The merApe9 construct was first ass

The merApe9 construct was first assayed for reductase activity in E. coli. The size of the zone of sensitivity around disks containing mercuric ion are shown for various strains in Table 1. The parent E. coli strain, SK1592/pPB111-47 (42), was supersensitive to mercury, producing a large ring of growth inhibition (HgSS; 30 mm). This strain has the mercury transport system and pumps even very low levels of ionic mercury into the cell, but cannot reduce Hg2+ to the nontoxic Hg°. When the supersensitive strain also contained the pNS2 plasmid, it showed full levels of Hg2+ resistance (SK1592/pPB111-47/pNS2; 14 mm). pDU202 has an intact merA gene and is the parent plasmid to pPB111-47. pNS2 alone increased slightly the resistance of wild-type E. coli strain SK1592 to Hg2+. This confirmed a recent report that R plasmids mutated in the transport functions merT and merP produce weak mercury resistance (26). These results demonstrated that merApe9 encoded a fully functional mercuric ion reductase. The sequence of the merApe9 gene in pNS2 contained a few unintended mutations, which were evidently introduced during the OE-PCR protocol. These changes produced two conservative amino acid changes in the MerApe9 protein (underlined in Fig. 1B; see Materials and Methods).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โครงสร้าง merApe9 แรก assayed สำหรับกิจกรรม reductase ใน E. coli มีแสดงขนาดของโซนของไวรอบดิสก์ที่ประกอบด้วยไอออน mercuric สำหรับสายพันธุ์ต่าง ๆ ในตารางที่ 1 หลักต้องใช้ E. coli, SK1592/pPB111-47 (42), ถูก supersensitive กับปรอท ผลิตแหวนขนาดใหญ่ของการยับยั้งการเจริญเติบโต (HgSS; 30 มม.) ต้องใช้นี้มีปรอทขนส่งระบบและปั๊มต่ำมากแม้ระดับปรอท ionic ในเซลล์ แต่ไม่ลด Hg2 + ° Hg พิษทั้ง เมื่อสายพันธุ์ supersensitive ประกอบด้วย pNS2 plasmid มันแสดงให้เห็นระดับทั้งหมดของ Hg2 + ความต้านทาน (SK1592/pPB111-47/pNS2; 14 มม.) pDU202 มียีนมีร่าเหมือนเดิม และเป็น plasmid หลักการ pPB111-47 คนเดียว pNS2 เพิ่มเล็กน้อยความต้านทานของป่าชนิด E. coli ต้องใช้ SK1592 กับ Hg2 + นี้ยืนยันรายงานล่าสุดว่า กลาย R plasmids ในการขนส่งฟังก์ชัน merT และ merP ผลิตปรอทอ่อนแอความต้านทาน (26) ผลเหล่านี้แสดงให้เห็นว่า merApe9 นั้นเข้ารหัส reductase ไอออน mercuric งาน ลำดับของยีน merApe9 ใน pNS2 ประกอบด้วยการกลายพันธุ์โดยไม่ได้ตั้งใจบาง ซึ่งได้รับการแนะนำอย่างเห็นได้ชัดระหว่างโพรโทคอล OE PCR เปลี่ยนแปลงเหล่านี้ผลิตสองแปลงหัวเก่ากรดอะมิโนในโปรตีน