We have investigated the effect of

We have investigated the effect of kLa on CHO cell growth and
recombinant protein yield in small- and large-scale OSRs. Using a
1-L OSR, the minimal kLa value which ensured good cell culture
performance was determined for three CHO cell lines. As the
working volume increased, the kLa decreased and pH and DO
limitations occurred in the cultures. The minimal kLa required to
avoid these limitations was cell-line dependent and ranged from
7 to 9 hour1
. Surprisingly, oxygen did not appear to be the most
important factor limiting cell growth. Instead, the culture pH
appeared to be the most crucial factor. In cultures of CHO-DG44
and CHO-TNFR cells for which the pH fell below 6.6, the DO only
decreased to 30 air sat. As previously reported, in suspension
cultures of mammalian cells a DO of 30 air sat is not limiting
while a pH below 6.6 is [13]. CO2 accumulation in cultures with
an insufficient kLa may be the main reason for the low pH values
observed in these cultures. The cell densities of cultures experiencing
limitations were lower than those of cultures with a
sufficient kLa. However, the biomass was similar in different
cultures in the same OSR independently of the kLa. This suggests
that the average cell size increased in the cultures experiencing
pH or DO limitations, a phenomenon reported before and suspected
to be linked to cell stress [14]. Cell-specific productivity
has been reported to increase with cell size [15]. This could
explain why recombinant protein titers were not affected in
those cultures experiencing pH or DO limitations relative to
those that did not.
In 250-mL, 500-mL and 1-L OSRs, the same kLa values led to
similar cell growth, culture conditions (pH and DO), and recombinantprotein
yields. These results suggest that minimal kLa values for
a bioprocess can be determined at small scale for a given cell clone
and that these values remain valid upon scale-up. CHO-IgG cells
cultivated without pH or DO controllers in a 200-L OSR grew
similarly, had equivalent recombinant protein titers, and generated
the same pH profile as cells in 1- and 5-L OSRs. Because the three
OSRs were operated at the same kLa, these results suggest that largescale
bioprocesses can be operated without pH or DO controllers as
long as a sufficient kLa (7–10 hour1
) is maintained through appropriate
cultivation conditions (e.g. working volume, agitation rate
and geometry of the vessel). Furthermore, this confirms that for
cultures having the same kLa, the same trends and values can be
expected for cell density, pH and recombinant protein production
independently of the scale. Thus, the kLa appears to be a good
predictor for scalability in OSRs. These probe-independent bioprocesses
are appealing as they are cost-effective and simple. They do
not require a controller or the addition of base or pure oxygen to
keep suitable cultivation conditions. The robustness of such bioprocesses
is also higher as they are independent of probe and
