Hemolysis and lecithinase detection

Hemolysis and lecithinase detection. Each strain was streaked onto 5% sheep
blood agar and B. cereus selective agar containing egg yolk and polymyxin B
(Sigma) and incubated at 37°C for 24 to 48 h to detect patterns of hemolysis and
lecithinase production, respectively.
Bacteriocin assays. A colony overlay assay was used to screen for bacteriocinlike
activity (33). All the probiotic strains tested were found to grow well on
Luria-Bertani (LB) medium. For this reason, cultures of the probiotic strains that
were to be tested for bacteriocin-like activity were incubated overnight in LB
medium. Then 5-l portions of the overnight cultures were inoculated as spots
on LB medium plates, which were incubated at 37°C for 24 h before the cells
were killed by exposure to chloroform vapor for 30 min. After exposure to air,
the plates were overlaid with LB medium or brain heart infusion soft agar
(according to the requirements of the indicator strain) that had been inoculated
with an overnight culture of an indicator strain and reincubated. The presence of
zones of growth inhibition around the spots at any of the times examined (5, 8,
24, and 48 h postinoculation) was considered a positive response. Proteinase K
treatment in colony assays of the probiotic strain Enterogermina (B. clausii) was
performed as described by Faye et al., with modifications (9). Portions (80 g
total) of a proteinase K preparation (20-mg ml1 stock solution) were applied as
spots around the producer colonies. The plates were incubated at 37°C for
approximately 2 h before the chloroform treatment and overlay. Control plates
without producer colonies were treated with proteinase K as described above.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตรวจ hemolysis และ lecithinase ต้องใช้แต่ละเป็นลายบนแกะ 5%เลือด agar และ cereus เกิด selective agar ที่ประกอบด้วยไข่แดงและ polymyxin B(ซิกมา) และ incubated ที่ 37° C ใน 24 ถึง 48 h เพื่อตรวจสอบรูปแบบของ hemolysis และlecithinase ผลิต ตามลำดับAssays bacteriocin ใช้การวิเคราะห์การซ้อนทับอาณานิคมกับจอ bacteriocinlikeกิจกรรม (33) พบทั้งหมดโปรไบโอติกส์สายพันธุ์ทดสอบการเจริญเติบโตดีสื่อ Luria-Bertani (ปอนด์) ด้วยเหตุนี้ วัฒนธรรมของโปรไบโอติกส์ strains ที่จะทดสอบสำหรับกิจกรรมเช่น bacteriocin ได้ incubated ค้างคืนปอนด์สื่อ แล้ว 5 l ส่วนของวัฒนธรรมค้างคืนที่ inoculated เป็นจุดในแผ่นขนาดปอนด์ ซึ่งมี incubated ที่ 37° C ใน 24 ชมก่อนเซลล์ถูกฆ่าจากการสัมผัสกับ chloroform ไอสำหรับ 30 นาที หลังจากสัมผัสกับอากาศแผ่นถูก overlaid กับปอนด์ปานกลางหรือสมองหัวใจคอนกรีตนุ่ม agar(ตามความต้องการของสายพันธุ์ตัวบ่งชี้) ที่ได้รับ inoculatedมีวัฒนธรรมการค้างคืนต้องใช้เป็นตัวบ่งชี้ และ reincubated สถานะของโซนของการยับยั้งการเจริญเติบโตรอบ ๆ จุดที่ทุกครั้งที่ตรวจสอบ (5, 824 และ 48 h postinoculation) ถือเป็นคำตอบ Proteinase Kรักษาในอาณานิคม assays โปรไบโอติกส์สายพันธุ์ Enterogermina (เกิด clausii)ดำเนินการตามที่อธิบายไว้โดยเฟย์และ al. มีการปรับเปลี่ยน (9) บางส่วน (80 กรัมรวม) ของ proteinase K เตรียม (20 มิลลิกรัมมล. 1 หุ้นโซลูชัน) ถูกนำไปใช้เป็นจุดทั่วอาณานิคมโปรดิวเซอร์ แผ่นก็ incubated ที่ 37° C สำหรับประมาณ 2 h ก่อนการรักษาคลอโรฟอร์มและซ้อนทับ แผ่นควบคุมโดยโปรดิวเซอร์ อาณานิคมได้รับการรักษา ด้วย proteinase K ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ภาวะเม็ดเลือดแดงแตกและ lecithinase การตรวจสอบ แต่ละสายพันธุ์ได้รับลายลง 5%
แกะวุ้นเลือดและB. cereus วุ้นเลือกที่มีส่วนผสมของไข่แดงและ polymyxin B
(ซิกม่า) และบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ถึง 48
ชั่วโมงในการตรวจสอบรูปแบบของการแตกของเม็ดเลือดแดงและการผลิตlecithinase ตามลำดับ.
