2.2. DNA extractionThe single colon

2.2. DNA extraction
The single colonies were inoculated overnight in 10 mL of MYP
broth (37 C). Then, 1 mL of this bacterial culture was centrifuged
for 2 min at 8000  g and washed with 500 mL of sterile distilled
water. The washed bacterial cells were re-suspended in 500 mL
glucose-tris-ethylenediamine tetraacetic acid buffer, followed by
1 h incubation. Then, 25 mL of 10% sodium dodecyl sulfate (w/v) and
25 mL of proteinase K were added to the incubated cells. The
mixture was gently mixed for 1 h and incubated at 65 C for
complete lysis of the cells. After incubation, phenol-chloroformisoamyl
alcohol was added to an equal volume of each mixture
and was gently mixed for 5 min. The samples were centrifuged for
20 min at 12,000  g to create two phases for separation from each
other. The upper phase was transferred to the clean tube and equal
volume of isopropanol and 0.1 volume of sodium acetate (3 M)
were added. The samples were incubated for 20 min at 20 C and
then centrifuged at 12,000  g for 15 min at 4 C. The genomic
precipitated DNA plate was air-dried and dissolved in 50 mL DNasefree
water by adding 5 mL RNase for each sample.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2. DNA สกัดอาณานิคมเดียวถูก inoculated ค้างคืนใน 10 mL ของ MYPซุป (37 C) แล้ว 1 mL ของวัฒนธรรมนี้แบคทีเรียถูก centrifugedสำหรับ 2 นาทีที่ 8000 g และล้าง ด้วย 500 mL ของกอซกลั่นน้ำ เซลล์แบคทีเรียหินถูกเลื่อนออกไปอีกครั้งในขนาด 500 มล.กลูโคสตรี-ethylenediamine tetraacetic บัฟเฟอร์กรด ตามด้วยคณะทันตแพทยศาสตร์ 1 h แล้ว 25 mL ของซัลเฟต dodecyl โซเดียม 10% (w/v) และ25 mL proteinase K ได้เพิ่มเซลล์ incubated ที่ผสมเบา ๆ ผสมสำหรับ 1 h และ incubated ที่ C 65 สำหรับlysis สมบูรณ์ของเซลล์ หลังจากบ่ม วาง chloroformisoamylแอลกอฮอล์ที่เพิ่มปริมาตรการเท่ากันของส่วนผสมแต่ละและถูกผสมเบา ๆ สำหรับ 5 นาที ตัวอย่างถูก centrifuged สำหรับ20 นาทีที่ g 12000 สร้าง 2 ระยะแยกจากอื่น ๆ ขั้นตอนด้านบนมีการโอนย้ายท่อสะอาด และเท่าปริมาตรของ isopropanol และปริมาตร 0.1 ของโซเดียม acetate (3 M)เพิ่ม ตัวอย่างถูก incubated ใน 20 นาทีที่ 20 C และcentrifuged ที่ g 12000 สำหรับ 15 นาทีที่ 4 ค การ genomicแผ่นตกตะกอนดีเอ็นเอ air-dried และละลายใน 50 mL DNasefreeน้ำ โดยเพิ่ม 5 mL RNase สำหรับแต่ละตัวอย่าง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2 สกัดดีเอ็นเออาณานิคมเดียวถูกเชื้อค้างคืนใน 10 มิลลิลิตร MYP น้ำซุป (37 องศาเซลเซียส) จากนั้น 1 มิลลิลิตรของวัฒนธรรมแบคทีเรียนี้ได้รับการหมุนเหวี่ยงสำหรับ2 นาทีที่ 8000? กรัมและล้างด้วย 500 มลกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อน้ำ ล้างเซลล์แบคทีเรียเป็นอีกครั้งที่ลอยอยู่ใน 500 มิลลิลิตรกลูโคสtris-ethylenediamine บัฟเฟอร์กรด tetraacetic ตามด้วย1 บ่มชั่วโมง จากนั้น 25 มิลลิลิตรของโซเดียมโดเดซิลซัลเฟต 10% (w / v) และ25 มลโปร K ถูกเพิ่มเข้าไปในเซลล์บ่ม ส่วนผสมผสมเบา ๆ เป็นเวลา 1 ชั่วโมงและบ่มที่ 65 องศาเซลเซียสสำหรับสลายสมบูรณ์ของเซลล์ หลังจากบ่มฟีนอล chloroformisoamyl เครื่องดื่มแอลกอฮอล์ถูกบันทึกอยู่ในปริมาณที่เท่ากันของส่วนผสมแต่ละและได้รับการผสมเบา ๆ เป็นเวลา 5 นาที กลุ่มตัวอย่างที่ได้รับการหมุนเหวี่ยงสำหรับ20 นาทีที่ 12,000? g เพื่อสร้างสองขั้นตอนสำหรับการแยกจากแต่ละอื่นๆ ขั้นตอนบนถูกย้ายไปที่หลอดที่สะอาดและเท่ากับปริมาณของ isopropanol 0.1 และปริมาณของโซเดียมอะซิเตท (3 M) ถูกเพิ่ม กลุ่มตัวอย่างที่ถูกบ่มเป็นเวลา 20 นาทีที่ 20 องศาเซลเซียสและหมุนเหวี่ยงที่12,000 แล้ว? กรัมเป็นเวลา 15 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส จีโนมแผ่นตกตะกอนดีเอ็นเอถูกอากาศแห้งและเลือนหายไปใน 50 มล DNasefree น้ำโดยการเพิ่ม 5 มิลลิลิตร RNase สำหรับแต่ละตัวอย่าง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2 . การสกัดดีเอ็นเอ
อาณานิคมเดียวปลูกเชื้อชั่วข้ามคืนใน 10 ml ของน้ำซุป myp
( 37  C ) แล้ว 1 มิลลิลิตร เพาะเชื้อนี้อยู่ที่ระดับ
2 นาทีที่ 8 , 000  กรัม และล้างด้วยน้ำกลั่นฆ่าเชื้อ
500 มิลลิลิตร น้ำ การล้างเซลล์แบคทีเรียที่ถูกระงับในอีก 500 มิลลิลิตร ซึ่ง tetraacetic ลลีนไดแอม
กลูโคสกรดบัฟเฟอร์ตาม
1 H การบ่ม จากนั้น25 ml 10% โซเดียมโดเดซิลซัลเฟต ( w / v )
25 มิลลิลิตรโปรตีน K เพิ่มเพื่อแยกเซลล์
ส่วนผสมเบาผสม 1 H และบ่มที่อุณหภูมิ 65 C
 การสลายที่สมบูรณ์ของเซลล์ หลังจากบ่ม , ฟีนอล chloroformisoamyl
แอลกอฮอล์เพิ่มปริมาณเท่ากันของแต่ละส่วนผสมและผสมเบา ๆ
5 นาที จำนวนระดับสำหรับ
20 นาทีที่ 12000  G เพื่อสร้างสองส่วนแยกจากแต่ละ
อื่น ๆ ขั้นตอนด้านบนถูกย้ายไปทำความสะอาดท่อและปริมาณเท่ากันของไอโซโพรพานอล
0.1 และปริมาณของโซเดียมอะซิเตต ( 3 m )
( เพิ่ม ตัวอย่างที่บ่มเป็นเวลา 20 นาทีที่  20  C
แล้วระดับที่ 12 , 000  G สำหรับ 15 นาทีที่ 4  C
ตกตะกอนดีเอ็นเอจีโนมจานอากาศแห้งและยุบใน dnasefree
50 มิลลิลิตรน้ำ โดยการเพิ่ม 5 ml เลสสำหรับแต่ละตัวอย่าง