We demonstrate for the first time i

We demonstrate for the first time in the current study that inhaled doxycycline, in an adequate formulation with HP-gamma-CD, inhibits the allergen-induced airway reactivity, eosinophilic infiltration in BAL compartment and in bronchial walls, and peribronchial inflammation. Furthermore, we provide evidence for the first time that inhaled doxycycline prevents allergen-induced bronchial morphological changes and thus inhibits glandular hyperplasia, airway wall and smooth muscle layer thickening and peribronchial collagen deposition. Effects of doxycycline on tissue remodeling were comparable to those obtained after exposure to fluticasone, an inhaled steroid on the market used in the current study as a reference therapy. Mechanisms of pharmacological activity of doxycycline in the context of bronchial inflammation were investigated and the main findings are a doxycycline-induced MMP inhibition and impairment of Th2 inflammation. Indeed, doxycycline exposure leads to a significant increase in the anti-inflammatory cytokine IL-10 and a decrease of IL-5 and IL-13 levels in the lung parenchyma. Doxycycline also reduced MMP-9 activation in the lungs from mice exposed to allergens.

In line with our previous works demonstrating that MMPs and more specifically MMP-9 play a critical role in allergen-induced airway inflammation [7], [12], [13], [15] and [31], we designed the present work as an attempt to control airway inflammation and remodeling by a molecule known to be a potent MMP inhibitor. Doxycycline was selected because its MMP inhibitory activity was confirmed by numerous studies and because this molecule was shown to have a very low toxicity in human adults. To our knowledge, this is the first demonstration that an inhaled non-steroidal drug (doxycycline) exerts an effect on both airway inflammation and airway remodeling features such as Goblet cells hyperplasia, collagen deposition and basement membrane and smooth muscle cells layer thickness. Other researchers have published an interesting report on the inhibition of toluene diisocyanate-induced airway inflammation by doxycycline [32]. In that paper, however, the drug was given orally at high dosages, higher than those currently recommended for antimicrobial therapy and remodeling parameters were not assessed. In the present study, mice were challenged with the allergen by an exposure to a new formulation given by aerosols and not by intratracheal instillation. Our model may therefore mimic more closely the clinical situation by the use of a well-characterized model of allergen-induced inflammation and airway remodeling in mice. By using a topical therapeutical approach allowed by an original galenic formulation, our study clearly shows that an inhaled doxycycline-based therapy for asthma is of potential interest and is worth to be confirmed in other animal models and possibly in humans.

Doxycycline in solution without excipient has a very low pH and accidental tetracycline inhalation has been reported to be responsible for toxic pneumonia [33]. In addition, doxycycline is only poorly soluble at pH 7.4 and is not stable with a tendency to precipitate rapidly. We therefore used cyclodextrins (HP-gamma-CD) for increasing the solubility and stability of doxycycline at physiological pH. We did previously describe that inhaled HP-gamma-CD was non-toxic and did not provoke by itself some modifications of the airway architecture or induce inflammation [29]. The selection of this specific cyclodextrin is based on its higher potency to increase doxycycline solubility as compared to different related compounds (data not shown), and mainly on its safety profile [29]. In the present study, we demonstrate that HP-gamma-CD does not interfere with the inflammatory response and does not bear per se any pharmacological activity when used in a topical lung application in an inflammatory airway disease. Furthermore, we demonstrated previously that HP-gamma-CD does not modify the aerosol characteristics in terms of droplet size and nebulization speed in our experimental conditions [29].

To date, there are still controversies about the exact mechanism for MMP inhibition by tetracyclines. In the present study, we investigated whether the topical exposure by inhalation to doxycycline modulated the expression of key Th2 and anti-inflammatory cytokines and we found IL-5 and IL-13 production being decreased and, interestingly, a large increase in the anti-inflammatory cytokine IL-10 production. To our knowledge, this is the first report of a decreased production of the Th2 cytokines IL-5 and IL-13 after tetracycline exposure. Due to the properties of those two cytokines, this observation could explain at least in part the decreased airway responsiveness, reduced eosinophilic inflammation and airway remodeling prevention [5], [6] and [34]. To date, the precise mechanism of action of the inhaled steroid fluticasone leading to control of inflammation is also not really well understood. However, our result suggests different mechanism of action between fluticasone and Doxycycline regarding the differences found in their respective effects on IL-10 production. The finding of an increased IL-10 production is of great interest since a relative IL-10 deficiency could favour asthma. Indeed, the number of IL-10-producing T cells has been reported to be lower in severe asthmatics when compared to milder patients [35] and IL-10 production is increased in the BAL cells of mice exposed to an immunotherapy protocol [36]. IL-10 has also been shown to decrease eosinophil survival and cytokine secretion [37] and could even mediate a part of the anti-inflammatory effects of steroid [38]. Finally, IL-10 interacts with the MMP metabolism since it inhibits MMP-2 and -14 transcription in some cancer cell lines [39] and [40]. Taken together, these data suggest that doxycycline-induced IL-10 production could inhibit the allergen-induced airway inflammation and airway remodeling (collagen deposition and membrane thickening) both indirectly by diminishing the venue of inflammatory cells and directly by inhibiting MMP transcription. Altogether, our data about cytokine measurements suggest an inhibition of Th2 inflammation and a possible stimulation of T regulatory lymphocytes (Treg) by doxycycline inhalation [32].

Doxycycline decreases the inducible nitric oxide synthase (NOS) activity as demonstrated in vitro [41] and in an animal model of LPS exposure [42]. As a correlation has been found between nitric oxide production and the extent of airway remodeling in humans [43], another possible explanation of our findings could reside in an inhibition of nitric oxide synthesis by tetracyclines.

