Materials and methods2.1. Materials

Materials and methods
2.1. Materials
Soy protein isolate (SPI, >90% protein d.b., as determined by
the Kjeldahl method) was donated by Yuwang Company (Shandong,
China). Transglutaminase (Activa TI; 100 units of enzyme
activity per gram of powdered preparation) was a gift from
Ajinomoto North America, Inc. (Itasca, IL, USA). Riboflavin (≥98%)
and pancreatin (8 × USP) were products from Sigma–Aldrich (St.
Louis, MO), and pepsin from porcine stomach mucosa (5 × USP)
was obtained from Fisher Scientific. Other chemicals used in
this study were of analytical grade.
2.2. Preparation of high intensity ultrasound treated soy
protein isolate
SPI dispersions (10%, w/v) were prepared by adding distilled
water into protein powder and then gently stirring for 2 h. A
sonication processor model JY92-2D (Ning Bo Scientz Biotechnology
Co. Ltd, Ningbo, Zhejiang, China) with a 0.636 cm
diameter titanium probe used for high intensity ultrasound
treatment of 100 mL of SPI dispersions in 125 mL flat bottom
conical flasks immersed in an ice-water bath. Samples were
treated at 20 kHz at 400 W for 0, 20 or 40 min (pulse duration
of on-time 5 sand off-time 1 s). The temperatures of ultrasonic
treated SPI suspensions did not exceed 20 °C. After
ultrasound treatments, all samples were freeze-dried and then
Journal of Functional Foods 19 (2015) 182–193 183
stored at 4 °C in air tight containers. The ultrasonic intensity,
which was analysed according to the method of Jambrak et al.
(Jambrak et al., 2009) as described previously (Hu, Fan, et al.,
2013), was 105–110 W cm−2 in this study.
2.3. Preparation of TGase-induced SPI gels containing
riboflavin (TSGR)
High intensity ultrasound (HIU) or non-HIU-treated SPI suspensions
were prepared by adding 9.1 mL of pH 7.5 0.05 M TrisHCl
buffer (containing 0.01% NaN3) into 0.9 g freeze-dried SPI
powder and stirring for 1 h at room temperature. To these SPI
suspensions was added 0.036 g of riboflavin, for a final content
of 0.04 g riboflavin/g dry SPI. Exposure to light was avoided to
minimise light-induced deterioration of riboflavin.
TGase solution (0.9 mL of a 20 units/mL solution prepared
as 2 g Activa TI in 10 mL of pH 7.5 0.05 M Tris-HCl buffer containing
0.01% NaN3) was added to the riboflavin containing SPI
suspensions with rapid stirring for 10 s, and the mixtures poured
into 5 mL syringes, which were sealed by parafilm and wrapped
with aluminium foil to avoid light. Aluminium foil was also
used to line the inside walls of the syringes to facilitate later
removal of formed gels from the syringes. The final concentrations
of SPI protein and TGase were 9% (w/v) and 20 units/g
protein, respectively. After incubation at 37 ± 1 °C for 4 h, the
syringes were kept overnight at 4 °C before the gels were carefully
taken out from the syringes.
The gels were cut into small discs (radius ≈3 mm, high
≈2 mm), then freeze-dried for the determination of encapsulation
efficiency, in vitro release, erosion and swelling properties,
as well as for analysis by scanning electron microscopy. Wet
gels (not freeze-dried) were used for determination of gel yield
and gel strength.
Freeze-dried transglutaminase-induced gels but without riboflavin
were prepared in a similar way for analysis by FTRaman
and FT-IR spectroscopy.
