Suspensions of six M pachydermatis isolates obtained
from the skin of dogs with dermatitis and otitis were prepared
in 12- to 18-hour broth cultures (malt extract [Oxoid
L39] 25 g; desiccated ox bile [Oxoid L50] 10 g; Tween 40,
5 ml; glycerol 1 ml; water to 500 ml). The yeasts were
recovered from the broths by centrifugation at 1000 g for
15 minutes, washed in 0.075 M phosphate-buffered saline
(pBs), pH 7.9, and resuspended to an optical density equivalent
to McFarland Standard number 5 (Bio M6rieux). The
suspensions were diluted (1:5 and 1:25) in pBs, and 100 gl
of each dilution were pipetted into paired sterile bijou bottles
containing 400 ~tl of PBS (control) or PBs containing
0.125 per cent solutions of each of three non-ionic detergents, to give a final detergent concentration of 0.1 per
cent. The detergents were iso-octylphenoxypolyethoxyethanol
(Triton X-100, BDH), polyoxyethylene(20)
sorbitan monopalmitate (Tween 40, BDH) and polyoxyethylene(
20) sorbitan mono-oleate (Tween 80, 13Drt). Each
sample was kept at room temperature for five minutes,
shaken manually for 30 seconds, and the viable counts of
M pachydermatis were then determined by culturing
aliquots on a modified malt extract agar as described
below; the plating was repeated after a further two hours of
incubation.
บริการของ pachydermatis M 6 แยกได้จากผิวหนังของสุนัขกับอักเสบ otitis ได้เตรียมในวัฒนธรรม 12 ถึง 18-ชั่วโมงซุป (สารสกัดจากข้าวมอลต์ [OxoidL39] 25 กรัม desiccated น้ำดีวัว [Oxoid L50] 10 g Tween 405 ml กลีเซอร 1 ml น้ำไป 500 ml) Yeasts ถูกกู้คืนจากการ broths โดย centrifugation ที่ 1000 กรัมสำหรับ15 นาที ล้างในน้ำเกลือฟอสเฟต buffered 0.075 M(pBs), 7.9 และ resuspended ต้องการแสงความหนาแน่นเท่ากับค่า pHมาตรฐาน McFarland หมายเลข 5 (Bio M6rieux) ที่บริการถูกทำให้เจือจาง (1:5 และ 1:25) ใน pBs, 100 glของแต่ละการเจือจางถูก pipetted ในขวดโฮลบีโยใส่จัดเป็นคู่ประกอบด้วย 400 ~ tl ของ PBS (ควบคุม) หรือประกอบด้วย PBsโซลูชั่นร้อยละ 0.125 ของแต่ละสาม ionic ไม่ใช่ผงซักฟอก ให้เป็นขั้นสุดท้ายผงซักฟอกเข้มข้น 0.1 ต่อร้อยละ ผงซักฟอกที่มี iso-octylphenoxypolyethoxyethanol(ไตรตั้น X 100, BDH), polyoxyethylene(20)sorbitan monopalmitate (Tween 40, BDH) และ polyoxyethylene (20 sorbitan โมโน-oleate (Tween 80, 13Drt) แต่ละตัวอย่างถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง 5 นาทีเขย่าสำหรับ 30 วินาที และตรวจนับการทำงานของตนเองM pachydermatis ถูกแล้วตาม culturingaliquots ในมอลต์แก้ไขแยก agar ดังที่ด้านล่าง ชุบที่ถูกทำซ้ำหลังจากเป็นสองชั่วโมงคณะทันตแพทยศาสตร์
การแปล กรุณารอสักครู่..
