2. Material and methods2.1. Plant m

2. Material and methods
2.1. Plant material
All types of embryos used in the study were of
the same origin, i.e. a highly inbred line of cv.
Borszczagowski. Zygotic embryos were collected
from ethanol sterilised fruits from greenhouse
grown, hand pollinated plants. ZE were collected
on the following days after pollination (DAP): 21
(Fig. 1A), 24, 28, 35, and 42. Samples of ZE
dissected at 42 DAP and stored for further 14 days
(for simplicity designated as a 56 DAP) were also
included in the study. Due to the delay and abnormalities
in the development the ZE of 3n line were
collected only at 35 DAP (Fig. 1B) and 56 DAP.
Whole ovules, testa and ovary tissues surrounding
the seeds were also collected at certain time points.
Somatic embryos of the same diploid inbred line
were collected from established, embryogenic cell
suspension cultures.
2.2. Initiation of the suspension culture
Liquid cultures were initiated directly from primary
explants of sterile seedlings by isolating vegetative
shoot apices about 1.5 mm long. Each ten
shoot apices were placed in 100 ml of liquid
medium in a 350 ml Erlenmeyer flask. A modified
liquid Murashige and Skoog [17] was used, to
which macroelements and iron were added at half
concentration, and microelements and vitamins at
full concentration. The medium was also supplemented
with 250 mg l1 edamine, 40 g l1 sucrose,
5 g l1 glucose. 2,4D was added at a
concentration of 1 mg l1as a sole source of
growth regulators. The pH of the medium was
adjusted to 5.6 before autoclaving (17 min,
121°C). The nitrogen content [NH4
][NNO3
] was
approximately 10:19.5. The explants developing in
liquid media were transferred to fresh media every
2–3 weeks, each time about 300 mg of tissue as
the inoculum per 100 ml of medium. The cell

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. พืชวัสดุชนิดทั้งหมดของโคลนที่ใช้ในการศึกษาได้เดียวกันมา เช่นบรรทัดสูง inbred ของ cvBorszczagowski Zygotic โคลนถูกเก็บรวบรวมจากเอทานอล sterilised ผลไม้จากเรือนกระจกโต มือ pollinated พืช หรุนเซถูกเก็บรวบรวมในวันต่อไปนี้หลังจาก pollination (DAP): 21(Fig. 1A), 24, 28, 35, 42 และ ตัวอย่างของหรุนเซdissected ที่ 42 DAP และเก็บไว้อีก 14 วัน(สำหรับความเรียบง่ายในการกำหนดเป็นหลักสูตร DAP 56) แนะนำรวมอยู่ในการศึกษา เนื่องจากความล่าช้าและความผิดปกติในการพัฒนาหรุนเซที่บรรทัด 3 คืนรวบรวมเฉพาะที่ 35 DAP (Fig. 1B) และหลักสูตร DAP 56ทั้ง ovules เนื้อเยื่อ testa และรังไข่รอบเมล็ดได้รวบรวมบางจุดเวลานั้นโคลน somatic ของ diploid เหมือน inbred บรรทัดถูกรวบรวมไว้จากการก่อตั้ง เยื่อเซลล์แขวน2.2 การเริ่มต้นของวัฒนธรรมระงับวัฒนธรรมของเหลวได้เริ่มต้นจากหลักexplants ใส่กล้าไม้โดยแยกผักเรื้อรังยิง apices ยาวประมาณ 1.5 มม. แต่ละสิบยิง apices ไว้ใน 100 ml ของของเหลวปานกลางใน 350 มล. Erlenmeyer หนาว การปรับเปลี่ยนMurashige และ Skoog [17] ของเหลวใช้ การmacroelements และเหล็กที่ถูกเพิ่มในครึ่งความเข้ม ข้น และ microelements และวิตามินที่เข้มข้นเต็ม นอกจากนี้ยังได้เสริมสื่อมี 250 mg l 1 edamine ซูโครส 40 g l 15 g l 1 กลูโคส 2, 4D ถูกเพิ่มในการความเข้มข้นของ 1 mg l 1as เป็นแหล่งแต่เพียงผู้เดียวเร็คกูเลเตอร์เติบโต PH ของตัวกลางมีปรับปรุง 5.6 ก่อน autoclaving (17 นาที121 ° C) เนื้อหาไนโตรเจน [NH4] [N NO3] ถูกประมาณ 10:19. 5 Explants พัฒนาในสื่อของเหลวถูกโอนย้ายไปยังสื่อสดทุก2 – 3 สัปดาห์ แต่ละครั้งประมาณ 300 มิลลิกรัมของเนื้อเยื่อเป็นinoculum ต่อ 100 ml ของกลาง เซลล์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . วัสดุจากพืช
ชนิดทั้งหมดของตัวอ่อนที่ใช้ศึกษาของ
แหล่งกำเนิดเดียวกันคือสูงสายพันธุ์สายพันธุ์
borszczagowski . เป็นต้นตัวเก็บ
จากเอทานอล sterilised ผลไม้จากเรือนกระจก
โต มือ เกสรพืช Ze จำนวน
ในวันต่อมาหลังจากการผสมเกสร ( DAP ) : 21
( รูปที่ 1A ) , 24 , 28 , 35 และ 42 ตัวอย่างของ ze
ผ่าที่ 42 DAP และเก็บไว้สำหรับเพิ่มเติม 14 วัน
( สำหรับความเรียบง่ายเขตเป็น 56 DAP ) ยัง
รวมอยู่ในการศึกษา เนื่องจากความล่าช้าและความผิดปกติในการพัฒนาของ

