The synthesis of DNA from an RNA te

The synthesis of DNA from an RNA template, via reverse transcription, produces complementary DNA (cDNA). Reverse transcriptases (RTs) use an RNA template and a short primer complementary to the 3' end of the RNA to direct the synthesis of the first strand cDNA, which can be used directly as a template for the Polymerase Chain Reaction (PCR). This combination of reverse transcription and PCR (RT-PCR) allows the detection of low abundance RNAs in a sample, and production of the corresponding cDNA, thereby facilitating the cloning of low copy genes. Alternatively, the first-strand cDNA can be made double-stranded using DNA Polymerase I and DNA Ligase. These reaction products can be used for direct cloning without amplification. In this case, RNase H activity, from either the RT or supplied exogenously, is required.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การสังเคราะห์ดีเอ็นเอจากอาร์เอ็นเอแม่แบบที่มี ผ่าน transcription ย้อน สร้างเสริมดีเอ็นเอ (cDNA) กลับ transcriptases (อาร์ทีเอส) ใช้พื้นสั้นเสริม 3 ตามอาร์เอ็นเอและอาร์เอ็นเอแม่แบบเพื่อสังเคราะห์ cDNA สาระแรก ซึ่งสามารถใช้เป็นแม่แบบโดยตรงสำหรับการปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (PCR) โดยตรง ชุดของ transcription ย้อนและ PCR (RT-PCR) นี้ช่วยให้การตรวจพบความอุดมสมบูรณ์ต่ำ RNAs ในตัวอย่าง และการผลิตของ cDNA ที่สอดคล้องกัน การผันผวนของยีนสำเนาต่ำ หรือ cDNA สแตรนด์แรกได้คู่ควั่นโดยใช้ดีเอ็นเอพอลิเมอเรส DNA Ligase และฉันได้ ผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาเหล่านี้สามารถใช้สำหรับการโคลนโดยตรงโดยไม่ต้องขยาย ในกิจกรรม RNase H นี้ กรณี จากการ RT หรือใส่ exogenously ต้องการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การสังเคราะห์ดีเอ็นเออาร์เอ็นเอจากแม่แบบที่ผ่านการถอดรหัสย้อนกลับผลิต DNA ประกอบ (ยีน) ย้อนกลับ transcriptases (RTS) การใช้แม่แบบอาร์เอ็นเอและไพรเมอร์สั้นประกอบกับปลาย 3 'ของอาร์เอ็นเอไปตรงสังเคราะห์ cDNA สาระแรกซึ่งสามารถนำมาใช้โดยตรงเป็นแม่แบบสำหรับปฏิกิริยาลูกโซ่ Polymerase (PCR) การรวมกันของการถอดรหัสย้อนกลับและ PCR (RT-PCR) นี้จะช่วยให้การตรวจสอบของ RNAs ความอุดมสมบูรณ์ต่ำตัวอย่างและการผลิตของยีนที่เกี่ยวข้องจึงอำนวยความสะดวกการโคลนยีนสำเนาต่ำ ผลัดกัน cDNA แรกสาระสามารถทำเกลียวคู่ดีเอ็นเอโดยใช้โพลีเมอฉันและ DNA ligase ผลิตภัณฑ์เหล่านี้ปฏิกิริยาที่สามารถใช้สำหรับการโคลนโดยตรงโดยไม่ต้องใช้เครื่องขยายเสียง ในกรณีนี้ RNase กิจกรรม H, จากทั้ง RT หรือให้มาจากภายนอกจะต้อง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การสังเคราะห์ DNA RNA จากแม่แบบทางย้อนกลับถอดความ สร้างเสริม DNA ( cDNA ) ย้อนกลับ transcriptases ( RTS ) ใช้แม่แบบ RNA และสั้น ไพรเมอร์ ประกอบกับ 3 ' สุดท้ายของ RNA โดยการสังเคราะห์ cDNA เส้นก่อน , ซึ่งสามารถใช้โดยตรงเป็นแม่แบบสำหรับการใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส ( พีซีอาร์ )การรวมกันของการถอดความย้อนกลับ ( RT-PCR ) และ PCR ช่วยให้ตรวจหาต่ำความอุดมสมบูรณ์ RNAs ในตัวอย่างและการผลิตของ cDNA ที่สอดคล้องกัน จึงเอื้อต่อการโคลนยีนคัดลอกต่ำ อีกวิธีหนึ่งคือ วิธีแรกที่สามารถทำให้คู่ที่ควั่นเกลียวใช้ DNA polymerase I และไลเกส ดีเอ็นเอ ปฏิกิริยาของผลิตภัณฑ์เหล่านี้สามารถใช้โดยตรงโดยไม่ต้องเพิ่มจำนวนยีน .ในกรณีนี้ , เลส H กิจกรรมจากทั้ง RT หรือให้ exogenously , จะต้อง