Adherence of lactobacilli to HT-29 cells was examined as described previously (Chauviere et al. 1992). The HT-29 monolayer cells were prepared on glass cover slips and placed in six-well plates (Corning Inc., NY, USA), washed twice with phosphate-buffered saline (PBS, pH 7.4). 1 ml lactobacilli (108 CFU/ml) and 1 ml the cell line culture medium were added to each well of the tissue culture plate, and the plate was incubated at 37 °C in 5% CO2. After incubation for 2 h, the monolayers were washed four times with sterile PBS, fixed with methanol for 30 min, stained with Gram, and examined microscopically. The adherence index was determined from 20 random microscopic fields of adhering lactobacilli to 100 HT-29 cells.
การยึดติดของแลคโตจะ HT-29 เซลล์ถูกตรวจสอบตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Chauviere et al. 1992) เซลล์ monolayer HT-29 ถูกจัดทำขึ้นโดยบิลแก้วครอบและวางไว้ในจานเดียวหก (Corning อิงค์, NY, USA), การล้างด้วยน้ำเกลือสองครั้งฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (พีบีเอสพีเอช 7.4) 1 มิลลิลิตรแลคโต (108 CFU / ml) และ 1 มิลลิลิตรอาหารเลี้ยงเซลล์ที่ถูกเพิ่มเข้ามาในบ่อเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อแผ่นแต่ละแผ่นและได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสใน 5% CO2 หลังจากการบ่มเป็นเวลา 2 ชั่วโมง, monolayers ถูกล้างสี่ครั้งที่มีการฆ่าเชื้อพีบีเอส, การแก้ไขด้วยเมทานอลเป็นเวลา 30 นาที, ย้อมด้วยสีแกรมและการตรวจสอบกล้องจุลทรรศน์ ดัชนีการยึดมั่นถูกกำหนดจาก 20 เขตกล้องจุลทรรศน์แบบสุ่มของการยึดมั่นแลคโต 100 HT-29 เซลล์
การแปล กรุณารอสักครู่..