Nevertheless, direct MMP inhibition by doxycycline is thought to be the main cause of many pharmacological effects of tetracyclines. Indeed, doxycycline has been proposed as a therapy to reduce MMP activation and expression (particularly MMP-2 and -9) in abdominal aortic aneurysms [44] and has been reported to decrease pathological remodeling after myocardial infarction in rat [45]. Doxycycline has the ability to inhibit MMPs belonging to the gelatinase subfamily [17] and [46] but this compound also inhibit other MMPs as MMP-3 and MMP-7 [47]. Moreover, doxycycline has been described to have putative inhibitory effects on members of collagenase subfamily of MMPs. Indeed, doxycycline is quite effective on MMP-8 and MMP-13 inhibition and, in a lesser extent, on MMP-1 [19] and [48]. In the present study, we can not rule out, however, that an inhibition of non-gelatinase members of the MMP family could cause some side effects. In the present work, mice exposed to doxycycline for up to 96 days did not display any sign of exaggerated inflammation or any visible toxicity. In the present study we demonstrate that, after doxycycline exposure, global MMP activity in lung tissue is decreased and that the proportion of activated MMP-9 is lower than measured in vehicle-exposed mice. This strongly suggests that, in our study, a significant part of the pharmacological effect obtained with doxycycline is linked to a direct MMP inhibition as the central role of MMP-9 in the allergen-induced inflammation has been described elsewhere using the same protocol of allergen immunisation and exposure.

In conclusion, the administration of doxycycline by aerosols in a complex with HP-gamma-CD prevents the allergen-induced airway inflammation and remodeling by modulation of both MMPs and interleukins. Doxycycline should be considered for other studies designed to confirm its disease modifying agent role in asthma. Our results suggest that inhaled doxycycline should be investigated as a potential new therapy for asthma.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เราแสดงเป็นครั้งแรกในการศึกษาปัจจุบันที่ช่วยในดอกซีไซคลีน ในการกำหนดเพียงพอกับ HP-แกมมาซีดี ยับยั้งการเกิดปฏิกิริยาเกิด allergen ทำ แทรกซึม eosinophilic ในดุลช่อง และผนัง bronchial และ peribronchial อักเสบ นอกจากนี้ เรามีหลักฐานเป็นครั้งแรกที่ช่วยในดอกซีไซคลีนป้องกันเกิด allergen bronchial สัณฐานเปลี่ยนแปลง และจึง ยับยั้งการเจริญเกินของต่อม ทำผนัง และกล้ามเนื้อเรียบหนาชั้น และสะสมคอลลาเจน peribronchial ผลของดอกซีไซคลีนเนื้อเยื่อเปลี่ยนแปลงเทียบเท่ากับผู้ที่ได้รับหลังจากสัมผัสกับ fluticasone สเตอรอยด์การสูดดมในตลาดที่ใช้ในการศึกษาปัจจุบันบำบัดอ้างอิงได้ กลไกของกิจกรรม pharmacological ของดอกซีไซคลีนในบริบทของ bronchial ถูกสอบสวน และพบหลักจะยับยั้ง MMP ดอกซีไซคลีนเกิดและผลของ Th2 แน่นอน ดอกซีไซคลีนแสงนำไปสู่การเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญใน IL-10 อย่างไร cytokine แก้อักเสบและลดระดับ IL-13 และ IL-5 ในพาเรงไคมาปอด ดอกซีไซคลีนลดเปิดใช้งาน MMP-9 ในปอดจากหนูที่สัมผัสกับสารก่อภูมิแพ้โดยก่อนหน้านี้เราทำงานเห็นว่า MMPs และอื่น ๆ โดยเฉพาะ MMP-9 มีบทบาทสำคัญในทำ allergen เกิดอักเสบ [7], [12], [13], [15] และ [31], เราออกแบบงานนำเสนอเป็นความพยายามในการควบคุมการอักเสบจำกัด(มหาชน)และการปรับปรุง โดยโมเลกุลที่ต้องมีสารยับยั้ง MMP ที่มีศักยภาพ ดอกซีไซคลีนถูกเลือกเนื่อง จากกิจกรรมของลิปกลอสไข MMP ยืนยันการรับการศึกษามากมาย และเนื่อง จากโมเลกุลนี้ได้แสดงให้มีความเป็นพิษต่ำมากในมนุษย์ผู้ใหญ่ ความรู้ของเรา โดยการสาธิตครั้งแรกว่า เป็นยาไม่ดม (ดอกซีไซคลีน) exerts ผลอักเสบทำและปรับปรุงคุณลักษณะเช่น