2.4. Microstructure of gels
Freeze-dried TGase-induced SPI gels containing riboflavin (TSGR)
prepared as described in section 2.3 were cut into square discs
(~10 mm × 10 mm × 1 mm).The gels were sprayed with gold and
observed by a scanning electron microscope referred to in our
previous works

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการ2.1. วัสดุโปรตีนถั่วเหลือง (SPI, > 90% d.b. โปรตีนวิธี Kjeldahl) ได้บริจาค โดย บริษัท Yuwang (มณฑลซานตงประเทศจีน) Transglutaminase (ตี้ Activa; 100 หน่วยของเอนไซม์กิจกรรมต่อกรัมของผงเตรียม) ได้ของขวัญจากยิอเมริกาเหนือ Inc. (Itasca, IL สหรัฐอเมริกา) ไรโบเฟลวิน (≥98%)และ pancreatin (8 × USP) ผลิตภัณฑ์จากซิก-Aldrich (เซนต์Louis, MO), และเพพซินจากช่วงท้อง mucosa (5 × USP)ได้รับจากวิทยาศาสตร์ฟิชเชอร์ สารเคมีอื่น ๆ ที่ใช้ในการศึกษานี้ได้วิเคราะห์เกรด2.2 การเตรียมความเข้มสูงซาวด์ถือว่าถั่วเหลืองโปรตีนDispersions SPI (10%, w/v) เตรียมไว้ โดยการเพิ่มกลั่นน้ำโปรตีนผงแล้ว ค่อย ๆ กวนสำหรับ 2 h. Asonication ตัวประมวลผลรุ่น JY92-2D (หนิงโบ Scientz เทคโนโลยีชีวภาพจำกัด หนิงโป เจ้อเจียง จีน) กับ 0.636 cmโพรบไทเทเนียมเส้นผ่าศูนย์กลางที่ใช้สำหรับเครื่องอัลตราซาวด์ความเข้มสูงรักษา 100 mL ของ SPI dispersions ล่างแบน 125 mLทรงกรวยน้ำที่แช่อยู่ในน้ำเป็นน้ำแข็ง ตัวอย่างดีรักษาที่ 20 kHz ที่ 400 W สำหรับ 0, 20 หรือ 40 นาที (ชีพจรระยะเวลาของเวลา 5 ทรายปิดเวลา 1 s) อุณหภูมิของอัลตราโซนิกบริการ SPI บำบัดไม่เกิน 20 องศาเซลเซียส หลังจากอัลตร้าซาวด์รักษา ตัวอย่างทั้งหมดมีกรอบแล้วสมุดรายวันงานอาหาร 19 (2015) 182-193 183เก็บที่ 4 ° C ในภาชนะแน่นอากาศ ความเข้มอัลตราโซนิกซึ่งเป็น analysed ตามวิธีของ Jambrak et al(Jambrak et al., 2009) ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (หู พัดลม et al.,2013), 105-110 W cm−2 ในการศึกษานี้ได้2.3. เตรียมเกิด TGase SPI เจประกอบด้วยไรโบเฟลวิน (TSGR)อัลตร้าซาวด์ความเข้มสูง (ฮิว) หรือไม่ฮิวรับบริการ SPIเตรียมได้ โดยการเพิ่มมล 9.1 ของ pH 7.5 0.05 M TrisHClบัฟเฟอร์ (ประกอบด้วย 0.01% NaN3) เป็น 0.9 กรัมอบแห้ง SPIผงและกวนสำหรับ h 1 ที่อุณหภูมิห้อง การ SPI เหล่านี้บริการเพิ่ม g 0.036 ของไรโบเฟลวิน เนื้อหาขั้นสุดท้ายของไรโบเฟลวิน 0.04 g/g แห้ง SPI แสงแสงหลีกเลี่ยงการลดแสงทำให้เกิดการเสื่อมสภาพของวิตามินโซลูชั่น TGase (0.9 mL ของโซลูชันหน่วย 20 mL เตรียมเป็น 2 g Activa ตี้ใน 10 mL ของ pH 7.5 0.05 M ทริสเรทติ้ง HCl บัฟเฟอร์ประกอบด้วย0.01% NaN3) ถูกเพิ่มวิตามินที่ประกอบด้วย SPIบริการกับกวนอย่างรวดเร็ว 10 s และน้ำยาผสม pouredในเข็มฉีดยา 5 mL ซึ่งถูกปิดผนึก โดย parafilm และห่อด้วยอะลูมิเนียมฟอยล์เพื่อหลีกเลี่ยงแสง มีอะลูมิเนียมฟอยล์ยังใช้เส้นภายในกำแพงของเข็มฉีดยาเพื่อความสะดวกในภายหลังเอารูปแบบเจจากเข็มฉีดยา