A generic approach for flavoenzyme

A generic approach for flavoenzyme immobilization was developed in which the flavin cofactor isused for anchoring enzymes onto the carrier. It exploits the tight binding of flavin cofactors to theirtarget apo proteins. The method was tested for phenylacetone monooxygenase (PAMO) which is awell-studied and industrially interesting biocatalyst. Also a fusion protein was tested: PAMO fused tophosphite dehydrogenase (PTDH-PAMO). The employed flavin cofactor derivative, N6-(6-carboxyhexyl)-FAD succinimidylester (FAD*), was covalently anchored to agarose beads and served for apo enzymeimmobilization by their reconstitution into holo enzymes. The thus immobilized enzymes retained theiractivity and remained active after several rounds of catalysis. For both tested enzymes, the generatedagarose beads contained 3 U per g of dry resin. Notably, FAD-immobilized PAMO was found to be morethermostable (40% activity after 1 h at 60◦C) when compared to PAMO in solution (no activity detectedafter 1 h at 60◦C). The FAD-decorated agarose material could be easily recycled allowing multiple roundsof immobilization. This method allows an efficient and selective immobilization of flavoproteins via theFAD flavin cofactor onto a recyclable carrier.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิธีการทั่วไปสำหรับตรึง flavoenzyme ได้รับการพัฒนาที่ isused ทำ flavin สำหรับทอดสมอเอนไซม์ไปยังผู้ให้บริการ มันหาประโยชน์ผูกแน่นของ flavin หลักการ theirtarget อะโปโปรตีน วิธีการทดสอบสำหรับ phenylacetone monooxygenase (PAMO) ซึ่งเป็นศึกษา awell และ biocatalyst น่าสนใจทัด นอกจากนี้ยัง มีทดสอบโปรตีนฟิวชั่น: PAMO ผสมผสาน tophosphite dehydrogenase (PTDH-PAMO) ส่วน flavin ทำอนุพันธ์ N6 แฟชั่น-(6-carboxyhexyl) succinimidylester (แฟชั่น *), ถูกยึดลูกปัด agarose covalently และให้บริการสำหรับ enzymeimmobilization อาโปของสมอเป็นเอนไซม์ holo เอนไซม์ตรึงจึงเก็บ theiractivity และยังคงใช้งานอยู่หลังหลายรอบของปฏิกิริยา สำหรับเอนไซม์ทั้งสองผ่านการทดสอบ ลูกปัด generatedagarose อยู่ 3 U g ของยางแห้ง สะดุดตา พบ PAMO ตรึงแฟชั่นจะ morethermostable (กิจกรรม 40% หลังจาก 1 ชม.ที่ 60◦C) เมื่อเปรียบเทียบกับ PAMO ในการแก้ปัญหา (ไม่มีกิจกรรม detectedafter 1 ชม.ที่ 60◦C) วัสดุตกแต่งแฟชั่น agarose สามารถรีไซเคิลได้อย่างง่ายดายให้ตรึง roundsof หลาย วิธีนี้ช่วยให้มีประสิทธิภาพ และเลือกตรึงของ flavoproteins ผ่าน theFAD flavin ทำลงบนผู้ให้บริการรีไซเคิล

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิธีการทั่วไปสำหรับการตรึง flavoenzyme ได้รับการพัฒนาในการที่ปัจจัย Flavin isused สำหรับทอดสมอเอนไซม์ลงบนสายการบิน ใช้ประโยชน์จากมันแน่นผูกพันของปัจจัยที่จะ Flavin theirtarget โปรตีน APO วิธีการที่ได้รับการทดสอบสำหรับ phenylacetone monooxygenase (PAMO) ซึ่งเป็น awell-ศึกษาและน่าสนใจอุตสาหกรรม biocatalyst นอกจากนี้ยังมีโปรตีนฟิวชั่นได้รับการทดสอบ: PAMO ผสม dehydrogenase tophosphite (PTDH-PAMO) อนุพันธ์ Flavin ลูกจ้างปัจจัย, N6- (6 carboxyhexyl) -FAD succinimidylester (FAD *), ทอดสมอ covalently เพื่อ agarose ลูกปัดและทำหน้าที่สำหรับ enzymeimmobilization APO โดยปฏิสังขรณ์ของพวกเขาเป็นเอนไซม์ Holo เอนไซม์ตรึงจึงเก็บไว้ theiractivity และยังคงใช้งานได้หลังจากหลายรอบของการเร่งปฏิกิริยา สำหรับทั้งเอนไซม์ทดสอบ, ลูกปัด generatedagarose ที่มีอยู่ 3 U ต่อกรัมของเรซินแห้ง ยวด FAD-ตรึง PAMO ถูกพบว่าเป็น morethermostable (กิจกรรม 40% หลังวันที่ 1 ชั่วโมงที่60◦C) เมื่อเปรียบเทียบกับ PAMO ในการแก้ปัญหา (กิจกรรมใด detectedafter 1 ชั่วโมงที่60◦C) วัสดุ agarose FAD ตกแต่งสามารถรีไซเคิลได้ง่ายช่วยให้ตรึง roundsof หลาย วิธีการนี​​้จะช่วยให้มีประสิทธิภาพและการตรึงเลือกของ flavoproteins ผ่าน theFAD Flavin ปัจจัยไปยังผู้ให้บริการสามารถนำไปรีไซเคิล

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วิธีการทั่วไปสำหรับการตรึง flavoenzyme พัฒนาซึ่งใช้เอนไซม์ฟลาวินโคแฟกเตอร์จอดบนเรือบรรทุกเครื่องบิน มันใช้ประโยชน์จากแน่นผูกของปัจจัยเพื่อ theirtarget โปฟลาวินโปรตีน . วิธีทดสอบเฟนิล ซีโตน monooxygenase ( pamo ) ซึ่งเป็นการใช้งานเชิงอุตสาหกรรมที่น่าสนใจศึกษาตัวเร่งปฏิกิริยาชีวภาพ . ยังของโปรตีนคือการทดสอบ : pamo ผสม tophosphite dehydrogenase ( ptdh-pamo ) การใช้ฟลาวิน โคแฟกเตอร์อนุพันธ์ , n6 - ( 6-carboxyhexyl ) - แฟชั่น succinimidylester ( , * ) เป็น covalently ยึด , ลูกปัดและได้รับความ enzymeimmobilization เองเป็นสามมิติ โดยเอนไซม์ ผลการ theiractivity ตรึงเอนไซม์ และยังคงใช้งานอยู่ หลังจากหลายรอบของปฏิกิริยา ทั้งเพื่อทดสอบเอนไซม์ , generatedagarose ลูกปัดที่มีอยู่ 3 u / g ของบริการ เรซิน ยวด , แฟชั่น pamo ตรึงอยู่ morethermostable ร้อยละ 40 กิจกรรมหลังจาก 1 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 60 ◦ C ) เมื่อเทียบกับ pamo ในสารละลาย ( ไม่มีกิจกรรม detectedafter 1 H ที่ 60 ◦ C ) แฟชั่นตกแต่งวัสดุสามารถรีไซเคิลได้ง่าย หรือให้หลาย roundsof ตรึง . วิธีนี้จะช่วยให้ประสิทธิภาพและเลือกการตรึง flavoproteins ผ่าน thefad ฟลาวิน โคแฟกเตอร์ไปยังผู้ให้บริการที่รีไซเคิลได้