The polyol dehydrogenase PDH-11300

The polyol dehydrogenase PDH-11300 from Deinococcus geothermalis was cloned, functionally expressed in Escherichia coli and biochemically characterized. The enzyme showed the highest activity in the oxidation of xylitol and 1,2-hexanediol and had an optimum temperature of 45 °C. The enzyme exhibited a View the MathML source of 48.3 °C. The View the MathML source is the temperature where 50% of the initial activity remains after incubation for 1 h. In order to elucidate the structural reasons contributing to thermostability, the substrate-binding loop of PDH-11300 was substituted by the loop-region of a homolog enzyme, the galactitol dehydrogenase from Rhodobacter sphaeroides (PDH-158), resulting in a chimeric enzyme (PDH-loop). The substrate scope of this chimera basically represented the average of both wild-type enzymes, but surprisingly the View the MathML source was noticeably increased by 7 °C up to 55.3 °C. Further mutations in the active site led to identification of residues crucial for enzyme activity. The cofactor specificity was successfully altered from NADH to NADPH by an Asp55Asn mutation, which is located at the NAD+ binding cleft, without influencing the catalytic properties of the dehydrogenase.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

dehydrogenase โพลิออล PDH-11300 จาก geothermalis deinococcus ถูกโคลนแสดงหน้าที่ใน Escherichia coli และลักษณะทางชีวเคมี เอนไซม์แสดงให้เห็นว่ากิจกรรมที่สูงที่สุดในออกซิเดชันของไซลิทอลและ 1,2-hexanediol และมีอุณหภูมิที่เหมาะสมจาก 45 องศาเซลเซียส เอนไซม์แสดงมุมมองที่เป็นแหล่ง mathml ของ 48.3 องศาเซลเซียสมุมมองแหล่ง mathml คืออุณหภูมิที่ 50% ของกิจกรรมเริ่มต้นที่ยังคงอยู่หลังจากการบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมง เพื่อที่จะอธิบายเหตุผลของโครงสร้างเอื้อต่อการทนร้อน, ห่วงสารตั้งต้นผูกพันของ PDH-11300 ถูกสับเปลี่ยนโดยวงภูมิภาคของเอนไซม์ homolog, dehydrogenase galactitol จาก sphaeroides rhodobacter (PDH-158)ส่งผลให้เอนไซม์ลูกผสม (PDH วง) ขอบเขตพื้นผิวของความฝันนี้โดยทั่วไปเป็นตัวแทนของค่าเฉลี่ยของทั้งเอนไซม์ป่าชนิด แต่ที่น่าประหลาดใจมุมมองแหล่ง mathml เพิ่มขึ้นอย่างเห็นได้ชัดโดย 7 องศาเซลเซียสถึง 55.3 องศาเซลเซียส การกลายพันธุ์ต่อไปในเว็บไซต์ที่ใช้งานนำไปสู่​​การระบุตัวตนของสิ่งตกค้างที่สำคัญสำหรับการทำงานของเอนไซม์จำเพาะปัจจัยการเปลี่ยนแปลงที่ประสบความสำเร็จจากการ nadh NADPH จากการกลายพันธุ์ asp55asn, ซึ่งตั้งอยู่ที่ nad ผูกพันแหว่งโดยไม่ต้องมีอิทธิพลต่อคุณสมบัติของตัวเร่งปฏิกิริยาไฮโดรจี