ความเข้มข้นสุดท้ายSPI โปรตีนและ TGase มี 9% (w/v) และ g 20 หน่วยโปรตีน ตามลำดับ หลังจากบ่มที่ 37 ± 1 ° C สำหรับ 4 h การเข็มฉีดยาที่ถูกเก็บไว้ค้างคืนที่ 4 ° C ก่อนที่เจจะได้ระมัดระวังนำออกมาจากเข็มฉีดยาเจถูกตัดเป็นแผ่นเล็ก ๆ (รัศมี ≈3 mm สูง≈2 mm), จากนั้นอบแห้งสำหรับการกำหนดของ encapsulationประสิทธิภาพ การเพาะเลี้ยงปล่อย พังทลายและบวมคุณสมบัติเช่นกันเป็นการวิเคราะห์โดยสแกน microscopy อิเล็กตรอน เปียกใช้สำหรับการกำหนดผลผลิตของเจเจ (ไม่อบแห้ง)และความแข็งแรงของเจลเกิด transglutaminase เจอบแห้งแต่ไม่ มีไรโบเฟลวินได้เตรียมพร้อมในการวิเคราะห์ โดย FTRamanและก FT-IR2.4 การต่อโครงสร้างจุลภาคของเจSPI TGase เกิดกรอบเจประกอบด้วยไรโบเฟลวิน (TSGR)เตรียมตามที่อธิบายไว้ในส่วน 2.3 ถูกตัดเป็นแผ่นสี่เหลี่ยม(~ 10 มม. × 10 มม.× 1 mm) เจถูกพ่นทอง และสังเกต ด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนการสแกนในของเรางานก่อนหน้านี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการ
2.1 วัสดุโปรตีนถั่วเหลือง (SPI> 90% โปรตีนฐานข้อมูลตามที่กำหนดโดยวิธีKjeldahl) รับบริจาคมาจาก บริษัท Yuwang (มณฑลซานตงประเทศจีน) ทราน (Activa TI; 100 หน่วยของเอนไซม์กิจกรรมต่อกรัมของการเตรียมผง) เป็นของขวัญจากAjinomoto North America, Inc. (อีตาสกา, อิลลินอยส์, สหรัฐอเมริกา) Riboflavin (≥98%) และ Pancreatin (8 × USP) เป็นผลิตภัณฑ์จาก Sigma-Aldrich (เซนต์หลุยส์, มิสซูรี่) และเปปซินจากเยื่อบุกระเพาะอาหารสุกร (5 × USP) ที่ได้รับจากฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ สารเคมีอื่น ๆ ที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้มีการวิเคราะห์ของเกรด. 2.2 การจัดทำอัลตราซาวนด์เข้มสูงได้รับการรักษาถั่วเหลืองโปรตีนแยกกระจายSPI (10% w / v) ได้จัดทำขึ้นโดยการเพิ่มกลั่นน้ำเป็นผงโปรตีนและกวนเบาๆ แล้วเป็นเวลา 2 ชั่วโมง ประมวลผลรูปแบบ sonication JY92-2D (หนิงโบ Scientz เทคโนโลยีชีวภาพจำกัด Ningbo, Zhejiang, จีน) กับ 0.636 ซม. เส้นผ่าศูนย์กลางสอบสวนไททาเนียมที่ใช้สำหรับการอัลตราซาวนด์เข้มสูงการรักษา 100 มิลลิลิตรกระจาย SPI ใน 125 มิลลิลิตรแบนด้านล่างขวดแช่อยู่ในรูปกรวยห้องอาบน้ำน้ำแข็งน้ำ ตัวอย่างรับการรักษาที่ 20 เฮิร์ทซ์ที่ 400 W 0, 20 หรือ 40 นาที (ระยะเวลาชีพจรเมื่อเวลา5 ทรายออกเวลา 1 วินาที) อุณหภูมิของอัลตราโซนิกได้รับการรักษาแขวนลอย SPI ไม่เกิน 20 ° C หลังจากการรักษาอัลตราซาวนด์เป็นตัวอย่างแห้งแล้ววารสารอาหารฟังก์ชั่น19 (2015) 182-193 183 เก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสในอากาศแน่นภาชนะ ความเข้มล้ำซึ่งได้รับการวิเคราะห์ตามวิธีการของ Jambrak et al,. (Jambrak et al., 2009) ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้า (Hu, พัดลม, et al., 2013) เป็น 105-110 ซม W-2 ในการศึกษานี้ . 