชันล่าสุด) ในตอนท้ายของการทดลองสัตว์ถูกฆ่าและบางส่วนของตับ, คอร์ปัสลูเทียม (CL), เยื่อบุโพรงมดลูกและกล้ามเนื้อ (psoas หลัก) ถูกเก็บรวบรวมและแช่แข็งที่ -20 ° C จนวิเคราะห์หาα-T (+) - และ (-) - ไอโซเมอ gossypol และ gossypol ทั้งหมด α-โทโคฟีรอถูกกำหนดตามขั้นตอนที่อธิบายไว้โดย Njeru และคณะ (1992) สำหรับพลาสม่าและ Njeru และคณะ (1995) สำหรับเนื้อเยื่อและอาหารตัวอย่าง ตัวอย่างของพลาสม่าเนื้อเยื่อและอาหารเสริมถูกส่งบนน้ำแข็งแห้งเท็กซัส A & M University Agricul- ทั่วไปฤทธิ์ศูนย์ San Angelo, TX, สำหรับการวิเคราะห์ gossypol วิธีการที่มีประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography ถูกนำมาใช้เพื่อตรวจสอบความเข้มข้นของ (+) - และ (-) - ไอโซเมอ gossypol ในพลาสมาเนื้อเยื่อและอาหาร ments เติม. (Velasquez-รา et al, 1998, B, C) ฟรีและรวม gossypol (TG) ที่ความเข้มข้นในผลิตภัณฑ์เสริมอาหารยังถูกกำหนดโดย AOCS (1985 b) Superovulation และตัวอ่อนเก็บและคุณภาพ หลังจาก 70 วันของการได้รับอาหารที่รักษา superovulatory ถูกดำเนินการตามขั้นตอนที่อธิบายไว้โดยการ์เซีย Bojalil และคณะ (1994) โคสาวถูกฆ่าเมื่อง 6-7 หลังจากที่เอไอ ที่ฆ่าระบบสืบพันธุ์ทั้งได้รับการกู้คืนและนำไปยังห้องปฏิบัติการที่ตัวอ่อนถูก fl ushed กับจำนวนเงินที่เป็นที่รู้จักกันของ Dulbecco พีบีเอส (Gibco, แกรนด์ไอส์แลนด์นิวยอร์ก) recov- Ered ชั้น USh ถูกไฟ ltered และตัวอ่อนกู้คืนสำหรับการประเมิน ity สา
การแปล กรุณารอสักครู่..
ผลของกากเมล็ดฝ้ายจากกากเมล็ดฝ้าย และวิตามินอีในอาหารต่อลักษณะการสืบพันธุ์ของวัสดุและวิธีการ superovulated เนื้อตัว
สัตว์ อาหาร และ management.twenty-fourhere - ford-anguscrossbredheifersaveraging397kgbwand 20.7moofagewereusedina90-dexperiment.animals ได้รับแบบสุ่มเป็น 4 ช่วงนิ่มนวล - ments . อาหารมีดังนี้( 1 ) กากถั่วเหลือง 30 IU วิตามินอี / กิโลกรัมอาหาร DM ) , 2 ) 4 E ( กากถั่วเหลือง 4000 IU วิตามินอี สัตว์− 1 D − 1 ) , ( 3 ) CSM ( กากเมล็ดฝ้าย 30 IU วิตามินอี / กิโลกรัมอาหาร DM ) ; และ 4 ) CSM E ( กากเมล็ดฝ้าย , IU วิตามินอี สัตว์− 1 D − 1 ) ผลิตภัณฑ์เสริมอาหารจากกากเมล็ดฝ้ายให้รวม 43.5 กรัมของกากเมล็ดฝ้าย / D ( 37 % ลบ ISO - แมร์ ( − ) และ 63% ไอโซเมอร์เชิงบวก ( ) ) ( ตารางที่ 1 และ 2 )วิตามิน อี จัดเป็นแรค - แอลฟา - tocopheryl เอซเทท สูตรแอลฟาโทโคเฟอรอล วิเคราะห์ ( ตารางที่ 1 ) และถูกกำหนดให้เท่ากับจํานวนเงินของ CP และปริมาณสารอาหารโภชนะย่อยได้และพบกับอาร์ซี ( 1996 ) - โภชนาการต้องการ ments .