MerApe9 (ขีดเส้นใต้ใน Fig. 1B ดูวัสดุและวิธีการ)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สร้าง merApe9 ได้รับการวิเคราะห์ครั้งแรกสำหรับกิจกรรม reductase ในเชื้อ E. coli ขนาดของเขตของความไวรอบดิสก์ที่มีปรอทไอออนที่มีการแสดงสายพันธุ์ต่าง ๆ ในตารางที่ 1 ผู้ปกครอง E. coli สายพันธุ์, SK1592 / pPB111-47 (42) เป็น supersensitive ปรอทผลิตวงแหวนขนาดใหญ่ของการยับยั้งการเจริญ ( HgSS 30 มิลลิเมตร) สายพันธุ์นี้มีระบบขนส่งปรอทและปั๊มแม้ระดับที่ต่ำมากของสารปรอทอิออนเข้าไปในห้องขัง แต่ไม่สามารถลด Hg2 + กับปรอท°ปลอดสารพิษ เมื่อความเครียด supersensitive ยังมีพลาสมิด pNS2 มันแสดงให้เห็นว่าระดับเต็มรูปแบบของ Hg2 + ต้านทาน (SK1592 / pPB111-47 / pNS2 14 มิลลิเมตร) pDU202 มียีน Mera เหมือนเดิมและเป็นพลาสมิดแม่เพื่อ pPB111-47 pNS2 คนเดียวเพิ่มขึ้นเล็กน้อยต้านทานของป่าประเภทอีโคไลสายพันธุ์ SK1592 เพื่อ Hg2 + นี้ได้รับการยืนยันรายงานล่าสุดว่าพลาสมิด R กลายพันธุ์ในการทำงานและการขนส่ง MERT MERP ผลิตต้านทานอ่อนแอปรอท (26) ผลการศึกษานี้แสดงให้เห็นว่า merApe9 เข้ารหัส reductase ไอออนปรอทการทำงานอย่างเต็มที่ ลำดับของยีน merApe9 ใน pNS2 ประกอบด้วยการกลายพันธุ์ที่ไม่ได้ตั้งใจไม่กี่ซึ่งถูกนำมาใช้อย่างเห็นได้ชัดในช่วงโปรโตคอล OE-PCR การเปลี่ยนแปลงเหล่านี้สองการเปลี่ยนแปลงกรดอะมิโนในเชิงอนุรักษ์นิยมในโปรตีน MerApe9 (ขีดเส้นใต้ในรูปที่ 1B. เห็นวัสดุและวิธีการ)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การ merape9 สร้างเป็นครั้งแรกสำหรับเอนไซม์เอนไซม์ใน E . coli ขนาดของพื้นที่ดิสก์ที่มีความไว รอบเมอร์คิวริกไอออนแสดงสายพันธุ์ต่างๆ ในตารางที่ 1 แม่เชื้ออีโคไลสายพันธุ์ sk1592 / ppb111-47 ( 42 ) , ด้วยปรอท ผลิตแหวนขนาดใหญ่ของการยับยั้งการเจริญเติบโต ( hgss ; 30 มม. )สายพันธุ์นี้มีปรอทระบบการขนส่งและปั๊มได้น้อยมาก ระดับปรอทไอออนเข้าสู่เซลล์ แต่ไม่สามารถลด hg2 ไปยังองศาปรอท ปลอดสารพิษ . เมื่อความเครียดด้วยก็มี pns2 พลาสมิดพบระดับเต็มรูปแบบของ hg2 ความต้านทาน ( sk1592 / ppb111-47 / pns2 ; 14 มม. ) pdu202 มียีน Mera เหมือนเดิมและเป็นผู้ปกครอง ในการ ppb111-47 .pns2 คนเดียวเพิ่มขึ้นความต้านทานของสายพันธุ์ของเชื้อ E . coli sk1592 เพื่อ hg2 . นี้ได้รับการยืนยันรายงานล่าสุดที่ R ) กลายพันธุ์ในหน้าที่การขนส่งเมิร์ท merp ผลิตและต้านทานปรอทอ่อน ( 26 ) ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่า merape9 เข้ารหัสไอออนและเมอร์คิวริกอย่างเต็มที่ ลำดับของยีน merape9 ใน pns2 มีการกลายพันธุ์ที่ไม่ได้ตั้งใจ ไม่กี่ซึ่งเห็นได้ชัดแนะนำในระหว่าง oe-pcr โปรโตคอล การเปลี่ยนแปลงเหล่านี้ผลิตสองอนุลักษณ์กรดอะมิโนเปลี่ยนแปลงใน merape9 โปรตีน ( ขีดเส้นใต้ในรูป 1B ; ดูวัสดุและวิธีการ )