2.3 การเตรียมเจล SPI TGase ที่เกิดขึ้นที่มีriboflavin (TSGR) อัลตราซาวด์ความเข้มสูง (Hiu) หรือไม่ได้รับการรักษา Hiu แขวนลอย SPI ได้จัดทำขึ้นโดยการเพิ่ม 9.1 มิลลิลิตร pH 7.5 0.05 M TrisHCl บัฟเฟอร์ (ที่มี 0.01% NaN3) ลง 0.9 กรัม freeze- SPI แห้งผงและตื่นเต้นเป็นเวลา1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง เพื่อ SPI เหล่านี้แขวนลอยถูกบันทึก0.036 กรัม riboflavin สำหรับเนื้อหาสุดท้าย0.04 กรัม riboflavin / g แห้ง SPI การสัมผัสกับแสงหลีกเลี่ยงที่จะลดการเสื่อมสภาพแสงที่เกิดขึ้นของ riboflavin. แก้ปัญหา TGase (0.9 มิลลิลิตรของ 20 หน่วย / แก้ปัญหามลเตรียมเป็น2 กรัม Activa TI 10 มลค่า pH 7.5 0.05 M บัฟเฟอร์ Tris-HCl ที่มี0.01% NaN3) เป็น เพิ่มไปยัง riboflavin มี SPI สนองกับกวนอย่างรวดเร็วสำหรับ 10 วินาทีและผสมเทลงใน5 เข็มฉีดยามิลลิลิตรซึ่งถูกปิดผนึกโดย parafilm และห่อด้วยกระดาษฟอยล์อลูมิเนียมเพื่อหลีกเลี่ยงแสง อลูมิเนียมฟอยล์ก็ยังใช้ในการเข้าแถวผนังด้านในของเข็มฉีดยาเพื่ออำนวยความสะดวกต่อมาการกำจัดของเจลเกิดขึ้นจากเข็มฉีดยา ความเข้มข้นสุดท้ายของโปรตีน SPI และ TGase 9% (w / v) และ 20 หน่วย / กรัมโปรตีนตามลำดับ หลังจากการบ่มที่อุณหภูมิ 37 ± 1 ° C เป็นเวลา 4 ชั่วโมงที่เข็มฉีดยาที่ถูกเก็บไว้ในชั่วข้ามคืนที่4 ° C ก่อนที่จะเจลได้อย่างรอบคอบนำออกมาจากเข็มฉีดยา. เจลถูกตัดเป็นแผ่นขนาดเล็ก (รัศมี≈3มิลลิเมตรสูง≈2มิลลิเมตร) แล้วแห้งสำหรับการกำหนดของการห่อหุ้มอย่างมีประสิทธิภาพในการปล่อยหลอดทดลองการกัดเซาะและคุณสมบัติบวมเช่นเดียวกับการวิเคราะห์โดยการสแกนกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน เปียกเจล (ไม่แห้ง) ถูกนำมาใช้ในการกำหนดอัตราผลตอบแทนเจลและแข็งแรงของเจล. ตรึงแห้งเจลรานที่เกิดขึ้น แต่ไม่มี riboflavin ได้จัดทำในลักษณะที่คล้ายกันในการวิเคราะห์โดย FTRaman และสเปกโทรสโก FT-IR. 2.4 จุลภาคของเจลแห้งเจล SPI TGase ที่เกิดขึ้นที่มี riboflavin (TSGR) จัดทำขึ้นตามที่อธิบายไว้ในส่วน 2.3 ถูกตัดเป็นแผ่นสี่เหลี่ยม(~ 10 มม x 10 มม× 1 มิลลิเมตร) เจลได้โดยเริ่มต้นที่ถูกพ่นด้วยสีทองและข้อสังเกตจากการสแกนกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนที่อ้างถึงในของเราผลงานก่อนหน้านี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการ
2.1 . วัสดุ
โปรตีนถั่วเหลืองสกัด ( SPI > 90% โปรตีนมาตรฐานตามที่กำหนดโดยวิธี
0 ) บริจาคโดย บริษัท yuwang ( Shandong
จีน ) ทรานส์กลูตามิเนส ( แอคติวา Ti ; 100 หน่วยของเอนไซม์
กรัมต่อการเตรียมผง ) คือของขวัญจาก
เหนือฯ อเมริกา อิงค์ ( อีตาสกา , IL , USA ) Riboflavin ( ≥ 98% )
แล้ว Pancreatin ( 8 × USP ) เป็นผลิตภัณฑ์จาก Sigma –ดิช ( St .
Louis , MO ) และเพพซินจาก porcine กระเพาะอาหารเยื่อเมือก ( 5 × USP )
ได้จากชาวประมงทางวิทยาศาสตร์ สารเคมีอื่น ๆที่ใช้ในการศึกษา คือ การวิเคราะห์ในระดับ
.
