In the present study, a new lipase

In the present study, a new lipase SL-4 from Burkholderia ubonensis SL-4, was purified by 80% ammoniumsulphate precipitation, Q Sepharose FF anion exchange and Superdex 75 gel filtration chromatographyfinally leading to 68.5-fold purification and 13.34% recovery. It had a molecular mass of ca. 33 kDa and thewhole gene (1095-bp) was cloned by using degenerate primers. Amino acid sequence analysis revealedthat lipase SL-4 is a new member of subfamily I.2 lipases. Lipase SL-4 exhibited optimum activity towardp-NP myristate (C14) at pH 8.5 and 65◦C with a Kmof 0.72 mM, a kcatof 391.63 s−1and a kcat/Kmof543.93 s−1mM−1. It had good thermostability at 50◦C and pH 8.5, and could be activated strongly by Ca2+and Mn2+, but inhibited by some transition metal ions and EDTA, PMSF, DTT and -ME. Additionally, lipaseSL-4 possessed non-ionic detergent stability and organic solvent stability. When preliminarily employedto catalyze soybean oil for biodiesel production, the liquid lipase SL-4 could attain a conversion ratio of92.24% in a solvent-free system. These results demonstrate that the new thermo-solvent-stable lipasepossesses an attractive potential for biotechnological applications as biocatalyst, especially for biodieselproduction.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในปัจจุบันศึกษา บริสุทธิ์เอนไซม์ไลเปสใหม่ SL-4 จาก Burkholderia ubonensis SL-4 ฝน ammoniumsulphate 80% แลกเปลี่ยนไอออน Q Sepharose FF และ chromatographyfinally กรองเจ Superdex 75 นำไปฟอกและ 13.34% กู้ 68.5-fold มีมวลโมเลกุลของ ca. 33 ยีน kDa และ thewhole (1095-bp) ถูกโคลน โดยใช้ไพรเมอร์ degenerate กรดอะมิโนลำดับการวิ revealedthat เอนไซม์ไลเปส SL-4 เป็นสมาชิกใหม่ของวงศ์ย่อย I.2 lipases เอนไซม์ไลเปส SL-4 จัดแสดงกิจกรรมที่เหมาะสม towardp NP myristate (C14) ที่ค่า pH 8.5 และ 65◦C กับ Kmof มม. 0.72, s−1and kcatof 391.63 s−1mM−1 kcat/Kmof543.93 มันมี thermostability ดี 50◦C และค่า pH 8.5 และอาจเรียกใช้อย่างยิ่ง โดย Ca2 + และ Mn2 + แต่ยับยั้งโดยเปลี่ยนบางโลหะไอออน และ EDTA, PMSF, DTT และ-ฉัน นอกจากนี้ lipaseSL-4 สิงไม่ใช่ไอออนผงซักฟอกความมั่นคงและเสถียรภาพของตัวทำละลายอินทรีย์ เมื่อเบื้องต้นได้ employedto กระตุ้นน้ำมันถั่วเหลืองสำหรับผลิตไบโอดีเซล เอนไซม์ไลเปสของเหลว SL 4 สามารถบรรลุ of92.24% อัตราการแปลงในระบบที่ปราศจากตัวทำละลาย ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่า lipasepossesses มีเสถียรภาพเทอร์โมตัวทำละลายใหม่ศักยภาพน่าสนใจสำหรับ biotechnological เป็น biocatalyst โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับ biodieselproduction

