1. Introduction
Forensic scientists worldwide are now investigating the value of Next Generation Sequncing (NGS) for forensic genomic applications [1]. NGS systems are capable of answering a wide range of questions in a single targeted assay. This includes core and expanded sets of autosomal, X and Y markers (STRs), several categories of SNPs (identity SNPs, ancestry SNPs, phenotypic SNPs), and the mtDNA genome (control region or complete mtDNA genome). The introduction of NGS has also revolutionized transcriptomics. RNA sequencing analysis has been traditionally performed through whole transcriptome sequencing, but now targeted RNA sequencing is available. A targeted RNA NGS approach will be beneficial for the identification of body fluids in that significantly more biomarkers can be included in a single assay and quantitative measurements of gene expression are obtained. The ultimate goal of this project is to utilize multiplexed targeted re-sequencing of mRNA transcripts in order to identify the body fluid or tissue of origin and to uniquely associate a specific DNA profile (i.e. donor of the stain) with the specific body fluid type through the analysis of coding region SNPs (cSNPs) within each individual mRNA target. Additionally, we intend to investigate combining the RNA analysis with gDNA STR sequencing allowing simultaneous human individual identification and forensic tissue identification. Here, we demonstrate the successful use of targeted multiplex next generation RNA sequencing assay for the tissue source determination of forensic samples. The assay permits the identification of all forensically relevant body fluids and tissues (blood, semen, saliva, vaginal secretions, menstrual blood and skin). We also successfully demonstrate the ability to detect the components of two-fluid admixed samples. The prototype assay is currently undergoing sensitivity and specificity testing, as well as platform compatibility. Once completed, the assay will be further developed to include miRNA biomarkers as well as cSNP assays.
บทนำForensic scientists worldwide are now investigating the value of Next Generation Sequncing (NGS) for forensic genomic applications [1]. NGS systems are capable of answering a wide range of questions in a single targeted assay. This includes core and expanded sets of autosomal, X and Y markers (STRs), several categories of SNPs (identity SNPs, ancestry SNPs, phenotypic SNPs), and the mtDNA genome (control region or complete mtDNA genome). The introduction of NGS has also revolutionized transcriptomics. RNA sequencing analysis has been traditionally performed through whole transcriptome sequencing, but now targeted RNA sequencing is available. A targeted RNA NGS approach will be beneficial for the identification of body fluids in that significantly more biomarkers can be included in a single assay and quantitative measurements of gene expression are obtained. The ultimate goal of this project is to utilize multiplexed targeted re-sequencing of mRNA transcripts in order to identify the body fluid or tissue of origin and to uniquely associate a specific DNA profile (i.e. donor of the stain) with the specific body fluid type through the analysis of coding region SNPs (cSNPs) within each individual mRNA target. Additionally, we intend to investigate combining the RNA analysis with gDNA STR sequencing allowing simultaneous human individual identification and forensic tissue identification. Here, we demonstrate the successful use of targeted multiplex next generation RNA sequencing assay for the tissue source determination of forensic samples. The assay permits the identification of all forensically relevant body fluids and tissues (blood, semen, saliva, vaginal secretions, menstrual blood and skin). We also successfully demonstrate the ability to detect the components of two-fluid admixed samples. The prototype assay is currently undergoing sensitivity and specificity testing, as well as platform compatibility. Once completed, the assay will be further developed to include miRNA biomarkers as well as cSNP assays.
การแปล กรุณารอสักครู่..
1 . แนะนำนักนิติวิทยาศาสตร์ทั่วโลกตอนนี้การตรวจสอบค่าของรุ่นต่อไป sequncing ( ภาพหลุด ) สำหรับนิติเวชที่มีการใช้งาน [ 1 ] ระบบมีความสามารถในการตอบแทนหลากหลายคำถามเดียวเป้าหมายในการทดสอบ รวมถึงหลักและขยายชุดของยีน , X และ Y เครื่องหมาย ( strs ) หลายประเภทของ snps ( เอกลักษณ์ snps บรรพบุรุษ snps , ฟีโนไทป์ , snps ) และแสดง ( ควบคุมจีโนมภูมิภาคหรือจีโนมแสดงสมบูรณ์ ) แนะนำเทคยังได้ปฏิวัติทราน ริปโตมิก . การวิเคราะห์ลำดับยีนที่ได้รับการแบบดั้งเดิมผ่านทั้งทราน ริปโตมลำดับ แต่ตอนนี้เป้าหมายลำดับ RNA ที่สามารถใช้ได้ เป็นเป้าหมายแทน RNA วิธีการจะเป็นประโยชน์สำหรับการระบุของของเหลวในร่างกายที่สำคัญมากขึ้นซึ่งสามารถรวมอยู่ในการทดสอบและการวัดเชิงปริมาณการแสดงออกของยีนเดียวจะรับ เป้าหมายสูงสุดของโครงการนี้คือการใช้เป้าหมายของ mRNA transcripts การมัลติเพลกซ์อีกครั้งเพื่อระบุของเหลวในร่างกายหรือเนื้อเยื่อต้นกำเนิด และเอกลักษณ์ที่เชื่อมโยงโปรไฟล์ดีเอ็นเอที่เฉพาะเจาะจง ( เช่นผู้บริจาคของคราบ ) กับร่างกายเฉพาะของเหลวประเภทผ่านการวิเคราะห์การเข้ารหัส snps ภูมิภาค ( csnps ) ภายในแต่ละยีนเป้าหมาย นอกจากนี้ , เราตั้งใจที่จะตรวจสอบการรวมการวิเคราะห์ RNA ด้วย gdna STR จัดลำดับให้พร้อมกันตัวแต่ละบุคคลและระบุเนื้อเยื่อที่นิติเวช ที่นี่ เราแสดงให้เห็นถึงการใช้ความสำเร็จของเป้าหมายต่อไปซึ่งการมัลติเพล็กซ์ ( สำหรับเนื้อเยื่อแหล่งการกำหนดตัวอย่างทางนิติเวช ( ให้ระบุ forensically ของเหลวในร่างกายและเนื้อเยื่อที่เกี่ยวข้องทั้งหมด ( เลือด , น้ำอสุจิ , น้ำลาย , ช่องคลอดหลั่ง เลือดประจำเดือน และผิว ) นอกจากนี้เรายังได้แสดงให้เห็นถึงความสามารถในการตรวจสอบส่วนประกอบของของเหลวผสมสองตัวอย่าง ต้นแบบทดสอบความไวและความจำเพาะกำลังทดสอบ รวมทั้งความเข้ากันได้ของแพลตฟอร์ม เมื่อสร้างเสร็จ โดยจะพัฒนาเพิ่มเติมเพื่อรวม mirna ซึ่งเป็น csnp ) .
การแปล กรุณารอสักครู่..