2.5. Analysis of sugars, organic acids and amino acids
Sugars and amino acids were extracted from okara following the
procedures of Giannoccaro et al. (2006) with slight modifications. Five
grams of freeze-dried, defatted okara were extracted with 80 mL of
80% v/v ethanol in a water bath (50 °C, 150 rpm, 30 min). Lactose was
added as an internal standard. Extraction was conducted thrice, and
the combined extracts were concentrated to 10 mL using a rotary
evaporator. One part of concentrated extract was added to 2 parts of
acetonitrile, and the mixture was stored at 4 °C for at least 24 h to
allow complete precipitation of proteins. The precipitate was removed
by centrifugation and the supernatant was stored at−20 °C before use.
Organic acidswere extracted from3 g of defatted freeze-dried okara
with 50 mL of 0.1% v/v sulphuric acid in a water bath (50 °C, 150 rpm,
45min). The extractwas then centrifuged (10,000 g, 20min) to remove
the okara, and the supernatant was stored at 4 °C for at least 24 h to
allow complete precipitation of proteins. The precipitate was removed
by centrifugation and the supernatant was stored at−20 °C before use.
HPLC analysis of sugars, organic acids and amino acids followed the
methods of Chen et al. (2014) with slightmodifications. For HPLC analysis
of sugars, it was conducted at 30 °C with a flow rate of 1 mL/min
instead of 40 °C at 1.4 mL/min.
2.5 การวิเคราะห์น้ำตาลกรดอินทรีย์และกรดอะมิโน
น้ำตาลและกรดอะมิโนที่ถูกสกัดจากกากถั่วเหลืองต่อไปนี้
ขั้นตอนของ Giannoccaro et al, (2006) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ห้า
กรัมของแห้ง, กากถั่วเหลืองสกัดน้ำมันสกัด 80 มล
80% v / V เอทานอลในอ่างน้ำ (50 ° C, 150 รอบต่อนาที, 30 นาที) แลคโตสถูก
เพิ่มเป็นมาตรฐานภายใน สกัดได้ดำเนินการสามครั้งและ
สารสกัดรวมกันมีความเข้มข้น 10 มลใช้โรตารี่
ระเหย ส่วนหนึ่งของสารสกัดเข้มข้นถูกบันทึกอยู่ใน 2 ส่วนคือส่วนของ
acetonitrile และส่วนผสมที่ถูกเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมงที่จะ
ช่วยให้การตกตะกอนของโปรตีนที่สมบูรณ์ ตะกอนจะถูกลบออก
โดยการหมุนเหวี่ยงและสารละลายที่ถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 20 องศาเซลเซียสก่อนการใช้งาน.
อินทรีย์ acidswere สกัด from3 กรัมสกัดกากถั่วเหลืองแห้ง
50 มิลลิลิตร 0.1% v / V กรดกำมะถันในอ่างน้ำ (50 ° C, 150 รอบต่อนาที,
45 นาที) extractwas แล้วหมุนเหวี่ยง (10,000 กรัม 20min) เพื่อเอา
กากถั่วเหลืองและสารละลายที่ถูกเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมงที่จะ
ช่วยให้การตกตะกอนของโปรตีนที่สมบูรณ์ ตะกอนจะถูกลบออก
โดยการหมุนเหวี่ยงและสารละลายที่ถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 20 องศาเซลเซียสก่อนการใช้งาน.
วิเคราะห์ HPLC ของน้ำตาลกรดอินทรีย์และกรดอะมิโนตาม
วิธีการของเฉิน, et al (2014) ที่มีการ slightmodifications สำหรับการวิเคราะห์ HPLC
ของน้ำตาลมันก็ดำเนินการที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสโดยมีอัตราการไหลของ 1 มิลลิลิตร / นาที
แทน 40 ° C ที่ 1.4 มิลลิลิตร / นาที
การแปล กรุณารอสักครู่..