Goblet เซลล์เจริญเกิน สะสมคอลลาเจน และเซลล์กล้ามเนื้อเรียบและเยื่อใต้ดินความหนาของชั้นจำกัด(มหาชน) นักวิจัยอื่น ๆ ได้เผยแพร่รายงานน่าสนใจในการยับยั้งการอักเสบเกิด diisocyanate ทำโทลูอีน โดยดอกซีไซคลีน [32] ในกระดาษนั้น ไร ยาเสพติดณเนื้อหา dosages สูง สูง กว่าที่แนะนำสำหรับจุลินทรีย์บำบัดในปัจจุบันเปลี่ยนแปลงพารามิเตอร์ถูกประเมินไม่ ในการศึกษาปัจจุบัน หนูถูกท้าทาย ด้วย allergen ที่ตามกำหนดใหม่ที่กำหนด โดยโรง และไม่ intratracheal instillation รุ่นของเราอาจจึงเลียนแบบมากขึ้นสถานการณ์ทางคลินิก โดยใช้แบบจำลองห้อง characterized allergen เกิดอักเสบและทำการปรับปรุงในหนู โดยใช้วิธีการ therapeutical เฉพาะที่ได้ โดยการกำหนด galenic เดิม เราชัดเจนแสดงว่า การดมดอกซีไซคลีนใช้บำบัดโรคหืดน่าสนใจที่มีศักยภาพ และจะคุ้มค่าได้รับการยืนยัน ในรูปแบบสัตว์อื่น ๆ และอาจจะ ในมนุษย์ดอกซีไซคลีนในโซลูชันที่ไม่มี excipient มีค่า pH ต่ำมาก และมีการรายงานอุบัติเหตุเตตราไซคลีนดมจะรับผิดชอบโรคพิษ [33] นอกจากนี้ ดอกซีไซคลีนจะละลายน้ำไม่ดีที่ pH 7.4 และไม่มั่นคง มีแนวโน้มที่จะ precipitate อย่างรวดเร็ว เราจึงใช้ cyclodextrins (HP แกมมา CD) สำหรับการเพิ่มการละลายและความมั่นคงของดอกซีไซคลีนที่ pH สรีรวิทยา เราเคยได้อธิบายว่า ดม HP แกมมา-CD ไม่เป็นพิษ และไม่ไม่กระตุ้นปรับเปลี่ยนบางอย่างของสถาปัตยกรรมทำ ด้วยตัวเอง หรือก่อให้เกิดการอักเสบ [29] การเลือกของ cyclodextrin นี้เฉพาะอยู่ บนศักยภาพที่สูงเพื่อเพิ่มการละลายดอกซีไซคลีนเมื่อเทียบกับสารประกอบที่เกี่ยวข้องแตกต่างกัน (ข้อมูลไม่แสดง), และส่วนใหญ่ของโพรไฟล์ความปลอดภัย [29] ในการศึกษาปัจจุบัน เราแสดงให้เห็นว่า HP-แกมมาซีดีไม่รบกวนกับการตอบสนองการอักเสบ และไม่หมีต่อ se กิจกรรม pharmacological ใด ๆ เมื่อใช้ในโปรแกรมประยุกต์เฉพาะปอดในโรคอักเสบทำการ นอกจากนี้ เราแสดงไว้ก่อนหน้านี้ว่า HP แกมมา CD ปรับเปลี่ยนลักษณะขวดในหยดขนาด nebulization ความเร็วและสภาพการทดลองของเรา [29]วันที่ ยังมี controversies เกี่ยวกับกลไกในการยับยั้ง MMP โดย tetracyclines แน่นอน ในการศึกษาปัจจุบัน เราตรวจสอบว่า ค่าของคีย์ Th2 สันทัดแสงเฉพาะจากการหายใจให้ดอกซีไซคลีน และ cytokines แก้อักเสบและเราพบ IL-5 และ IL-13 ผลิตกำลังลดลง และ เรื่องน่าสนใจ เพิ่มขนาดใหญ่ใน IL-10 ผลิตอย่างไร cytokine แก้อักเสบ ความรู้ของเรา นี้เป็นรายงานแรกของการผลิตลด Th2 cytokines IL-5 และ IL-13 หลังจากสัมผัสเตตราไซคลีน เนื่องจากคุณสมบัติของ cytokines ที่สอง การสังเกตนี้จะอธิบายน้อยส่วนการตอบสนองลดลงสินค้า eosinophilic อักเสบลดลง และทำการปรับปรุงป้องกัน [5], [6] และ [34] วันที่ ไม่จริงใจมีเข้าใจกลไกที่ชัดเจนของการดำเนินการของ fluticasone เตียรอยด์ดมที่นำไปสู่การควบคุมของ อย่างไรก็ตาม ผลลัพธ์ของเราแนะนำกลไกต่าง ๆ ของการดำเนินการระหว่าง fluticasone ดอกซีไซคลีนเกี่ยวกับความแตกต่างที่พบในผลผลิต IL-10 ตามลำดับ ค้นหาของการผลิต IL-10 เพิ่มขึ้นได้น่าสนใจมากเนื่องจากขาด IL-10 ความสัมพันธ์อาจโปรดปรานโรคหอบหืด แน่นอน มีการรายงานจำนวนเซลล์ T IL 10-ผลิตต่ำในโรคหอบหืดส่วนอย่างรุนแรงเมื่อเทียบกับผู้ป่วยพะแนง [35] และ IL-10 ผลิตขึ้นในเซลล์ดุลของหนูสัมผัสกับโพรโทคอลการ immunotherapy [36] IL-10 มีการแสดงเพื่อลดอีโอซิโนรอดและอย่างไร cytokine หลั่ง [37] และแม้กระทั่งสื่อกลางเป็นส่วนหนึ่งของผลแก้อักเสบของสเตอรอยด์ [38] สุดท้าย IL 10 โต้ตอบกับเมแทบอลิซึม MMP เนื่องจากยับยั้ง MMP-2 และ-14 transcription ในบางรายการเซลล์มะเร็ง [39] [40] เอากัน ข้อมูลเหล่านี้ด้วยการแนะนำสามารถยับยั้งเกิดดอกซีไซคลีน IL-10 ผลิตทำ allergen เกิดอักเสบและทำการปรับปรุง (สะสมคอลลาเจนและเยื่อหนา) โดยทางอ้อม โดยสถานที่ของเซลล์อักเสบลดลง ทั้งโดยตรง โดย inhibiting MMP transcription ทั้งหมด ข้อมูลเกี่ยวกับการวัดอย่างไร cytokine ด้วยการแนะนำการยับยั้งของ Th2 และกระตุ้นความสามารถของ T lymphocytes กำกับดูแล (Treg) โดยดอกซีไซคลีนดม [32]ดอกซีไซคลีนลดกิจกรรม synthase (NOS) inducible ไนตริกออกไซด์ในสาธิต [41] และ ในแบบจำลองสัตว์ของ LPS แสง [42] ตามที่ได้พบความสัมพันธ์ระหว่างการผลิตไนตริกออกไซด์และขอบเขตของสินค้าที่เปลี่ยนแปลงในมนุษย์ [43], อื่นสามารถอธิบายผลการวิจัยของเราสามารถอยู่ในการยับยั้งการสังเคราะห์ไนตริกออกไซด์ โดย tetracyclinesอย่างไรก็ตาม ยับยั้ง MMP โดยตรง โดยดอกซีไซคลีนคิดว่า เป็น สาเหตุหลักของหลายผล pharmacological tetracyclines แน่นอน ได้รับการเสนอชื่อดอกซีไซคลีนบำบัดการลดและการเปิดใช้งาน MMP (โดยเฉพาะอย่างยิ่ง MMP-2 และ-9) ในท้องเอออร์ตา aneurysms [44] และมีรายงานว่า ลดการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิวิทยาหลังจากกล้ามเนื้อหัวใจตายในหนู [45] ดอกซีไซคลีนมีความสามารถในการยับยั้ง MMPs ของ subfamily gelatinase [17] และ [46] แต่สารประกอบยับยั้ง MMPs อื่น ๆ ยังเป็น MMP 3 MMP-7 [47] นอกจากนี้ ดอกซีไซคลีนมีการอธิบายเพื่อให้สมาชิกของ subfamily collagenase ของ MMPs putative ลิปกลอสไขผล แน่นอน ดอกซีไซคลีนจะค่อนข้างมีประสิทธิภาพยับยั้ง MMP-8 และ MMP 13 และ ใน ระดับที่น้อยกว่า MMP-1 [19] และ [48] ในการศึกษาปัจจุบัน เราสามารถไม่ออกกฎ อย่างไรก็ตาม ว่า การยับยั้ง gelatinase ไม่ใช่สมาชิกของ MMP อาจก่อให้เกิดผลข้างเคียงบางอย่าง ในงานนำเสนอ หนูสัมผัสกับดอกซีไซคลีนถึง 96 วันไม่ไม่แสดงเครื่องหมายใด ๆ ของ exaggerated หรือความเป็นพิษใด ๆ มองเห็น ในการศึกษาปัจจุบันที่เราแสดงให้เห็นว่า หลังจากที่แสงดอกซีไซคลีน กิจกรรมระดับสากล MMP ในปอดจะลดลงและ สัดส่วนของ MMP-9 เปิดใช้งานจะต่ำกว่าในหนูที่สัมผัสรถ อย่างนี้แนะนำว่า ในการศึกษาของเรา เป็นส่วนหนึ่งที่สำคัญของผล pharmacological รับกับดอกซีไซคลีนเชื่อมโยงกับการยับยั้ง MMP ตรง ตามบทบาทศูนย์กลางของ MMP-9 ในอักเสบเกิดจาก allergen ได้รับการอธิบายโดยใช้โพรโทคอลเดียวของ allergen immunisation และสัมผัสอื่น ๆเบียดเบียน บริหารดอกซีไซคลีนโดยโรงในกับ HP-แกมมาซีดีป้องกันการอักเสบเกิดจาก allergen ทำและปรับปรุง โดยเอ็ม MMPs และ interleukins ดอกซีไซคลีนควรศึกษาอื่น ๆ มายืนยันของโรคปรับเปลี่ยนแทนบทบาทในโรคหอบหืด ผลของเราแนะนำว่า ควรสอบสวนดอกซีไซคลีนสูดดมบำบัดใหม่อาจเกิดขึ้นสำหรับโรคหอบหืด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เราแสดงให้เห็นเป็นครั้งแรกในการศึกษาปัจจุบันที่สูดดม doxycycline ในสูตรที่เพียงพอกับ HP-แกมมาซีดี, ยับยั้งการเกิดปฏิกิริยาทางเดินหายใจสารก่อภูมิแพ้ที่เกิดแทรกซึม eosinophilic ในช่อง BAL และในผนังหลอดลมอักเสบ peribronchial นอกจากนี้เรามีหลักฐานเป็นครั้งแรกที่สูดดมสารก่อภูมิแพ้ป้องกันโรคเกาต์ที่เกิดการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาหลอดลมจึงยับยั้งโรคเกี่ยวกับต่อมผนังทางเดินหายใจและความหนาของชั้นกล้ามเนื้อเรียบและการสะสมคอลลาเจน peribronchial ผลกระทบของโรคเกาต์ในการเปลี่ยนแปลงเนื้อเยื่อถูกเปรียบเทียบกับผู้ที่ได้รับหลังจากการสัมผัสกับ fluticasone การสูดดมเตียรอยด์ในตลาดที่ใช้ในการศึกษาในปัจจุบันเป็นยาอ้างอิง กลไกของกิจกรรมทางเภสัชวิทยาของโรคเกาต์ในบริบทของการอักเสบหลอดลมถูกตรวจสอบและผลการวิจัยหลักที่มีการยับยั้ง MMP โรคเกาต์ที่เกิดขึ้นและการด้อยค่าของการอักเสบ Th2 อันที่จริงการสัมผัสโรคเกาต์นำไปสู่การเพิ่มขึ้นอย่างมากในไซโตไคน์ต้านการอักเสบ IL-10 และการลดลงของ IL-5 และ IL-13 ระดับในเนื้อเยื่อปอด โรคเกาต์ลดลงนอกจากนี้ยังมีการเปิดใช้งาน MMP-9 ในปอดจากหนูสัมผัสกับสารก่อภูมิแพ้. สอดคล้องกับการทำงานของเราก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่า MMPs และมากขึ้นโดยเฉพาะ MMP-9 มีบทบาทที่สำคัญในการอักเสบทางเดินหายใจสารก่อภูมิแพ้ที่เกิดขึ้น [7] [12], [ 13] [15] และ [31] เราได้ออกแบบการทำงานในปัจจุบันเป็นความพยายามที่จะควบคุมการอักเสบทางเดินหายใจและการเปลี่ยนแปลงโดยโมเลกุลที่รู้จักกันจะยับยั้ง MMP ศักยภาพ โรคเกาต์ได้รับเลือกเนื่องจากการยับยั้งของ MMP รับการยืนยันจากการศึกษาจำนวนมากและเนื่องจากโมเลกุลนี้แสดงให้เห็นว่ามีความเป็นพิษต่ำมากในผู้ใหญ่มนุษย์ เพื่อความรู้ของเรานี้เป็นสาธิตแรกที่ยาเสพติดไม่ steroidal สูดดม (doxycycline) ออกแรงผลกระทบต่อทั้งการอักเสบทางเดินหายใจและทางเดินหายใจการเปลี่ยนแปลงคุณสมบัติเช่น hyperplasia เซลล์ Goblet สะสมคอลลาเจนและเมมเบรนชั้นใต้ดินและเซลล์กล้ามเนื้อเรียบความหนาของชั้น นักวิจัยคนอื่นได้รับการตีพิมพ์รายงานที่น่าสนใจในการยับยั้งการอักเสบทางเดินหายใจที่เกิด diisocyanate โทลูอีนโดย doxycycline [32] ในกระดาษนั้น แต่ยาเสพติดได้รับการให้ทางปากในปริมาณสูงที่สูงกว่าที่แนะนำในปัจจุบันการรักษาด้วยยาต้านจุลชีพสำหรับพารามิเตอร์และการเปลี่ยนแปลงที่ไม่ได้รับการประเมิน ในการศึกษาปัจจุบันหนูถูกท้าทายด้วยสารก่อภูมิแพ้จากการสัมผัสไปยังสูตรใหม่ที่ได้รับจากละอองและไม่ได้โดยในท่อลมหยอด แบบจำลองของเราจึงอาจเลียนแบบใกล้ชิดมากขึ้นกับสถานการณ์ทางคลินิกโดยการใช้รูปแบบที่โดดเด่นดีของการอักเสบที่เกิดจากสารก่อภูมิแพ้และการเปลี่ยนแปลงทางเดินหายใจในหนู โดยการใช้วิธีการทางอายุรเวทเฉพาะที่ได้รับอนุญาตตามสูตรกาเลนิคเดิมการศึกษาของเราแสดงให้เห็นชัดเจนว่าสูดดมการรักษาโรคเกาต์ที่ใช้สำหรับโรคหอบหืดเป็นที่น่าสนใจที่มีศักยภาพและเป็นมูลค่าที่จะได้รับการยืนยันในรูปแบบสัตว์อื่น ๆ และอาจเป็นไปได้ในมนุษย์. Doxycycline ในการแก้ปัญหาโดยไม่ต้องสารเพิ่มปริมาณ มีค่า pH ต่ำมากและการสูดดม tetracycline อุบัติเหตุได้รับรายงานจะต้องรับผิดชอบกับโรคปอดบวมที่เป็นพิษ [33] นอกจากนี้โรคเกาต์เป็นเพียงละลายน้ำได้ดีที่พีเอช 7.4 และไม่มั่นคงมีแนวโน้มที่จะเกิดการตกตะกอนอย่างรวดเร็ว ดังนั้นเราจึงใช้ cyclodextrins (HP-แกมมา CD) สำหรับการเพิ่มการละลายและความมั่นคงของโรคเกาต์ที่ pH ทางสรีรวิทยา ก่อนหน้านี้เราไม่อธิบายว่าสูดดม HP-แกมมาซีดีเป็นที่ปลอดสารพิษและไม่ก่อให้เกิดการปรับเปลี่ยนด้วยตัวเองบางส่วนของสถาปัตยกรรมทางเดินหายใจหรือก่อให้เกิดการอักเสบ [29] การเลือกของสัมพรรคนี้จะขึ้นอยู่กับความแรงที่สูงขึ้นในการเพิ่มการละลาย doxycycline เมื่อเทียบกับสารที่เกี่ยวข้องแตกต่างกัน (ไม่ได้แสดงข้อมูล) และส่วนใหญ่ในรายละเอียดความปลอดภัย [29] ในการศึกษาปัจจุบันเราแสดงให้เห็นว่า HP-แกมมาซีดีไม่ยุ่งเกี่ยวกับการตอบสนองต่อการอักเสบและไม่ได้แบกต่อกิจกรรมทางเภสัชวิทยาใดเมื่อนำมาใช้ในการประยุกต์ใช้เฉพาะในปอดเป็นโรคทางเดินหายใจอักเสบ นอกจากนี้เราแสดงให้เห็นก่อนหน้านี้ว่า HP-แกมมาซีดีไม่ได้ปรับเปลี่ยนลักษณะละอองในแง่ของขนาดและความเร็วในการหยดยาขยายหลอดลมในเงื่อนไขการทดลองของเรา [29]. ในวันที่ยังคงมีการถกเถียงกันเกี่ยวกับกลไกที่แน่นอนในการยับยั้ง MMP โดย tetracyclines ในการศึกษาปัจจุบันเราตรวจสอบว่าได้รับเฉพาะเมื่อสูดดมจะ doxycycline ปรับการแสดงออกของ Th2 cytokines ที่สำคัญและต้านการอักเสบและเราพบว่า IL-5 และ IL-13 ถูกผลิตลดลงและที่น่าสนใจเพิ่มขึ้นมากในการป้องกัน การอักเสบไซโตไคน์ผลิต IL-10 เพื่อความรู้ของเรานี้เป็นรายงานแรกของการผลิตที่ลดลงของ cytokines Th2 IL-5 และ IL-13 หลังจากได้รับยา เนื่องจากคุณสมบัติของทั้งสอง cytokines ที่สังเกตนี้สามารถอธิบายได้ว่าอย่างน้อยในส่วนการตอบสนองทางเดินหายใจลดลงลดการอักเสบทางเดินหายใจ eosinophilic และป้องกันการเปลี่ยนแปลง [5] [6] และ [34] ในวันที่กลไกที่แม่นยำของการกระทำของสเตียรอย fluticasone สูดดมที่นำไปสู่การควบคุมของการอักเสบยังไม่เข้าใจกันดีจริงๆ อย่างไรก็ตามผลของเราแสดงให้เห็นกลไกที่แตกต่างกันของการดำเนินการระหว่าง fluticasone และ Doxycycline เกี่ยวกับความแตกต่างที่พบในผลกระทบที่เกี่ยวข้องกับการผลิต IL-10 การค้นพบของการผลิตที่เพิ่มขึ้น IL-10 เป็นที่น่าสนใจมากตั้งแต่ญาติขาด IL-10 จะสนับสนุนการเป็นโรคหอบหืด อันที่จริงจำนวน IL-10 ผลิตเซลล์ทีได้รับรายงานว่าจะลดลงในผู้ป่วยโรคหอบหืดอย่างรุนแรงเมื่อเทียบกับผู้ป่วยที่รุนแรงน้อยลง [35] และการผลิต IL-10 จะเพิ่มขึ้นในเซลล์ BAL ของหนูสัมผัสกับโปรโตคอล immunotherapy [36] . IL-10 ยังได้รับการแสดงเพื่อลดความอยู่รอด eosinophil และหลั่งไซโตไคน์ [37] และยังสามารถเป็นสื่อกลางในส่วนหนึ่งของผลต้านการอักเสบของเตียรอยด์ [38] สุดท้าย, IL-10 มีปฏิสัมพันธ์กับการเผาผลาญอาหาร MMP เพราะมันยับยั้ง MMP-2 และ -14 ถอดความในเซลล์มะเร็งบาง [39] และ [40] ที่ร่วมกันข้อมูลเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่าโรคเกาต์ที่เกิดการผลิต IL-10 สามารถยับยั้งการอักเสบทางเดินหายใจสารก่อภูมิแพ้ที่เกิดขึ้นและการเปลี่ยนแปลงทางเดินหายใจ (การสะสมคอลลาเจนและหนาเมมเบรน) ทั้งทางอ้อมโดยสถานที่จัดงานที่ลดลงของเซลล์อักเสบโดยตรงและโดยการยับยั้งการถอดความ MMP พรึบข้อมูลของเราเกี่ยวกับการวัดไซโตไคน์แนะนำการยับยั้งของการอักเสบ Th2 และกระตุ้นเป็นไปได้ของ T lymphocytes การกำกับดูแล (Treg) เมื่อสูดดม doxycycline [32]. Doxycycline ลดเทสไนตริกออกไซด์ inducible (NOS) กิจกรรมที่แสดงให้เห็นในหลอดทดลอง [41] และ ในรูปแบบของการสัมผัสสัตว์ LPS [42] ในฐานะที่เป็นความสัมพันธ์ที่มีการค้นพบระหว่างการผลิตไนตริกออกไซด์และขอบเขตของการเปลี่ยนแปลงทางเดินหายใจในมนุษย์ [43] อีกคำอธิบายที่เป็นไปได้ของผลการวิจัยของเราสามารถอาศัยอยู่ในการยับยั้งการสังเคราะห์ไนตริกออกไซด์โดย tetracyclines. อย่างไรก็ตามการยับยั้ง MMP โดยตรงจากโรคเกาต์เป็นความคิดที่ เป็นสาเหตุหลักของผลทางเภสัชวิทยาหลาย tetracyclines อันที่จริงโรคเกาต์ได้รับการเสนอเป็นยาในการลดการกระตุ้น MMP และการแสดงออก (โดยเฉพาะ MMP-2 และ -9) ในหลอดเลือดโป่งพองในช่องท้อง [44] และได้รับรายงานว่าจะลดลงหลังจากการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิวิทยากล้ามเนื้อหัวใจตายในหนู [45] doxycycline มีความสามารถในการยับยั้ง MMPs เป็นของอนุวงศ์ gelatinase [17] และ [46] แต่สารนี้ยังยับยั้ง MMPs อื่น ๆ เช่น MMP-3 และ MMP-7 [47] นอกจากนี้ยังมีโรคเกาต์ได้รับการอธิบายว่ามีผลยับยั้งสมมุติในสมาชิกของคอลลาอนุวงศ์ของ MMPs อันที่จริง doxycycline มีประสิทธิภาพมากใน MMP-8 และ MMP-13 การยับยั้งและในระดับที่น้อยกว่าใน MMP-1 [19] และ [48] ในการศึกษาปัจจุบันเราไม่สามารถออกกฎ แต่ที่ยับยั้งการไม่ใช่สมาชิก gelatinase ของครอบครัว MMP อาจก่อให้เกิดผลข้างเคียงบางอย่าง ในการทำงานปัจจุบันหนูสัมผัสกับโรคเกาต์ได้นานถึง 96 วันไม่ได้แสดงสัญญาณของการอักเสบที่พูดเกินจริงหรือเป็นพิษใด ๆ ที่มองเห็น ในการศึกษาที่เราแสดงให้เห็นว่าหลังจากการสัมผัสโรคเกาต์กิจกรรม MMP ระดับโลกในเนื้อเยื่อปอดลดลงและสัดส่วนของการเปิดใช้งาน MMP-9 ต่ำกว่าวัดในหนูรถสัมผัส นี้แสดงให้เห็นว่าในการศึกษาของเราเป็นส่วนสำคัญของผลกระทบทางเภสัชวิทยาที่ได้รับกับ doxycycline เชื่อมโยงกับการยับยั้ง MMP โดยตรงเป็นบทบาทสำคัญของ MMP-9 ในการอักเสบสารก่อภูมิแพ้ที่เกิดขึ้นได้รับการอธิบายที่อื่น ๆ โดยใช้โปรโตคอลเดียวกันของสารก่อภูมิแพ้ การสร้างภูมิคุ้มกันและการสัมผัส. สรุปได้ว่าการบริหารงานของโรคเกาต์โดยละอองในที่ซับซ้อนกับ HP-แกมมาซีดีป้องกันไม่ให้เกิดการอักเสบทางเดินหายใจสารก่อภูมิแพ้ที่เกิดขึ้นและการเปลี่ยนแปลงโดยการปรับ MMPs และ interleukins โรคเกาต์ควรได้รับการพิจารณาสำหรับการศึกษาอื่น ๆ ที่ออกแบบเพื่อยืนยันโรคปรับเปลี่ยนบทบาทของตัวแทนในโรคหอบหืด ผลของเราแสดงให้เห็นว่าโรคเกาต์สูดดมควรจะสอบสวนเป็นยาใหม่ที่มีศักยภาพสำหรับโรคหอบหืด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เราแสดงให้เห็นเป็นครั้งแรกในการศึกษาที่สูดดมดอกซีซัยคลิน ในตำรับที่เพียงพอกับซีดี HP แกมมายับยั้งสารก่อภูมิแพ้ทางเดินหายใจภูมิแพ้และพบการซึมบัล , ช่องและในผนังหลอดลม และ peribronchial การอักเสบ นอกจากนี้เรามีหลักฐานเป็นครั้งแรกว่า สูดดมสารก่อภูมิแพ้ยาฆ่าเชื้อป้องกันการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาและหลอดลมจึงยับยั้งต่อมโตผนังหลอดลมหนาและเรียบ ชั้นกล้ามเนื้อ และ peribronchial คอลลาเจน . ผลของการเปลี่ยนแปลงเนื้อเยื่อเป็นยาฆ่าเชื้อที่เปรียบได้กับผู้ที่ได้รับหลังจากการสัมผัสกับฟลูติคาโซน ,มีสูดสเตียรอยด์ในตลาดที่ใช้ใน การศึกษาในปัจจุบันเป็นการอ้างอิงบำบัด กลไกของกิจกรรมทางเภสัชวิทยาของยาฆ่าเชื้อในบริบทของหลอดลม การอักเสบ ) ได้ศึกษาและค้นพบหลักเป็นยาฆ่าเชื้อและช่วยยับยั้งการอักเสบและการ th2 . แน่นอนคอนสแตนติน นำไปสู่การเพิ่มขึ้นในเตอร์ไซโตไคน์และต้านการอักเสบลดลงและอยู่ในระดับ il-5 il-13 ปอดพาเรงคิมา . ยาฆ่าเชื้อและลด mmp-9 กระตุ้นในปอดจากหนูตาก allergens .