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โพลิออลน้ำตาล dehydrogenase PDH 11300 จาก Deinococcus geothermalis โคลน แสดงฟังก์ชันใน Escherichia coli และ biochemically ลักษณะ เอนไซม์นี้พบกิจกรรมสูงสุดในการเกิดออกซิเดชันของไซลิทอลและ hexanediol 1, 2 และมีอุณหภูมิ 45 องศาเซลเซียสเหมาะสม เอนไซม์นี้จัดแสดงมุมมองแหล่ง MathML 48.3 องศาเซลเซียส มุมมองต้น MathML เป็นอุณหภูมิอยู่ที่ 50% ของกิจกรรมเริ่มต้นหลังจากฟักตัวใน 1 h เพื่อเหตุผลทางโครงสร้างที่เอื้อต่อการ thermostability elucidate ลูปผูกพื้นผิวของ PDH 11300 ถูกแทน โดยภูมิภาควนของเอนไซม์ homolog, dehydrogenase galactitol จาก Rhodobacter sphaeroides (PDH-158), เกิดขึ้นในเอนไซม์ chimeric (PDH วง) ขอบเขตพื้นผิวของชิเมร่านี้แสดงค่าเฉลี่ยของเอนไซม์ทั้งสองชนิดของป่าโดยทั่วไป แต่จู่ ๆ ดูต้น MathML อย่างเห็นได้ชัดขึ้น โดย 7 ° C ถึง 55.3 องศาเซลเซียส กลายพันธุ์ไปในใช้นำไปสู่รหัสของตกค้างที่สำคัญสำหรับเอนไซม์ Cofactor specificity มีสำเร็จการเปลี่ยนแปลงจาก NADH ไป NADPH โดยการกลายพันธุ์ Asp55Asn ซึ่งตั้งอยู่ที่ผูกและ cleft โดยไม่มีอิทธิพลต่อคุณสมบัติของ dehydrogenase ตัวเร่งปฏิกิริยา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

alcohol dehydrogenase สุขภาพ ฟันที่ pdh -11300 จาก geothermalis deinococcus ถูกจำลองไว้อย่างเต็มไปด้วยประโยชน์ใช้สอยในริคีอาและ biochemically ลักษณะ แสดงให้เห็นการทำงานของเอนไซม์ที่สูงที่สุดที่อยู่ในออกซิไดส์ของไซลิตอลและ 1,2 - hexanediol และมี อุณหภูมิ สูงสุดที่ of 45 ° C เอนไซม์ที่แสดงออกแสดงแหล่งที่มาของ mathml 48.3 ° C . Aแหล่งที่มาดูที่ mathml ที่มี อุณหภูมิ ที่ 50% ของกิจกรรมครั้งแรกที่อยู่หลังจากผู้ประกอบการใน 1 ชั่วโมง ในการสั่งซื้อจะอธิบายถึงเหตุผลเชิงโครงสร้างที่มีผลต่อการต่อพ่วง thermostability ยึดเข้ากับฐาน - มีผลผูกพันของ pdh -11300 แทนที่โดยเป็นแบบต่อพ่วงของเอนไซม์ homolog ที่ alcohol dehydrogenase galactitol จาก sphaeroides rhodobacter ( pdh -158 )ส่งผลให้ในเอนไซม์ chimeric ( pdh - แบบต่อพ่วง) ขอบเขตการยึดเข้ากับฐานของความผันนี้โดยพื้นฐานแล้วนำเสนอโดยเฉลี่ยของเอ็นไซม์ป่า - พิมพ์ทั้งสองอย่างแต่อย่างน่ามหัศจรรย์ใจแหล่งที่มาดูที่ mathml ที่เพิ่มขึ้นจาก 7 ° C ถึง/ 55.3 ไมล์° C อย่างเห็นได้ชัด เข้าไปเปลี่ยนแปลงรหัสเพิ่มเติมในไซต์ที่ใช้งานอยู่ที่นำไปสู่การระบุตัวตนของสารตกค้างสิ่งสำคัญยิ่งสำหรับการทำงานของเอนไซม์Mainstream )เพียงเท่านั้น cofactor ก็จะเปลี่ยนไปจาก nadh เพื่อ nadph โดยคือมัน ASP 55 อาหาร ประเภท s ucking lamb , asn quail ซึ่งตั้งอยู่ที่ตัดเย็บ NAD โดยไม่มีเครื่องฟอกไอเสียที่อิทธิพลต่อคุณสมบัติของ alcohol dehydrogenase เรียบร้อยแล้ว