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในการศึกษาปัจจุบันเป็น SL-4 เอนไซม์ไลเปสใหม่จาก Burkholderia ubonensis SL-4, บริสุทธิ์โดยการตกตะกอน 80% ammoniumsulphate, Q Sepharose FF แลกเปลี่ยนไอออนและ Superdex 75 กรองเจล chromatographyfinally นำไปสู่​​ 68.5 เท่าฟอกและการกู้คืน 13.34% มันมีมวลโมเลกุลของแคลิฟอร์เนีย 33 กิโลดาลตันและยีน thewho​​le (1095-BP) เป็นโคลนโดยใช้ไพรเมอร์เลว การวิเคราะห์ลำดับ revealedthat กรดอะมิโนไลเปส SL-4 เป็นสมาชิกใหม่ของอนุวงศ์ I.2 ไลเปส เอนไซม์ไลเปส SL-4 จัดแสดงที่ดีที่สุดกิจกรรม towardp-NP myristate (C14) ที่ pH 8.5 และ65◦Cกับ Kmof 0.72 มิลลิเมตร kcatof 391.63 S-1 และ kcat / Kmof543.93 S-1 mM-1 มันก็ทนต่อความร้อนที่ดีใน50◦Cและค่า pH 8.5 และสามารถเปิดใช้งานได้อย่างมากโดย Ca2 + และ MN2 + แต่ยับยั้งโดยบางไอออนโลหะการเปลี่ยนแปลงและ EDTA, PMSF, DTT และ? -Me นอกจากนี้ lipaseSL-4 สิงเสถียรภาพผงซักฟอกไม่มีประจุและความมั่นคงทำละลายอินทรีย์ เมื่อเบื้องต้น employedto กระตุ้นน้ำมันถั่วเหลืองสำหรับการผลิตไบโอดีเซลไลเปสของเหลว SL-4 สามารถบรรลุอัตราส่วนการแปลง of92.24% ในระบบปราศจากตัวทำละลาย ผลการศึกษานี้แสดงให้เห็นว่าใหม่ lipasepossesses Thermo-ตัวทำละลายที่มีเสถียรภาพศักยภาพที่น่าสนใจสำหรับการใช้งานเทคโนโลยีชีวภาพเป็น biocatalyst โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับ biodieselproduction

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในการศึกษาใหม่ , ไลเปส sl-4 จาก Burkholderia ubonensis sl-4 ถูกทำให้บริสุทธิ์ โดยการตกตะกอนแอมโมเนียมซัลเฟต 80 % Q เกี่ยวข้อง FF แลกเปลี่ยนไอออน superdex 75 และเจลฟิล chromatographyfinally นำไปสู่ 68.5-fold 13.34 % บริสุทธิ์และการกู้คืน มันมีมวลโมเลกุลประมาณ 33 กิโลดาลตันและเปลือกของยีน ( 1095 BP ) ถูกโคลนโดยใช้ degenerate primers . การวิเคราะห์ลำดับกรดอะมิโนพบว่าไลเปส sl-4 เป็นสมาชิกใหม่ของ subfamily i.2 ไลเปส . เอนไซม์มีกิจกรรม sl-4 ที่ 30 องศาเซล towardp NP ( C14 ) ที่ pH 8.5 และ 65 ◦ C กับ kmof 0.72 มม. , kcatof 391.63 s −และเป็น kcat / kmof543.93 s − 1 mm − 1 มันมี 50 ◦ทดลพีเอช 8.5 , และสามารถใช้งานได้อย่างแข็งแกร่ง mn2 + แคลเซียม + แล้ว แต่ถูกยับยั้งโดยการเปลี่ยนแปลงบางโลหะและไอออน PMSF และ EDTA , DTT , - ฉัน นอกจากนี้ lipasesl-4 มีเสถียรภาพและความมั่นคง ผงซักฟอก ไม่ละลายอินทรีย์ เมื่อเบื้องต้นใช้การเร่งน้ำมันถั่วเหลืองสำหรับผลิตไบโอดีเซล เอนไซม์น้ำ sl-4 สามารถบรรลุอัตราส่วนการแปลง of92.24 ในงานวิจัยนี้ได้ศึกษาระบบ . ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่าใหม่ร้อนละลายมั่นคง lipasepossesses ศักยภาพเป็นที่น่าสนใจสำหรับการใช้งานด้านเทคโนโลยีชีวภาพเป็นตัวเร่งปฏิกิริยาชีวภาพ โดยเฉพาะ biodieselproduction .