controller failures.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เราได้ตรวจสอบผลของภูหินร่องกล้าช่อเซลล์เจริญเติบโต และrecombinant โปรตีนผลผลิตในขนาดเล็ก - และ large -สเกล OSRs โดยใช้การ1 L OSR ภูหินร่องกล้าน้อยค่าซึ่งวัฒนธรรมเซลล์ดีมั่นใจประสิทธิภาพการทำงานที่ถูกกำหนดสำหรับบรรทัดเซลล์ช่อ เป็นการปริมาณงานที่เพิ่มขึ้น ภูหินร่องกล้าที่ลดลง และค่า pH และทำข้อจำกัดที่เกิดขึ้นในวัฒนธรรม ภูหินร่องกล้าน้อยที่ต้องหลีกเลี่ยงเหล่านี้เซลล์สายถูกจำกัดอิสระ และแสก ๆ จากhour1 7-9. จู่ ๆ ออกซิเจนไม่ปรากฏเป็นที่สุดปัจจัยสำคัญในการจำกัดการเติบโตเซลล์ แทน pH วัฒนธรรมปรากฏเป็น ปัจจัยสำคัญที่สุด ในวัฒนธรรมของโจ DG44และเซลล์ TNFR ช่อที่ pH ลดลงต่ำกว่า 6.6 โดเท่านั้นลดลงอากาศ 30 ที่นั่ง ก่อนหน้านี้เป็น รายงาน ระงับวัฒนธรรมของเซลล์ mammalian ไม่จำกัดทำอากาศ 30 ที่นั่งในขณะที่ค่า pH ต่ำกว่า 6.6 เป็น [13] การสะสม CO2 ในวัฒนธรรมด้วยภูหินร่องกล้ามีไม่เพียงพออาจเป็นสาเหตุหลักที่ค่า pH ต่ำสังเกตในวัฒนธรรมเหล่านี้ ความหนาแน่นเซลล์ของวัฒนธรรมที่พบจำกัดคนที่ต่ำกว่าของวัฒนธรรมกับการภูหินร่องกล้าพอ อย่างไรก็ตาม ชีวมวลไม่เหมือนแตกต่างกันวัฒนธรรมใน OSR เดียวกันอิสระภูหินร่องกล้า นี้แนะนำว่า ขนาดเฉลี่ยของเซลล์เพิ่มขึ้นในวัฒนธรรมที่ประสบpH หรือโดจำกัด ปรากฏการณ์รายงานก่อน และสงสัยว่าจะสามารถเชื่อมโยงกับความเครียดของเซลล์ [14] ผลผลิตเซลล์เฉพาะมีการรายงานเมื่อต้องการเพิ่มขนาดเซลล์ [15] นี้สามารถอธิบายทำไม titers recombinant โปรตีนได้ไม่รับผลกระทบในวัฒนธรรมเหล่านั้นประสบปัญหา pH หรือจำกัดทำกับผู้ที่ไม่ใน 250 mL, 500 mL และ 1 L OSRs ภูหินร่องกล้าค่านำไปสู่เซลล์เจริญเติบโตคล้าย วัฒนธรรมเงื่อนไข (pH และ DO), และ recombinantproteinอัตราผลตอบแทน ผลลัพธ์เหล่านี้แนะนำที่ภูหินร่องกล้าน้อยค่าสำหรับbioprocess สามารถถูกกำหนดที่ขนาดเล็กในโคลนให้เซลล์และให้ค่าเหล่านี้ยังคงถูกต้องตามมาตราส่วนสาย เซลล์ IgG ช่อcultivated โดย pH หรือไม่เติบโตในตัวควบคุมใน OSR 200 Lในทำนองเดียวกัน มี titers recombinant โปรตีนเทียบเท่า และสร้างโพรไฟล์เดียวกัน pH เป็นเซลล์ใน 1 และ 5-L OSRs เนื่องจากทั้งสามOSRs ได้ดำเนินการ ณภูหินร่องกล้าเดียว ผลลัพธ์เหล่านี้แนะนำ largescale นั้นbioprocesses สามารถดำเนินการ โดยไม่มีค่า pH หรือทำตัวเป็นยาวเป็นภูหินร่องกล้าพอ (hour1 7 – 10) ไว้ผ่านที่เหมาะสมสภาพการเพาะปลูก (เช่นทำเสียง อาการกังวลต่ออัตราทางเรขาคณิตของเรือ) นอกจากนี้ นี้ยืนยันว่า สำหรับวัฒนธรรมมีภูหินร่องกล้าเดียว แนวโน้มและค่าเดียวกันได้คาดว่าเซลล์ความหนาแน่น ค่า pH และวททชผลิตโปรตีนอิสระขนาดนั้น ดังนั้น ภูหินร่องกล้าปรากฏจะ ดีผู้ทายผลขนาดใน OSRs Bioprocesses อิสระโพรบเหล่านี้น่าสนใจจะคุ้มค่า และง่าย พวกเขาทำไม่จำเป็นต้องมีตัวควบคุมหรือเพิ่มออกซิเจนบริสุทธิ์ หรือพื้นฐานในการสภาพปลูกที่เหมาะสมไว้ เสถียรภาพของ bioprocesses ดังกล่าวก็สูง ตามเป็นอิสระจากโพรบ และความล้มเหลวของตัวควบคุม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เราได้ตรวจสอบผลของการกล้าในการเจริญเติบโตของเซลล์ CHO
และผลผลิตโปรตีนในOSRs ขนาดเล็กและขนาดใหญ่ ใช้
OSR 1-L