สอดคล้องกับก่อนหน้านี้ของเราทำงานแสดงให้เห็นว่า mmps และมีบทบาทสำคัญในการกระตุ้นสารก่อภูมิแพ้ทางเดินหายใจอักเสบมากขึ้นโดยเฉพาะ mmp-9 [ 7 ] ,[ 12 ] , [ 13 ] , [ 15 ] และ [ 31 ] เราออกแบบงานปัจจุบันเป็นความพยายามที่จะควบคุมการอักเสบของทางเดินหายใจและการเปลี่ยนแปลงโดยโมเลกุลที่รู้จักกันเป็นสารอื่นที่มีศักยภาพ คอนสแตนตินได้รับเลือกเพราะมันได้รับการยืนยันโดย MMP ยับยั้งกิจกรรมการศึกษามากมาย และเนื่องจากโมเลกุลนี้ถูกแสดงให้มีความเป็นพิษต่ำมากสำหรับมนุษย์ ความรู้ของเรานี่เป็นครั้งแรกที่ไม่ใช่สเตียรอยด์ยาสูดดม สาธิต ( ยาฆ่าเชื้อ ) ที่จะมีผลต่อการบินและการบินทั้งการอักเสบการปรับปรุงคุณสมบัติเช่นถ้วยเซลล์โตสะสมคอลลาเจนเมมเบรนชั้นใต้ดินและกล้ามเนื้อเรียบและเซลล์ชั้นความหนานักวิจัยอื่น ๆ ได้ตีพิมพ์รายงานที่น่าสนใจในการยับยั้งของโทลูอีนไดไอโซไซยาเนตและการอักเสบของทางเดินหายใจโดยดอกซีไซคลีน [ 32 ] ในกระดาษ แต่ยาให้รับประทานในขนาดสูง สูงกว่าในปัจจุบันแนะนำให้ใช้ยาต้านจุลชีพและการเปลี่ยนแปลงพารามิเตอร์ไม่ประเมิน ในการศึกษาครั้งนี้หนูถูกท้าทายกับสารก่อภูมิแพ้ โดยการกำหนดให้ใหม่โดยละอองลอยและไม่โดย intratracheal ปลูกฝัง . นางแบบของเราจึงอาจจะเลียนแบบ อย่างใกล้ชิด สถานการณ์ทางคลินิกโดยการใช้ลักษณะรูปแบบของสารก่อภูมิแพ้ได้ดีกระตุ้นการอักเสบและการบิน การเปลี่ยนแปลง ในหนู โดยเฉพาะที่เกี่ยวกับการรักษาโรควิธีการอนุญาต โดยมีการกำหนด galenic ต้นฉบับการศึกษาของเราแสดงให้เห็นชัดเจนว่า การใช้ การรักษาหอบหืดสูดดมคอนสแตนตินเป็นประโยชน์ที่มีศักยภาพและมีมูลค่าที่ได้รับการยืนยันในรูปแบบของสัตว์อื่น และอาจจะในมนุษย์

ยาฆ่าเชื้อในสารละลายโดยไม่ excipient มีต่ำมาก และบังเอิญ tetracycline สูดดมได้รับผิดชอบพิษปอดบวม [ 33 ] นอกจากนี้ ยานเพียงไม่ละลายที่ pH 74 และไม่มั่นคงกับแนวโน้มการตกตะกอนอย่างรวดเร็ว ดังนั้นเราจึงใช้ไซโคลเดกซ์ทริน ( HP ( CD ) เพื่อเพิ่มการละลายและความคงตัวของยาฆ่าเชื้อที่เราทำก่อนหน้านี้อธิบายสรีรวิทยาปริญญาเอกที่สูดดม HP แกมมาซีดีคือไม่เป็นพิษและไม่ตอแย ด้วยตัวเอง การปรับเปลี่ยนบางอย่างของการบิน สถาปัตยกรรม หรือ ก่อให้เกิดการอักเสบ [ 29 ]การเลือกของไซโคลเดกซ์ทรินนี้โดยเฉพาะจะขึ้นอยู่กับความแรงของการเพิ่มการละลายสูง เมื่อเทียบกับยานต่าง ๆ ที่เกี่ยวข้องสาร ( ข้อมูลไม่แสดง ) , และส่วนใหญ่ของตู้โปรไฟล์ [ 29 ] ในการศึกษาครั้งนี้เราแสดงให้เห็นว่าซีดี HP และไม่รบกวนกับการตอบสนองการอักเสบและไม่ได้แบกต่อ se มีกิจกรรมทางเมื่อใช้โปรแกรมเฉพาะที่ในปอด โรคหลอดลมอักเสบ นอกจากนี้ เราแสดงให้เห็นก่อนหน้านี้ ซีดี HP แกมมาไม่ได้ปรับเปลี่ยนคุณลักษณะในแง่ของขนาดหยดละอองและความเร็วใน nebulization ของเราเงื่อนไขการทดลอง [ 29 ] .

