2.4. Microscopy
The intact and homogenised cooked rice were collected during
the in vitro digestion process at 0 and 30 min (G30) of simulated
gastric digestion; and after 5 (I5), 30 (I30) and 120 min (I120) of
simulated small intestinal digestion from the digestion reactors.
The collected samples were soaked in near neutral (pH 6) or acidic
solutions (pH 3) to stop the gastric or small intestinal enzyme reaction,
respectively until analysis. To visualise the compound distributions
of intact and homogenised samples, fluorescent stains
were applied. The sample grain was carefully and thinly sliced
using a blade knife (Feather S35 type, Feather, Osaka, Japan) by
hand, double-stained with 0.01% acridine orange (Wako Pure
Chemicals, Osaka, Japan) and 0.2% rhodamine B (Wako Pure
Chemicals, Osaka, Japan) in acetone, and covered with a cover slip.
A drop of homogenised cooked rice sample was also spread on the
glass slide, then stained with 0.01% acridine orange (Wako Pure
Chemicals, Osaka, Japan) and covered with a cover slip. The samples
were then observed using the simple fluorescent observation
mode of a confocal laser scanning microscope (LSM510, Carl
Zeiss, Oberkochen, Germany) equipped with a GFP filter. Changes
in the grain shape during simulated in vitro digestion process were
observed and analysed using a digital microscope (VH-Z-05 & VH-
8000, Keyence, Osaka, Japan).
92 M. Tamura et al. / Food Chemistry 191 (2016) 91–97
Scanning electron microscopy (FEI Quanta 200, FEI Electron
Optics, Eindhoven, Netherlands) was also used to examine changes
in the intact cooked grains and surface conditions of sample grains
during the in vitro digestion process. The grain samples were collected
during the process, immediately soaked in liquid nitrogen,
and freeze dried using a freeze dryer (FD18LT, Cuddon
Engineering). The freeze dried samples were mounted on the stub
with double sticky tape, sputter coated with gold in a sputter
coater (SCD 050, Balzers, Liechtenstein) and examined.
2.4. microscopyข้าวสวยเหมือนเดิม และ homogenised ได้รวบรวมในระหว่างกระบวนการย่อยอาหารการเพาะเลี้ยงที่ 0 ถึง 30 นาที (G30) ของเลียนแบบย่อยอาหารในกระเพาะอาหาร และหลัง จาก 5 (I5), 30 (I30) และ 120 นาที (I120) ของจำลองน้อยลำไส้ย่อยอาหารจากเตาปฏิกรณ์ที่ย่อยอาหารตัวอย่างที่เก็บได้นำไปแช่ในใกล้เป็นกลาง (pH 6) หรือกรดโซลูชั่น (pH 3) เพื่อหยุดปฏิกิริยาเอนไซม์ที่ลำไส้เล็ก หรือในกระเพาะอาหารตามลำดับจนถึงการวิเคราะห์ การ visualise การกระจายผสมตัวอย่างเช่นเดิม และ homogenised ฟลูออเรสเซนต์คราบสกปรกถูกนำไปใช้ ข้าวอย่างไม่รอบคอบ และตวงหั่นใช้ใบมีด (S35 นกชนิด นก โอซาก้า ญี่ปุ่น)มือ สีคู่กับส้ม acridine 0.01% (Wako Pureเคมีภัณฑ์ โอซาก้า ญี่ปุ่น) และ 0.2% rhodamine B (Wako Pureเคมีภัณฑ์ โอซาก้า ญี่ปุ่น) ในอะซิโตน และครอบคลุมการจัดส่งหยดตัวอย่างข้าว homogenised ยังกระจายไปในกระจกสไลด์ สีกับ 0.01% acridine orange (Wako Pure แล้วเคมีภัณฑ์ โอซาก้า ญี่ปุ่น) และครอบคลุมการจัดส่ง ตัวอย่างจากนั้นนายสุภัคใช้สังเกตเรืองแสงอย่างวิธีการเลเซอร์ confocal สแกนกล้องจุลทรรศน์ (LSM510, CarlZeiss, Oberkochen เยอรมนี) พร้อมกรอง GFP การเปลี่ยนแปลงในรูปร่างเมล็ดในระหว่างกระบวนการย่อยอาหารการเพาะเลี้ยงที่เลียนแบบสังเกต และการใช้กล้องจุลทรรศน์ (VH-Z-05 และ VH - analysed8000, Keyence โอซาก้า ญี่ปุ่น)92 ม. Tamura et al. / เคมีอาหาร 191 (2016) 91-97การสแกน microscopy อิเล็กตรอน (หุย Quanta 200 เฝ่ยอิเล็กตรอนเลนส์ ไอน์โฮเฟน เนเธอร์แลนด์) ยังใช้ในการตรวจสอบการเปลี่ยนแปลงในธัญพืชสุกเหมือนเดิมและสภาพผิวของตัวอย่างธัญพืชในระหว่างกระบวนการย่อยอาหารการเพาะเลี้ยง มีเก็บตัวอย่างเมล็ดข้าวในระหว่างกระบวนการ ทันทีนำไปแช่ในไนโตรเจนเหลวและตรึงแห้งใช้แบบแช่แข็งเป่า (FD18LT, Cuddonวิศวกรรม) ตัวอย่างแห้งแช่แข็งถูกติดตั้งบน stubด้วยเทปเหนียวคู่ sputter เคลือบ ด้วยทอง sputter เป็นcoater (SCD 050, Balzers ลิกเตนสไตน์) และตรวจสอบ
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.4 กล้องจุลทรรศน์เหมือนเดิมและข้าวสวย homogenised ถูกเก็บรวบรวมในช่วงที่อยู่ในหลอดทดลองกระบวนการย่อยอาหารที่0 และ 30 นาที (G30) ของจำลองการย่อยอาหารในกระเพาะอาหาร; และหลังจาก 5 (I5), 30 (I30) และ 120 นาที (i120) ของจำลองการย่อยอาหารในลำไส้ขนาดเล็กจากเครื่องปฏิกรณ์ย่อยอาหาร. กลุ่มตัวอย่างที่ได้มาแช่ในใกล้ที่เป็นกลาง (pH 6) หรือที่เป็นกรดโซลูชั่น(pH 3) ที่จะหยุดในกระเพาะอาหาร หรือปฏิกิริยาของเอนไซม์ในลำไส้ขนาดเล็กตามลำดับจนกระทั่งการวิเคราะห์ จะเห็นภาพการกระจายสารตัวอย่างเหมือนเดิมและ homogenised คราบเรืองแสงถูกนำไปใช้ ข้าวตัวอย่างที่ได้รับการอย่างระมัดระวังและหั่นบาง ๆใช้มีดใบมีด (ขนนกชนิด S35, ขนนก, โอซาก้าประเทศญี่ปุ่น) โดยมือสองครั้งที่ย้อมด้วยสี0.01% สีส้ม acridine (Wako บริสุทธิ์สารเคมีโอซาก้าประเทศญี่ปุ่น) และ 0.2% rhodamine B (Wako บริสุทธิ์สารเคมีโอซาก้าประเทศญี่ปุ่น) ในอะซีโตนและปกคลุมด้วยใบปก. ลดลงของตัวอย่างข้าวหุงสุก homogenised ยังกระจายบนสไลด์แก้วสีแล้วกับ0.01% สีส้ม acridine (Wako บริสุทธิ์สารเคมีโอซาก้าประเทศญี่ปุ่น) และปกคลุม กับใบปะหน้า กลุ่มตัวอย่างจากนั้นก็สังเกตเห็นโดยใช้การสังเกตเรืองแสงที่เรียบง่ายรูปแบบของกล้องจุลทรรศน์confocal เลเซอร์สแกน (LSM510 คาร์ลไซส์Oberkochen เยอรมนี) พร้อมกับตัวกรอง GFP การเปลี่ยนแปลงในรูปทรงเมล็ดข้าวในระหว่างการจำลองในกระบวนการย่อยอาหารในหลอดทดลองได้รับการตั้งข้อสังเกตและวิเคราะห์โดยใช้กล้องจุลทรรศน์แบบดิจิตอล(VH-Z-05 & VH- 8000, Keyence โอซาก้าประเทศญี่ปุ่น). 92 เอ็มทามูระ, et al / อาหารเคมี 191 (2016) 91-97 กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนสแกน (เฟควอนตั้ม 200 FEI อิเล็กตรอนOptics, Eindhoven, เนเธอร์แลนด์) ก็ยังใช้ในการตรวจสอบการเปลี่ยนแปลงในเมล็ดสุกเหมือนเดิมและสภาพพื้นผิวของเมล็ดตัวอย่างในช่วงในหลอดทดลองกระบวนการย่อยอาหาร ตัวอย่างข้าวที่ถูกเก็บรวบรวมในระหว่างกระบวนการแช่ทันทีในไนโตรเจนเหลวและแช่แข็งแห้งโดยใช้เครื่องเป่าแช่แข็ง(FD18LT, Cuddon วิศวกรรม) แช่แข็งตัวอย่างแห้งถูกติดตั้งอยู่บนต้นขั้วด้วยเทปเหนียวคู่พ่นเคลือบด้วยทองในปะทุCoater (SCD 050, Balzers, Liechtenstein) และตรวจสอบ
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.4 . กล้องจุลทรรศน์
เหมือนเดิมและ homogenised ข้าวสุกถูกเก็บรวบรวมในระหว่าง
ประสิทธิภาพในกระบวนการย่อยที่ 0 และ 30 นาที ( g30 ) แบบจำลอง
ในการย่อยอาหารในกระเพาะอาหาร และหลังจาก 5 ( i5 ) , 30 ( I30 ) และ 120 นาที ( i120 )
) ขนาดเล็ก ลำไส้ย่อยอาหารจากการย่อย
รวบรวมจำนวนเตาปฏิกรณ์ แช่ในใกล้เป็นกลาง ( pH 6
) หรือเปรี้ยวโซลูชั่น ( pH 3 ) หยุดกระเพาะอาหารหรือลำไส้ขนาดเล็กเอนไซม์ปฏิกิริยา
ตามลำดับจนถึงการวิเคราะห์ ที่จะเห็นภาพการกระจายของสารประกอบ
เหมือนเดิมและ homogenised ตัวอย่างเรืองแสงคราบ
ถูกประยุกต์ ตัวอย่างของอย่างระมัดระวัง และหั่นบาง ๆ
โดยใช้ใบมีด ( S35 ประเภทขนนก , ขนนก , Osaka , Japan ) โดย
มือคู่ที่เปื้อน 0.01% เรือโว้ย ( Wako เพียว
เคมีภัณฑ์โอซาก้า , ญี่ปุ่น ) และ 0.2% โรดามีน บี ( Wako เพียว
สารเคมี , โอซาก้า , ญี่ปุ่น ) ) และปกคลุมด้วยฝาครอบลื่น
หยด homogenised ข้าวสุกตัวอย่างยังแพร่กระจายบน
กระจกสไลด์ แล้วย้อมด้วย 0.01 % เรือโว้ย ( Wako เพียว
สารเคมี , โอซาก้า , ญี่ปุ่น ) และ ปกคลุมด้วยฝาครอบหลุด ตัวอย่าง
แล้วสังเกตใช้ง่าย
แบบเรืองแสงโหมดของเลเซอร์ด้วยกล้องจุลทรรศน์ ( lsm510 , Carl Zeiss oberkochen
, , เยอรมนี ) พร้อมกับ GFP กรอง การเปลี่ยนแปลง
ในเมล็ดข้าวรูปร่างในระหว่างกระบวนการย่อยอาหารการจำลองในการสังเกตและวิเคราะห์ได้
ใช้กล้องจุลทรรศน์ดิจิตอล ( vh-z-05 & VH -
8 , KEYENCE , โอซาก้า , ญี่ปุ่น ) .
92 เมตร ทามูระ et al . เคมีอาหาร / 191 ( 2016 ) 91 97
) กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราด ( เฟต้า 200เฟยอิเล็กตรอน
เลนส์ , Eindhoven , เนเธอร์แลนด์ ) ถูกใช้เพื่อตรวจสอบการเปลี่ยนแปลง
ในยังคงต้มธัญพืช และสภาพพื้นผิวของตัวอย่างธัญพืช
ในระหว่างกระบวนการย่อยในหลอดทดลอง . เมล็ดตัวอย่าง
ในระหว่างกระบวนการทันทีแช่ในไนโตรเจนเหลวแช่แข็งแห้งและแช่แข็ง
ใช้เครื่องเป่า ( fd18lt cuddon
, วิศวกรรม แช่แข็งแห้งจำนวนติดตั้งบนตอไม้
กับเทปเหนียวสองละล่ำละลักเคลือบด้วยทองในละล่ำละลัก
เครื่องเคลือบ ( SCD . บัลเซอร์ , ลิกเตนสไตน์ ) และตรวจสอบ
การแปล กรุณารอสักครู่..