ตรวจแบคทีเรีย ทดสอบซ้อนทับอาณานิคมได้ถูกใช้ในหน้าจอสำหรับ bacteriocinlike
กิจกรรม (33) ทุกสายพันธุ์โปรไบโอติกการทดสอบพบว่าเจริญเติบโตได้ดีใน
Luria-Bertani (LB) ขนาดกลาง ด้วยเหตุนี้วัฒนธรรมของโปรไบโอติกสายพันธุ์ที่กำลังจะได้รับการทดสอบว่าเป็นกิจกรรมที่แบคเหมือนถูกบ่มค้างคืนใน LB กลาง จากนั้น 5? ส่วนลิตรวัฒนธรรมค้างคืนถูกเชื้อเป็นจุดบนLB แผ่นขนาดกลางที่ได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงก่อนที่เซลล์ถูกฆ่าตายจากการสัมผัสกับไอคลอโรฟอร์มเป็นเวลา 30 นาที หลังจากสัมผัสกับอากาศ, แผ่นที่ถูกบุด้วย LB กลางหรือสมองหัวใจแช่วุ้นนุ่ม(ตามความต้องการของสายพันธุ์ตัวบ่งชี้) ที่ได้รับเชื้อที่มีวัฒนธรรมในชั่วข้ามคืนของสายพันธุ์ตัวบ่งชี้และreincubated การปรากฏตัวของโซนของการยับยั้งการเจริญรอบจุดที่ใด ๆ ครั้งที่การตรวจสอบ (5, 8, 24 และ 48 ชั่วโมง postinoculation) ได้รับการพิจารณาตอบสนองเชิงบวก โปร K การรักษาในการตรวจอาณานิคมของโปรไบโอติกสายพันธุ์ Enterogermina (บี clausii) ได้ดำเนินการตามที่อธิบายFaye et al., มีการปรับเปลี่ยน (9) บางส่วน (80 กรัมรวม) ของการจัดทำโปร K (20 มก. มล. 1 แก้ปัญหาหุ้น) ถูกนำไปใช้เป็นจุดรอบอาณานิคมผลิต แผ่นถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลาประมาณ2 ชั่วโมงก่อนการรักษาคลอโรฟอร์มและซ้อนทับ แผ่นควบคุมโดยไม่ต้องอาณานิคมผู้ผลิตได้รับการรักษาด้วยโปร K ที่อธิบายข้างต้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การตรวจหาเลซิทิเนส . แต่ละสายพันธุ์แกะลายลง 5 %
เลือดวุ้นและ B . cereus เลือกวุ้นผสมไข่แดงและ polymyxin B
( Sigma ) และบ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 24 ถึง 48 ชั่วโมงเพื่อตรวจสอบรูปแบบการ

ต่อการผลิตเลซิทิเนสตามลำดับ ) . อาณานิคมซ้อนทับ ( ใช้สำหรับกิจกรรมที่หน้าจอ bacteriocinlike
( 33 )ทุกโปรไบโอติกสายพันธุ์ที่ทดสอบพบว่าเจริญเติบโตได้ดีบน
ลุเรียแบร์ตานิ ( LB ) ปานกลาง ด้วยเหตุนี้ วัฒนธรรมของเชื้อโปรไบโอติกที่
ถูกทดสอบต่อ เช่น กิจกรรมบ่มค้างคืนใน LB
) 5 -  l ส่วนของวัฒนธรรมในชั่วข้ามคืนเป็นหัวเชื้อปอ
บนปอนด์กลางแผ่น ซึ่งถูกบ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมงก่อนที่เซลล์
ถูกฆ่าโดยการสัมผัสกับคลอโรฟอร์มไอน้ำเป็นเวลา 30 นาที หลังจากการเปิดรับอากาศ
จานถูกหุ้มด้วยปอนด์ขนาดกลางหรือสมองหัวใจอ่อนแช่วุ้น
( ตามความต้องการของตัวบ่งชี้ความเครียดที่ได้รับเชื้อ
กับวัฒนธรรมข้ามคืนของตัวบ่งชี้ความเครียดและ reincubated . การปรากฏตัวของ
โซนยับยั้งการเจริญเติบโตรอบ ๆจุดที่ใด ๆของเวลาการตรวจสอบ ( 5 , 8 ,
2448 ชั่วโมง ) และเริ่มมีการพิจารณาการตอบสนองในเชิงบวก โปรตีน k
รักษาในอาณานิคม ) ของ enterogermina สายพันธุ์ โปรไบโอติก ( พ. clausii )
) ตามที่อธิบายไว้โดยเฟย์ et al . , มีการปรับเปลี่ยน ( 9 ) ส่วน ( 80  g
รวม ) ของโปรตีนเคเตรียม ( 20 มิลลิกรัม ml  1 หุ้นโซลูชั่น ) มาใช้เป็นจุดๆ
โปรดิวเซอร์อาณานิคม จานถูกบ่มที่ 37 ° C
ประมาณ 2 ชั่วโมง ก่อนเข้าไปรักษา และบรรยาย ควบคุมอาณานิคมผู้ผลิตแผ่น
โดยไม่ต้องได้รับการรักษาด้วยโปรตีน k ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น