2.3.2. Haemagglutination inhibition

2.3.2. Haemagglutination inhibition test
i) Dispense 0.025 ml of PBS into each well of a plastic V-bottomed microtitre plate.
ii) Place 0.025 ml of serum into the first well of the plate.
iii) Make twofold dilutions of 0.025 ml volumes of the serum across the plate.
iv) Add 4 HAU of virus/antigen in 0.025 ml to each well and leave for a minimum of
30 minutes at room temperature (i.e. about 20°C) or 60 minutes at 4°C.
v) Add 0.025 ml of 1% (v/v) chicken RBCs to each well and mix gently, allow the RBCs to
settle for about 40 minutes at room temperature, i.e. about 20°C, or for 60 minutes at 4°C
if ambient temperatures are high, by which time control RBCs should have formed a
distinct button.
vi) The HI titre is the highest dilution of serum causing complete inhibition of 4 HAU of
antigen. The agglutination is assessed by tilting the plates. Only those wells in which the
RBCs stream at the same rate as the control wells (containing 0.025 ml RBCs and 0.05 ml
PBS only) should be considered to show inhibition.
vii) The validity of results should be assessed against a negative control serum, which should
not give a titre >1/4 (>22 or >log2 2 when expressed as the reciprocal), and a positive
control serum for which the titre should be within one dilution of the known titre.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3.2 Haemagglutination ยับยั้งการทดสอบ
i) Dispense 0.025 มิลลิลิตรพีบีเอสในแต่ละดี V-จุดต่ำสุดพลาสติกแผ่น microtitre.
ii) การวาง 0.025 มิลลิลิตรซีรั่มเป็นอย่างดีครั้งแรกของแผ่น.
iii) ทำให้เจือจางสองเท่าของปริมาณ 0.025 มลเซรั่มทั่ว แผ่น.
iv) เพิ่ม 4 HAU ของไวรัส / แอนติเจนใน 0.025 มลแต่ละดีและทิ้งไว้อย่างน้อย
30 นาทีที่อุณหภูมิห้อง (นั่นคือประมาณ 20 ° C) หรือ 60 นาทีที่ 4 ° C.
v) การเพิ่ม 0.025 มิลลิลิตร 1% (v / v) เม็ดเลือดแดงไก่แต่ละดีและผสมเบา ๆ ให้เม็ดเลือดแดงที่จะ
ชำระสำหรับประมาณ 40 นาทีที่อุณหภูมิห้องคือประมาณ 20 ° C หรือ 60 นาทีที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส
ถ้าอุณหภูมิสูงโดย ซึ่ง RBCs ควบคุมเวลาควรจะมีรูปแบบ
ที่แตกต่างปุ่ม.
vi) titre HI คือการลดสัดส่วนที่สูงที่สุดของซีรั่มที่ก่อให้เกิดการยับยั้งที่สมบูรณ์ของ 4 HAU ของ
แอนติเจน เกาะติดกันได้รับการประเมินโดยการเอียงแผ่น เฉพาะผู้ที่อยู่ในหลุมซึ่ง
RBCs สตรีมในอัตราเดียวกับการควบคุมหลุม (ที่มี 0.025 มลเม็ดเลือดแดงและ 0.05 มล
พีบีเอสเท่านั้น) ควรได้รับการพิจารณาที่จะแสดงการยับยั้ง.
vii) ความถูกต้องของผลการควรมีการประเมินกับซีรั่มควบคุมเชิงลบซึ่ง ควร
ไม่ให้ titre> 1/4 (> 22 หรือ> log2 2 เมื่อแสดงเป็นซึ่งกันและกัน) และบวก
ในซีรั่มควบคุมที่ titre ควรจะอยู่ในหนึ่งในการลดสัดส่วนการ titre ที่รู้จักกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3.2 . haemagglutination ยับยั้งการทดสอบ
) จ่าย 0.025 ml PBS ในแต่ละดีของ v-bottomed แผ่นพลาสติก microtitre .
2 ) สถานที่ 0.025 ml เซรั่มเป็นแรกของจาน .
3 ) ให้สองเท่าวิธีการ 0.025 ml ปริมาณเซรั่มทั่วแผ่น .
4 ) เพิ่ม 4 นี้ไวรัส / แอนติเจน ใน 0.025 ml กัน ทิ้งไว้อย่างน้อย 30 นาที ที่อุณหภูมิห้อง (
.เกี่ยวกับ 20 ° C ) หรือ 60 นาทีที่ 4 ° C .
V ) 0.025 ml เพิ่ม 1% ( v / v ) ไก่ rbcs กันและผสมเบา ๆ อนุญาตให้ rbcs

ตกลงประมาณ 40 นาที ที่อุณหภูมิห้อง คือประมาณ 20 ° C หรือ 60 นาทีที่ 4 ° C
ถ้าอุณหภูมิของอากาศสูง ซึ่ง rbcs ควบคุมเวลา ควรมีรูปแบบที่

ปุ่มที่แตกต่างกัน6 ) สวัสดี titre เป็นเจือจางสูงสุดของเซรั่มที่ก่อให้เกิดการยับยั้งสมบูรณ์ 4 นี้ของ
แอนติเจน มีการจับกลุ่มจะประเมินโดยจานเอียง . เฉพาะบ่อที่
rbcs กระแสในอัตราเดียวกับบ่อควบคุม ( ที่มี 0.025 ml rbcs และ 0.05 ml
PBS เท่านั้น ) ควรพิจารณาเพื่อแสดงการยับยั้ง .
7 ) ความถูกต้องของผลลัพธ์ที่ควรจะประเมิน กับ เซรั่มควบคุมลบ ซึ่งควร
ไม่ให้ titre > 1 / 4 ( > หรือ > LOG 2 เมื่อแสดงเป็นส่วนกลับ ) และควบคุมบวก
เซรั่มที่ titre ควรจะอยู่ในหนึ่งในที่รู้จักกัน titre เจือจาง .