2.2 . การเตรียมการอัลตราซาวด์ความเข้มสูงโปรตีนไอโซเลตจากถั่วเหลือง

SPI dispersions ( 10 % w / v ) เตรียมได้โดยการเพิ่ม
กลั่นน้ำเป็นโปรตีนผง แล้วค่อย ๆ กวนเป็นเวลา 2 ชั่วโมง เป็นโปรเซสเซอร์รุ่น jy92-2d
sonication ( หนิงโบ scientz เทคโนโลยีชีวภาพ
จำกัด , Ningbo , Zhejiang , จีน ) กับ 0.636 ซม. เส้นผ่าศูนย์กลางไทเทเนียมโพรบใช้

การอัลตราซาวด์ความเข้มสูง 100 ml ของ SPI dispersions ใน 125 ml ขวดกรวยด้านล่างแบน
แช่ใน น้ำ น้ำแข็ง อาบ จำนวน 20 kHz
รักษา 400 w 020 หรือ 40 นาที (
ระยะเวลาชีพจรของทรายในเวลา 5 ปิดเวลา 1 วินาที ) อุณหภูมิของ ultrasonic
ถือว่า SPI แขวนลอยไม่เกิน 20 องศา หลังจาก
อัลตร้าซาวด์รักษาตัวอย่างแห้งแล้ว
วารสารการทำงานอาหาร 19 ( 2015 ) 182 – 193 183
เก็บไว้ที่ 4 ° C ในคอนเทนเนอร์อากาศแน่น ความเข้มของคลื่นอัลตราโซนิค
ซึ่งวิเคราะห์ตามวิธีการของ jambrak et al .
( jambrak et al . , 2009 ) ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( Hu , พัดลม , et al . ,
) ) เท่ากับ 105 – 110 W cm − 2 ในการศึกษา .
2.3 การเตรียมเอนไซม์เจลที่มีการ SPI
Riboflavin ( tsgr )
อัลตราซาวด์ความเข้มสูง ( หิว ) หรือ ไม่หิวกับ SPI สารแขวนลอย
เตรียมโดยการเพิ่มส่วนมิลลิลิตร 0.05 M trishcl
บัฟเฟอร์ pH 7.5 ( ที่มี 0.01 % nan3 ) เป็น 0.9 กรัม SPI
อบแห้งผงและกวน 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง กับช่วงล่าง SPI
เหล่านี้เพิ่ม 0.036 กรัม Riboflavin สำหรับ
เนื้อหาสุดท้าย 0.04 กรัม Riboflavin / g บริการ SPI . การเปิดรับแสงในการหลีกเลี่ยง

ลดแสงเกิดจากการเสื่อมสภาพของ Riboflavin .
เอนไซม์โซลูชั่น ( 0.9 ml ของ 20 หน่วยต่อมิลลิลิตรเตรียมสารละลาย
2 G แอ็คทิวา Ti 10 มิลลิลิตร 0.05 M HCl บัฟเฟอร์ pH 7.5 ซึ่งประกอบด้วย
001 % nan3 ) ถูกเพิ่มไปยัง Riboflavin ที่มี SPI
สารแขวนลอยอย่างรวดเร็วกวน 10 , และส่วนผสมเท
5 เข็มมล ที่ถูกปิดผนึกไว้โดยพาราฟิล์มห่อด้วยฟอยล์อลูมิเนียม
เพื่อหลีกเลี่ยงแสง อลูมิเนียมฟอยล์ยัง
ใช้เส้นผนังด้านในของเข็มฉีดยาเพื่ออำนวยความสะดวกการกำจัดในภายหลัง
ของรูปแบบเจลจากเข็มฉีดยา
ความเข้มข้นสุดท้ายของโปรตีน SPI และเอนไซม์ 9 % ( w / v ) และ 20 หน่วย / กรัม
โปรตีน หลังจากบ่มที่ 37 ± 1 ° C 4 H ,
เข็มฉีดยาถูกเก็บไว้ค้างคืนที่ 4 ° C ก่อนเจลได้ออกมาจากเข็มฉีดยาอย่าง
.
เจลมาตัดเป็นแผ่นเล็ก ( รัศมี≈ 3 อืม อืม
≈สูง 2 ) แล้วผลการหาประสิทธิภาพของ encapsulation
ในการปล่อยการกัดกร่อนและการบวมของ
เช่นเดียวกับการวิเคราะห์ด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราด . เจลเปียก
( ไม่แห้ง ) ใช้สำหรับการหาปริมาณผลผลิต และค่าความแข็งแรงของเจลเจล
.
ตรึงแห้งทรานส์กลูตามิเนสและเจล แต่ไม่มี Riboflavin
เตรียมในลักษณะที่คล้ายกันสำหรับการวิเคราะห์โดย ftraman FT-IR spectroscopy และ
.
2.4 . โครงสร้างของเจล