ปัจจุบันยังคงมีการถกเถียงเกี่ยวกับกลไกที่แน่นอนสำหรับ MMP ยับยั้งโดยเตตราซัยคลิน . ในการศึกษา เราก็สืบว่าเฉพาะที่แสงโดยการสูดให้ยาฆ่าเชื้อโดยการแสดงออกของ th2 คีย์และ anti-inflammatory cytokines และเราพบ il-5 il-13 การผลิตและการลดลงและน่าสนใจการเพิ่มขนาดใหญ่ในไซโตไคน์การอักเสบเตอร์ผลิต เพื่อความรู้ของเรา นี่คือรายงานแรกของการผลิตที่ลดลงของ th2 cytokines il-5 il-13 หลังจากการเปิดรับและเตตราซัยคลิน . เนื่องจากคุณสมบัติของทั้งสองชนิด การสังเกตนี้อาจอธิบายได้ อย่างน้อยในส่วนการบินลดลง การตอบสนองของลดการอักเสบและปรับปรุงการป้องกันทางเดินหายใจพบ [ 2 ] , [ 3 ] และ [ 34 ] วันที่ , กลไกที่ชัดเจนของการกระทำของสูดสเตียรอยด์ฟลูติคาโซนที่นำไปสู่การควบคุมการอักเสบยังไม่เก่งครับ อย่างไรก็ตามผลของเราแสดงให้เห็นกลไกที่แตกต่างกันของการกระทำระหว่างฟลูติคาโซนและดอกซีไซคลีนเกี่ยวกับความแตกต่างที่พบในผลของตนในการผลิตเตอร์ . ผลของการเพิ่มขึ้นของดอกเบี้ยเตอร์การผลิตที่ดีเนื่องจากขาดเตอร์ญาติอาจช่วยโรคหอบหืด แน่นอนจำนวน il-10-producing T cells ได้ลดลงในผู้ป่วยโรคหอบหืดรุนแรงเมื่อเทียบกับพะแนงผู้ป่วย [ 35 ] และการผลิตเพิ่มขึ้นใน บัลเตอร์เซลล์ของหนูสัมผัสกับ immunotherapy โปรโตคอล [ 36 ] เตอร์ยังถูกแสดงเพื่อลดจำนวนการหลั่งไซโตไคน์และการอยู่รอด [ 37 ] และยังสามารถเป็นส่วนหนึ่งของผลต้านการอักเสบสเตียรอยด์ [ 38 ]ในที่สุด เตอร์ติดต่อกับ MMP ยับยั้งการทำงานเอนไซม์เมแทบอลิซึมเนื่องจาก - 14 และถอดความในบางเซลล์มะเร็ง [ 39 ] [ 40 ] ถ่ายด้วยกันข้อมูลเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่ายาฆ่าเชื้อกระตุ้นการผลิตเตอร์สามารถยับยั้งการเกิดการอักเสบของทางเดินหายใจภูมิแพ้และการบิน ( สะสม การปรับปรุงคอลลาเจนและเยื่อหนา ) ทั้งทางอ้อม โดยให้สถานที่ของการอักเสบและยับยั้งเซลล์โดยตรงโดย MMP transcription ทั้งหมดข้อมูลเกี่ยวกับการวัดไซโตไคน์แนะนำเป็นยับยั้งการอักเสบและกระตุ้น th2 เป็นไปได้ของ T กฎระเบียบโฟซัยท์ ( treg ) โดยคอนสแตนตินการสูด [ 32 ] .

ดอกซีไซคลีนลด inducible synthase ไนตริกออกไซด์ ( NOS ) กิจกรรมที่แสดงให้เห็นในหลอดทดลองและในสัตว์ [ 41 ] รูปแบบการสเปรย์ [ 42 ]ขณะที่ความสัมพันธ์ได้พบระหว่างการผลิตไนตริกออกไซด์และขอบเขตของการเปลี่ยนแปลงในการบินของมนุษย์ [ 43 ] อีกคำอธิบายที่เป็นไปได้ของการค้นพบของเราจะอาศัยอยู่ในการยับยั้งการสังเคราะห์ไนตริกออกไซด์โดยเตตร้าไซคลิน

แต่ยับยั้ง MMP โดยตรงโดยคอนสแตนตินคิดว่าเป็นสาเหตุหลักของผลทางเภสัชวิทยาหลายเตตราซัยคลิน . แน่นอนคอนสแตนตินได้รับการเสนอเป็น การรักษาเพื่อลดการกระตุ้นและการแสดงออก ( โดยเฉพาะอย่างยิ่งการทำงานเอนไซม์ MMP และ - 9 ในช่องท้องของ aneurysms [ 44 ] และได้รับการรายงานเพื่อลดการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิวิทยาหลังจากกล้ามเนื้อหัวใจขาดเลือดในหนูขาว [ 45 ]คอนสแตนติน มีความสามารถในการยับยั้ง mmps เป็นของเจลลติเนส subfamily [ 17 ] และ [ 46 ] แต่สารนี้ยับยั้งการอื่น ๆและยัง mmps mmp-3 mmp-7 [ 47 ] นอกจากนี้ ยานได้ถูกอธิบายไว้จะมีผลยับยั้งการแสดงออกของสมาชิกทุกคนใน subfamily ของคอลลาจีเนส mmps . แน่นอน , ดอกซีไซคลีนค่อนข้างมีประสิทธิภาพในการยับยั้งและ mmp-8 mmp-13 และในขอบเขตที่น้อยกว่าใน mmp-1 [ 19 ] และ [ 48 ] ในการศึกษา เราไม่สามารถออกกฎ แต่ที่ไม่เจลลติเนสและสมาชิกในครอบครัวอื่นอาจก่อให้เกิดผลข้างเคียง ในงานปัจจุบัน หนูโดนยานถึง 96 วันไม่ได้แสดงเครื่องหมายใด ๆของการอักเสบที่พูดเกินจริงหรือมองเห็นความเป็นพิษ ในการศึกษานี้เราแสดงให้เห็นว่า หลังจากยานแสง ,กิจกรรมช่วยโลกในเนื้อเยื่อปอดลดลง และสัดส่วนที่ใช้งาน mmp-9 น้อยกว่าวัดในรถสัมผัสหนู นี้ขอแนะนำว่า ในการศึกษาของเราเป็นส่วนสำคัญของการศึกษาผลที่ได้รับกับยาฆ่าเชื้อเชื่อมโยงโดยตรงยับยั้ง MMP เป็นบทบาทศูนย์กลางของ mmp-9 ในสารก่อภูมิแพ้และการอักเสบได้รับการอธิบายจากที่อื่นโดยใช้โปรโตคอลเดียวกันของคน และการเปิดรับสารก่อภูมิแพ้

สรุปการบริหารงานของยาฆ่าเชื้อโดยละอองลอยในซับซ้อนกับซีดี HP แกมมาป้องกันภูมิแพ้และการอักเสบของทางเดินหายใจ และการเปลี่ยนแปลง โดยปรับทั้ง mmps และผล . ยาฆ่าเชื้อที่ควรพิจารณาสำหรับการศึกษาอื่น ๆที่ออกแบบมาเพื่อยืนยันบทบาทของการเป็นตัวแทนในโรคหืดจากผลการศึกษานี้ ควรศึกษาสูดดมดอกซีไซคลีนรักษาที่มีศักยภาพสำหรับโรคหอบหืด