เก็บสายเป็น 3N Ze เพียง 35 DAP ( รูปที่ 1A ) และ มีทั้งหมด 56 DAP .
,
เทสลา และรังไข่เยื่อเมล็ดยังเก็บ ณจุดเวลาใดเวลาหนึ่ง
โซมาติกเอ็มบริโอของเดียวกันซ้ำสายพันธุ์แท้สาย
เก็บจากก่อตั้ง เลี้ยงเซลล์แขวนลอยเชื้อ
.
2.2 . การเริ่มต้นของวัฒนธรรมวัฒนธรรมของเหลวระงับ
ถูกริเริ่มโดยตรงจากการเพาะเลี้ยงต้นกล้าปลอดเชื้อด้วย

ยิง apices แยกทางประมาณ 1.5 มม. ยาว แต่ละสิบ
ยิง apices อยู่ใน 100 ml ของของเหลว
กลาง 350 ml ขวดเออร์เลนเมเยอร์ .โดย
อาหารเหลวและ Skoog [ 17 ] ใช้

ที่แมคโคร ลีเมนท์และเหล็กมีการเพิ่มความเข้มข้นในครึ่ง

และ uncompound และวิตามินที่เต็มไปด้วยความเข้มข้น สื่อยังเสริมด้วย 250 mg L
 1 edamine 40 g l  1 ซูโครส ,
5 g l  1 กลูโคส 2,4d เพิ่มที่ความเข้มข้น 1 มิลลิกรัมต่อลิตร 

1as แหล่งที่มา แต่เพียงผู้เดียวของสารควบคุมการเจริญเติบโต พีเอชของอาหาร
ปรับ 56 ก่อนอัตราส่วนโฟกัส ( 17 นาที
121 ° C ) ไนโตรเจน [ NH4
 ] [ N ] ถูก

 No3  ประมาณ 10:19.5 . เนื้อเยื่อที่พัฒนาใน
เหลวถูกโอนไปยังสื่อสดทุก
2 - 3 สัปดาห์ ครั้งละประมาณ 300 มิลลิกรัม เนื้อเยื่อเป็น
เชื้อต่อ 100 มิลลิลิตร ) เซลล์