มูลค่ากล้าน้อยที่สุดซึ่งมั่นใจการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่ดีประสิทธิภาพการทำงานที่ถูกกำหนดเป็นเวลาสามCHO เซลล์ ในฐานะที่เป็นปริมาณการทำงานเพิ่มขึ้นและลดลงกล้า pH และ DO ข้อ จำกัด ที่เกิดขึ้นในวัฒนธรรม กล้าน้อยที่สุดที่จำเป็นในการหลีกเลี่ยงข้อ จำกัด เหล่านี้เป็นเซลล์เส้นขึ้นและตั้งแต่ 7 9 เพื่อ hour1 น่าแปลกที่ออกซิเจนไม่ปรากฏว่าส่วนใหญ่เป็นปัจจัยที่สำคัญที่ จำกัด การเจริญเติบโตของเซลล์ แต่ค่า pH วัฒนธรรมที่ดูเหมือนจะเป็นปัจจัยที่สำคัญที่สุด ในวัฒนธรรมของ CHO-DG44 และ CHO-TNFR เซลล์ที่มีค่า pH ลดลงต่ำกว่า 6.6 ไม่เพียง แต่ลดลงถึง30 อากาศนั่ง ตามที่ได้รายงานไปก่อนหน้านี้ในการระงับวัฒนธรรมของเซลล์ที่เลี้ยงลูกด้วยนมทำ 30 อากาศนั่งไม่ได้ จำกัด ในขณะที่พีเอช 6.6 ด้านล่างเป็น [13] การสะสม CO2 ในวัฒนธรรมที่มีกล้าไม่เพียงพออาจจะเป็นเหตุผลหลักที่ทำให้ค่าพีเอชต่ำสังเกตในวัฒนธรรมเหล่านี้ ความหนาแน่นของเซลล์ของวัฒนธรรมประสบข้อ จำกัด ต่ำกว่าของวัฒนธรรมที่มีเพียงพอกล้า อย่างไรก็ตามชีวมวลมีความคล้ายคลึงกับที่แตกต่างกันวัฒนธรรมใน OSR เดียวกันเป็นอิสระจากกล้า นี้แสดงให้เห็นว่าขนาดของเซลล์เฉลี่ยเพิ่มขึ้นในวัฒนธรรมที่ประสบค่าpH หรือข้อ จำกัด DO, ปรากฏการณ์ที่รายงานก่อนและสงสัยว่าจะเชื่อมโยงไปยังโทรศัพท์มือความเครียด[14] การผลิตเซลล์ที่เฉพาะเจาะจงได้รับรายงานเพิ่มขึ้นกับขนาดของเซลล์ [15] ซึ่งอาจอธิบายได้ว่าทำไม titers โปรตีนที่ไม่ได้รับผลกระทบในวัฒนธรรมผู้ประสบค่าpH หรือข้อ จำกัด DO เมื่อเทียบกับผู้ที่ไม่ได้. ใน 250 มิลลิลิตร 500 มิลลิลิตรและ OSRs 1-L ค่ากล้าเดียวกันนำไปสู่การเจริญเติบโตของเซลล์ที่คล้ายกันวัฒนธรรมเงื่อนไข (pH และ DO) และ recombinantprotein อัตราผลตอบแทน ผลการศึกษานี้แสดงให้เห็นว่าค่ากล้าน้อยที่สุดสำหรับกระบวนการชีวภาพสามารถกำหนดที่ขนาดเล็กสำหรับเซลล์โคลนได้รับและค่าเหล่านี้ยังคงอยู่ที่ถูกต้องเมื่อระดับขึ้น เซลล์ CHO-IgG ที่ปลูกโดยไม่ต้องมีค่า pH หรือ DO ควบคุมใน OSR 200-L เติบโตในทำนองเดียวกันมีtiters เทียบเท่าโปรตีนและสร้างรายละเอียดค่าpH เดียวกับเซลล์ใน 1 และ OSRs 5-L เพราะสามOSRs เข้ารับการผ่าตัดในเวลาเดียวกันกล้าผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า largescale กระบวนการชีวภาพสามารถดำเนินการได้โดยไม่ต้องมีค่า pH หรือ DO ควบคุมเป็นตราบเท่าที่เพียงพอกล้า(7-10 hour1) มีการเก็บรักษาที่เหมาะสมผ่านสภาพการเพาะปลูก (เช่นปริมาณการทำงานอัตราการกวน และเรขาคณิตของเรือ) นอกจากนี้ยืนยันว่าสำหรับวัฒนธรรมที่มีเดียวกันกล้าแนวโน้มเดียวกันและค่าสามารถคาดว่าจะมีความหนาแน่นของเซลล์พีเอชและการผลิตโปรตีนเป็นอิสระจากขนาด ดังนั้นจึงกล้าที่ดูเหมือนจะเป็นสิ่งที่ดีทำนายสำหรับขยายขีดความสามารถใน OSRs เหล่านี้กระบวนการชีวภาพการสอบสวนที่เป็นอิสระมีความน่าสนใจที่พวกเขามีค่าใช้จ่ายที่มีประสิทธิภาพและง่าย พวกเขาไม่จำเป็นต้องมีการควบคุมหรือการเพิ่มขึ้นของฐานหรือออกซิเจนบริสุทธิ์เพื่อให้สภาพการเพาะปลูกที่เหมาะสม ความทนทานของกระบวนการชีวภาพดังกล่าวยังสูงที่พวกเขาเป็นอิสระจากการสอบสวนและความล้มเหลวในการควบคุม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ที่น่าสนใจ เช่นที่น่าสนใจ เช่นที่น่าสนใจ เช่นที่น่าสนใจ เช่นวัฒนธรรมที่ประสบอ หรือทำข้อ จำกัด เมื่อเทียบกับผู้ที่ไม่ได้
.
250 มล. และ 500 มล. 1-l osrs , กล้าเหมือนกันค่า า
การเจริญเติบโตของเซลล์ที่คล้ายกันเงื่อนไขวัฒนธรรม ( pH ) และอัตราผลตอบแทน recombinantprotein

ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า กล้าน้อยที่สุดค่า
A ชื่นสามารถมุ่งมั่นที่ขนาดเล็กให้เซลล์โคลน
และที่ค่าเหล่านี้จะสามารถใช้ได้เมื่อขยายขนาด .โช IgG เซลล์
ปลูกโดยไม่ต้องควบคุม pH หรือทำใน 200-l osr เติบโต
ในทํานองเดียวกัน มีรีคอมบิแนนท์โปรตีนเทียบเท่าโดยและสร้าง
โปรไฟล์เป็นเซลล์เดียวกัน pH 1 และแยก osrs . เพราะสาม
osrs ดำเนินการในชนิดเดียวกัน ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า มากกว่า
bioprocesses สามารถดำเนินการได้โดยไม่ต้องอ หรือทำตัวเป็น
ยาวเป็นจำนวนเพียงพอ ( 7 – 10 hour1
ที่น่าสนใจ เช่นที่น่าสนใจ เช่น