Physical interactions between MaERF

Physical interactions between MaERF9 and -11 and MaACS1 and MaACO1

The interactions between MaERF9 and -11 and MaACS1/MaACO1 were investigated using the Matchmaker Gold Yeast Two-Hybrid System. MaACS1, MaACO1 and MaERF9 and -11 coding sequences were subcloned into pGADT7 and pGBKT7 vectors for the Y2H assay, respectively. As shown in Fig. 6, yeast cells co-transformed with a positive control (pGBKT7-53 + pGADT7-T) and MaERF9 or MaERF11 with MaACO1, could grow on selective medium (synthetic medium lacking tryptophan, leucine, histidine, and adenine) supplied with the toxic drug aureobasidin A, and turned blue in the presence of the chromagenic substrate X-α-Gal, indicating that MaERF9 or MaERF11 physically interacted with MaACO1. However, yeast cells harbouring MaERF9 or MaERF11 with MaACS1, and the negative controls, could not grow on the selective medium and did not turn blue under the same conditions (Fig. 6).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โต้ตอบทางกายภาพระหว่าง MaERF9 และ-11 และ MaACS1 และ MaACO1การโต้ตอบระหว่าง MaERF9 และ-11 และ MaACS1/MaACO1 ได้ตรวจสอบการใช้ Matchmaker ทองยีสต์ผสมสองระบบ MaACS1, MaACO1 และ MaERF9 และ-11 รหัสลำดับที่ subcloned ในเวกเตอร์ pGADT7 และ pGBKT7 สำหรับทดสอบ Y2H ตามลำดับ มาก Fig. 6 แปลงร่วมกับตัวควบคุมบวก (pGBKT7-53 + pGADT7 T) และ MaERF9 หรือ MaERF11 กับ MaACO1 เซลล์ยีสต์สามารถเจริญเติบโตในงานปานกลาง (สังเคราะห์ปานกลางขาดทริปโตเฟน leucine, histidine และ adenine) ให้มาพร้อมกับยาพิษ aureobasidin A แล้วเปิดบลูในต่อหน้าของพื้นผิว chromagenic X-α-กัล ระบุ MaERF9 หรือ MaERF11 ที่จริงอาจ มี MaACO1 อย่างไรก็ตาม ยีสต์เซลล์ harbouring MaERF9 หรือ MaERF11 กับ MaACS1 และควบคุมลบ ไม่สามารถเติบโตในสื่อที่ใช้ และไม่เปิดบลูภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน (Fig. 6)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ปฏิสัมพันธ์ทางกายภาพระหว่าง MaERF9 และ -11 และ MaACS1 และ MaACO1 ปฏิสัมพันธ์ระหว่าง MaERF9 และ -11 และ MaACS1 / MaACO1 ถูกตรวจสอบโดยใช้ยีสต์ทองแม่สื่อสองระบบไฮบริด MaACS1, MaACO1 และ MaERF9 และ -11 ลำดับการเข้ารหัสถูก subcloned เป็น pGADT7 และเวกเตอร์ pGBKT7 สำหรับการทดสอบ Y2H ตามลำดับ ดังแสดงในรูป 6 เซลล์ยีสต์เปลี่ยนร่วมกับการควบคุมเชิงบวก (+ pGBKT7-53 pGADT7-T) และ MaERF9 หรือ MaERF11 กับ MaACO1, สามารถเจริญเติบโตได้ในสื่อเลือก (กลางขาดสังเคราะห์โพรไบโอ, Leucine, ฮิสติดีนและ adenine) ที่มาพร้อมกับยาเสพติดที่เป็นพิษ aureobasidin และหันสีฟ้าในการปรากฏตัวของพื้นผิว chromagenic X-α-Gal แสดงให้เห็นว่า MaERF9 หรือ MaERF11 มีความสัมพันธ์กับร่างกาย MaACO1 อย่างไรก็ตามเซลล์ยีสต์เยิ้ม MaERF9 หรือ MaERF11 กับ MaACS1 และการควบคุมเชิงลบที่ไม่สามารถเจริญเติบโตได้ในสื่อที่เลือกและไม่ได้เปลี่ยนเป็นสีฟ้าภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน (รูปที่. 6)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ปฏิสัมพันธ์ทางกายภาพระหว่าง maerf9 และ - 11 และ maacs1 maaco1

และปฏิสัมพันธ์ระหว่าง maerf9 และ - 11 และ maacs1 / maaco1 ทำการศึกษาโดยใช้ยีสต์ลูกผสมทองจับคู่สองระบบ maacs1 maaco1 maerf9 และ 11 , และลำดับของรหัสได้ใน pgadt7 และเวกเตอร์ pgbkt7 สำหรับ y2h assay ตามลำดับ ดังแสดงในรูปที่ 6เซลล์ยีสต์ Co เปลี่ยนเป็นตัวควบคุมบวก ( pgbkt7-53 pgadt7-t ) และ maerf9 หรือ maerf11 กับ maaco1 สามารถเติบโตบน selective medium ( synthetic medium ขาดทริปโตเฟน ลูซีนีน และสารอัลคาลอยด์ ) ให้กับพิษยาริโอบาซิดิน เอ และ กลายเป็นสีฟ้าในการแสดงตนของ chromagenic ( x - แอลฟา maerf9 สาว ระบุว่า หรือ maerf11 ทางกายภาพมากกว่า maaco1 .แต่เซลล์ยีสต์กับ maerf9 หรือ maerf11 กับ maacs1 และการควบคุมด้านลบ อาจไม่เติบโตบนอาหารที่เลือกและไม่ได้เปลี่ยนเป็นสีฟ้าภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน ( ภาพที่ 6 )