Cell Migration/Invasion AssayFor in

Cell Migration/Invasion Assay
For in-vitro assessment of metastasis, migration and invasion
assays were performed using a matrigel invasion chamber. The matrigel coated plates were rehydrated in warm DMEM serum-free medium for 2 hrs at 37C. Cells in serum-starved media were seeded at the density of 5x104cells/well in 6-well inserts with 8mm pore polycarbonate membranes for migration and in matrigel-coated inserts for invasion, and chemoattractant (DMEM with 10% FBS) was added in the plate chamber. Cells wereincubated in 5% CO2atmosphere at 37C for 24 hrs. Non-invading cells were removed from the upper surface of the membrane by scraping using cotton swabs and cells which invaded through the matrigel to the bottom of the insert were fixed and stained with Diff-Quick cell staining kit and mounted on slide.
Cells were observed under microscope and photographed using Nikon Eclipse TE 2000-U (Nikon Instruments Inc., Melville, NY).Ten random fields of view for each well were quantified by counting the cells in each field and averaging the results for each condition.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทดสอบการโยกย้าย/บุกรุกเซลล์สำหรับการประเมินในการแพร่กระจาย การโยกย้าย และการบุกรุกassays ถูกดำเนินการโดยใช้ matrigel บุกห้อง แผ่นเคลือบ matrigel ถูก rehydrated ในอบอุ่น DMEM เซรั่มฟรี 2 ชั่วโมงที่ 37 c เซลล์ซีรั่ม starved สื่อถูกเตรียมที่ความหนาแน่นของ 5x104cells/ดี ในแทรกดี 6 กับ 8 มม.โพลีคาร์บอเนตรูขุมขนเยื่อสำหรับการโยกย้าย และ ในเคลือบ matrigel แทรกสำหรับบุกรุก และ chemoattractant (DMEM 10% FBS) ถูกเพิ่มลงในช่องใส่แผ่น เซลล์ wereincubated 5% CO2atmosphere 37 c เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ไม่บุกรุกเซลล์ถูกลบออกจากผิวบนของเมมเบรน โดยขูดใช้ฝ้าย และเซลล์ซึ่งบุกผ่าน matrigel ที่ด้านล่างของการแทรก แก้ไข และย้อม ด้วยเซลล์รวดเร็ว Diff ชุดย้อมสี และติดตั้งบนภาพนิ่งเซลล์ถูกตั้งข้อสังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์ และถ่ายโดยใช้กล้อง Nikon Eclipse TE 2000-U (Nikon เครื่องมือ อิงค์ เมลวิลล์ NY) สิบสุ่มของมุมมองแต่ละดีถูกวัด โดยการนับเซลล์ในแต่ละฟิลด์ และเฉลี่ยผลลัพธ์สำหรับแต่ละเงื่อนไข

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

มือถือการโยกย้าย / บุก Assay
สำหรับในหลอดทดลองประเมินผลของการแพร่กระจายการอพยพและการบุก
ตรวจถูกดำเนินการโดยใช้ห้อง matrigel บุกรุก แผ่นเคลือบ matrigel ถูก rehydrated ใน DMEM กลางซีรั่มฟรีที่อบอุ่นสำหรับ 2 ชั่วโมงที่ 37C เซลล์ในสื่อเซรั่มหิวโหยเมล็ดที่มีความหนาแน่นของ 5x104cells / ดีในการแทรก 6 ดีกับ 8mm เยื่อรูขุมขนโพลีคาร์บอเนตสำหรับการโยกย้ายและในการแทรก matrigel เคลือบสำหรับการบุกรุกและ chemoattractant นี้ (DMEM 10% FBS) ถูกบันทึกอยู่ในแผ่น ห้อง. เซลล์ wereincubated ใน 5% CO2atmosphere ที่ 37C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง เซลล์ที่ไม่ใช่ที่บุกรุกออกจากพื้นผิวด้านบนของเมมเบรนโดยขูดใช้สำลีก้อนและเซลล์ที่บุกเข้ามาผ่าน matrigel ที่ด้านล่างของแทรกได้รับการแก้ไขและการย้อมด้วยสีชุดเซลล์ย้อมสี Diff-รวดเร็วและติดตั้งอยู่บนสไลด์.
เซลล์ที่ถูกตั้งข้อสังเกต ภายใต้กล้องจุลทรรศน์และถ่ายภาพโดยใช้กล้อง Nikon คราส TE 2000-U (Nikon Instruments Inc. เมลวิลล์นิวยอร์ก) .Ten เขตสุ่มในมุมมองของแต่ละคนดีถูกวัดโดยการนับจำนวนเซลล์ในแต่ละเขตและค่าเฉลี่ยผลสำหรับแต่ละสภาพ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การบุกรุกเซลล์ / การทดสอบสำหรับการประเมินผลในหลอดทดลองของการย้ายถิ่นและการแพร่กระจายหรือการใช้ matrigel บุกห้อง การ matrigel เคลือบแผ่นยังได้ทำการ รีไฮเดรทมในอบอุ่น dmem serum-free ขนาดกลาง 2 ชั่วโมงที่ 37c เซลล์ในเลือดอดอาหารสื่อถูก seeded ที่ความหนาแน่นของ 5x104cells / ดีแทรก 6-well ด้วยเมมเบรนโพลีคาร์บอเนตรูขุมขน 8mm สำหรับการย้ายถิ่นและแทรก matrigel เคลือบสำหรับการรุกราน และ chemoattractant ( dmem 10% FBS ) ถูกเพิ่มเข้ามาในจานในห้อง . เซลล์ wereincubated 5 % co2atmosphere ที่ 37c เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ไม่บุกรุกเซลล์ถูกลบออกจากผิวบนของแผ่นโดยขูดโดยใช้ผ้าฝ้าย swabs และเซลล์ที่บุกผ่าน matrigel ไปด้านล่างของแทรกได้คงที่และเปื้อน Diff อย่างรวดเร็วเซลล์ย้อมสีชุด และติดบนสไลด์เซลล์ที่พบภายใต้กล้องจุลทรรศน์และถ่ายภาพโดยใช้กล้อง Nikon คราสเต 2000-u ( Nikon เครื่องมืออิงค์ Melville , NY ) สิบสุ่มดูแต่ละสาขามี quantified โดยการนับเซลล์ในแต่ละเขต และเฉลี่ยผลสำหรับแต่ละเงื่อนไข