ตัวให้อาหารเสริม ( ตารางที่ 1 ) ทุกวัน ผ่านทาง calan ประตู และได้เข้าฟรี และคุณภาพน้ำไม่ดี ผู้ใหญ่ bermudagrass ( หญ้าแพรก ) เฮย์กับแอลฟาโทโคเฟอรอล ( แอลฟา ) ความเข้มข้นของ 9.1 IU / kg DM . โปรโตคอลสำหรับขั้นตอนสาวทั้งหมดได้รับการอนุมัติโดยคณะกรรมการสัตว์มหาวิทยาลัยใช้ เลือดและเนื้อเยื่อตัวอย่างและวิเคราะห์ข้อมูลเลือดทุก 3 สัปดาห์ เพื่อผ่านลำคอ เจาะเลือดกับ 18 เข็มวัดในกลุ่ม vacutainer หลอดเก็บเลือดสำหรับทั้งหมดจึงได้คอลเลกชัน เลือด
ใช้เม็ดเลือดแดงออสโมซิสความเปราะ ( ช่วง ) , ฮีโมโกลบิน และฮีมาโตคริต . เม็ดเลือดแดงออสโมซิสฟรา - gility วัดหาระดับคือ evalu - ated ใน 065% ในน้ำเกลือตามที่อธิบายไว้โดยริ ก et al . ( 1993 ) ฮีโมโกลบินคือการพิจารณากระบวนการ 7.4 ( Sigma เคมี , St . Louis , MO ) hematocritwasdeterminedusingamicro - ฮีมาเครื่องหมุนเหวี่ยง ( IEC ซึ่งเป็น MB , ความสูง , MA ) เลือดที่ระดับ 25 นาทีที่× 700 กรัมและพลาสมาถูกถอดออกและเก็บไว้ที่ 20 ° C ถึง - lyzedfor −อนาแอลฟา T ( คอลเลกชันทั้งหมด ) และกากเมล็ดฝ้ายไอโซเมอร์ ( ชุดสุดท้าย ) เมื่อสิ้นสุดการทดลอง สัตว์ถูกฆ่า และส่วนต่าง ๆของตับ รังไข่คอร์ปัสลูเตียม ( CL ) , เยื่อบุมดลูกและกล้ามเนื้อ ( psoas สาขา ) การเก็บรวบรวมและแช่แข็งที่อุณหภูมิ 20 ° C −จนวิเคราะห์แอลฟา T ( ) - และ ( − ) - กอสซิปอลคือ และกากเมล็ดฝ้ายทั้งหมดแอลฟาโทโคเฟอรอล ตั้งใจปฏิบัติตามขั้นตอนที่อธิบายไว้โดย Njeru et al . ( 1992 ) ในพลาสมา และ Njeru et al . ( 1995 ) เนื้อเยื่อและตัวอย่างอาหาร ตัวอย่างของเลือด เนื้อเยื่อ และ อาหารเสริม ถูกส่งบนน้ำแข็งแห้งเท็กซัสเป็น& M มหาวิทยาลัยของศูนย์ - อยุธยาที่ซานแองเจโล , TX , การวิเคราะห์กากเมล็ดฝ้าย .ขั้นตอนวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงเพื่อใช้วัดความเข้มข้นของ ( ) - และ ( − ) - กอสซิปอลในพลาสมา คือ เนื้อเยื่อ และให้อาหารผิว - ments ( เวลาสเกซ Pereira et al . , 1998 , B , C ) ฟรี รวมในกากเมล็ดฝ้าย ( TG ) ความเข้มข้นของผลิตภัณฑ์เสริมอาหารที่พบโดย aocs ( 1985 , B ) superovulation และคอลเลกชันของตัวอ่อน และคุณภาพ หลังจาก 70 D รับอาหาร ,superovulatory การดำเนินการตามกระบวนการที่อธิบายไว้โดยการ์เซีย bojalil et al . ( 1994 ) ตัวถูกฆ่าบน D 6 7 หลังจาก Ai ที่ฆ่า ทางเดินอาหารอวัยวะสืบพันธุ์ทั้งหมดที่พบและนำตัวไปยังห้องปฏิบัติการที่ตัวอ่อนกำลังfl ushed กับรู้จักปริมาณดัลเบโค่ของ PBS ( gibco เกาะแกรนด์ , นิวยอร์ก )ที่หาย - รด flชถูกถ่ายทอดและกู้คืน ltered ตัวอ่อนเพื่อการประเมิน qual ity
-
การแปล กรุณารอสักครู่..