2.2.1. Microbiological analysisFroz

2.2.1. Microbiological analysis

Frozen samples were thawed over night at 4 °C in refrigerator before analysis. The thawed shrimp muscles without shells were cut to very small pieces using sterile knife and forceps; then, 10 g was homogenized using 90 ml sterile physiological saline (0.85%) solution, and serial decimal dilutions of each homogenate were prepared using the same dilutent for the respective microbiological analysis (Downes and Ito, 2001). Appropriate dilutions (101–109) were used for enumeration using standard microbiological pour plate technique and recommended culture media of Oxoid (2002). Plate count agar medium was used for enumerating the Total Viable Count (TVC) after incubating at 35–37 °C for 48 h. Violet red bile agar with methyl umbelliferyl glucuronide (VRB-MUG) selective media was used to isolate coliform, gram negative enteric bacteria and rapid detection of E. coli. The prepared dilution of frozen shrimp homogenate was inoculated in sterile petri dishes; then, medium was poured and plates were incubated at 37 °C for 18–24 h. Colonies of lactose negative Enterobacteriaceae are colourless and those of lactose positive are red and often surround by a forbid zone due to precipitation of bile acids; meanwhile, light blue fluorescent colonies under UV-Lamp (336 nm) are denoted as E. coli.

The recommended Difco Baird Parker agar medium by ICMSF (1978) was used to detect coagulase active Staphylococcus aureus after incubating the plates at 35–37 °C for 48 h. The black shiny colonies with narrow white margin and surrounded by clear zones were counted as Staphylococcus aureus.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2.1. จุลชีววิทยาตัวอย่างแช่แข็งถูกขับข้ามคืนที่อุณหภูมิ 4 ° C ในตู้เย็นก่อนวิเคราะห์ กล้ามเนื้อกุ้งเตรียมกระสุนโดยไม่ถูกตัดให้ชิ้นเล็กมากใช้มีดฆ่าเชื้อและคีม , 10 กรัมถูก homogenized ใช้โซลูชัน 90 มล.ผ่านการฆ่าเชื้อ physiological น้ำเกลือ (0.85%) แล้วเจือจาง serial ทศนิยมของแต่ละ homogenate วจัดใช้ dilutent เดียวกันสำหรับวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาเกี่ยวข้อง (Downes และอิโตะ 2001) เจือจางที่เหมาะสม (101 – 109) ถูกใช้สำหรับการแจงนับโดยใช้แผ่นเทจุลินทรีย์มาตรฐานเทคนิค และแนะนำสื่อวัฒนธรรมของ Oxoid (2002) จานจำนวนวุ้นปานกลางถูกใช้สำหรับการแจงนับจำนวนทั้งหมดทำงานได้ (TVC) หลังจากที่ incubating 35-37 ° c สำหรับ 48 h. น้ำดีสีแดงม่วงวุ้นกับ methyl umbelliferyl glucuronide (VRB แก้ว) selective media ใช้แยกโคลิฟอร์ม กรัมลบแบคทีเรียลำไส้ และการตรวจสอบอย่างรวดเร็วของ E. coli เจือจางเตรียมของกุ้งแช่แข็ง homogenate เป็น inoculated ในจานเพาะที่ผ่านการฆ่าเชื้อ กลางคือเทแล้ว และแผ่นได้รับการกกที่ 37 ° C เป็นเวลา 18 – 24 h. อาณานิคมของแล็กโทส Enterobacteriaceae ลบสีใส และของแล็กโทสบวกเป็นสีแดง และมักล้อมรอบ โดยเขต forbid เนื่องจากฝนกรดน้ำดี ในขณะเดียวกัน แสงสีน้ำเงินเรืองแสงอาณานิคมภายใต้หลอดไฟยูวี (336 nm) denoted เป็น E. coliกลางวุ้น Difco ปาร์กเกอร์จัดอันดับแนะนำ โดย ICMSF (1978) ถูกใช้เพื่อตรวจหา coagulase active Staphylococcus หมอเทศข้างลายหลัง incubating แผ่น 35-37 ° c สำหรับ 48 ชั่วโมง สีขาวขอบโคโลนีสีดำเงากับแคบ และล้อมรอบ ด้วยล้างโซนนับเป็น Staphylococcus หมอเทศข้างลาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2.1 การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา

ตัวอย่างแช่แข็งมาละลายไปคืนที่ 4 ° C ในตู้เย็นก่อนที่จะวิเคราะห์ กล้ามเนื้อกุ้งหอยละลายโดยไม่ต้องถูกตัดเป็นชิ้นขนาดเล็กมากใช้มีดฆ่าเชื้อและคีม; แล้ว 10 กรัมทำให้เป็นเนื้อเดียวกันโดยใช้ 90 มล. ผ่านการฆ่าเชื้อน้ำเกลือทางสรีรวิทยา (0.85%) วิธีการแก้ปัญหาและเจือจางทศนิยมอนุกรมของแต่ละ homogenate ได้จัดทำขึ้นโดยใช้ dilutent เดียวกันสำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาที่เกี่ยวข้อง (Downes และ Ito, 2001) เจือจางที่เหมาะสม (101-109) ถูกนำมาใช้สำหรับการแจงนับจุลชีววิทยาโดยใช้มาตรฐานเทเทคนิคแผ่นและสื่อวัฒนธรรมที่แนะนำของ Oxoid (2002) จานกลางนับวุ้นที่ใช้สำหรับการแจงนับจุลินทรีย์ทั้งหมด (TVC) หลังจากที่ในระยะฟักตัว 35-37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง สีม่วงวุ้นน้ำดีสีแดงที่มีเมธิล umbelliferyl glucuronide (VRB-MUG) สื่อเลือกถูกใช้ในการแยกโคลิฟอร์มแบคทีเรียแกรมลบและลำไส้ตรวจสอบอย่างรวดเร็วของเชื้อ E. coli เจือจางเตรียมของ homogenate กุ้งแช่แข็งได้รับเชื้อในอาหารเลี้ยงเชื้อหมัน; แล้วกลางถูกเทและแผ่นถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 18-24 ชั่วโมง อาณานิคมของแลคโตสในเชิงลบ Enterobacteriaceae มีสีและของแลคโตสในเชิงบวกจะเป็นสีแดงและมักจะล้อมรอบไปด้วยเขตห้ามเนื่องจากการตกตะกอนของกรดน้ำดี; ขณะที่ไฟเรืองแสงสีฟ้าอาณานิคมภายใต้หลอด UV (336 นาโนเมตร) จะแสดงเป็นเชื้อ E. coli.

แนะนำสื่อวุ้น Difco บาร์ดปาร์กเกอร์โดย ICMSF (1978) ถูกนำมาใช้ในการตรวจสอบการใช้งาน coagulase Staphylococcus aureus หลังจากบ่มแผ่นที่ 35-37 ° C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง สีดำเงาอาณานิคมกับขอบสีขาวแคบและล้อมรอบด้วยโซนที่ชัดเจนถูกนับเป็น Staphylococcus aureus

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2.1 . การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาแช่แข็งจำนวนละลายผ่านคืนที่ 4 ° C ในตู้เย็นก่อนการวิเคราะห์ ละลายกล้ามเนื้อโดยไม่มีกุ้งเปลือกหั่นเป็นชิ้นเล็กๆ ใช้มีด เป็นหมัน และคีม แล้ว 10 กรัมบดใช้ 90 ml เกลือฆ่าเชื้อทางสรีรวิทยา ( 0.85 % ) และวิธีการแก้ปัญหาแบบทศนิยมแต่ละแยกเตรียมใช้ dilutent เดียวกันสำหรับการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาที่เกี่ยวข้อง ( Downes และ อิโตะ , 2001 ) วิธีการที่เหมาะสม ( 101 - 109 ) ใช้สำหรับการใช้มาตรฐานทางเทคนิคและเทแผ่นแนะนำวัฒนธรรมสื่อ oxoid ( 2002 ) นับจานอาหารวุ้นใช้ enumerating นับได้รวม ( TVC ) หลังจากการแช่ที่ 35 และ 37 ° C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง ม่วงแดงน้ำดีวุ้นกับเมทิล umbelliferyl glucuronide ( vrb-mug ) สื่อที่เลือกใช้เชื้อโคลิฟอร์มแบคทีเรียแกรมลบ , ต่อ และการตรวจหาเชื้อ E . coli อย่างรวดเร็ว เตรียมการเจือจางของกุ้งแช่แข็งแยกเป็นเชื้อในจาน Petri เป็นหมัน แล้วกลางถูกเทและแผ่นถูกบ่มที่ 37 ° C 18 – 24 ชั่วโมง อาณานิคมของแลคโตสลบผิดเพี้ยนเป็นไม่มีสีและแลคโตสนั้นบวกสีแดง และมักจะล้อมรอบโดยห้ามโซน เนื่องจากการตกตะกอนของกรดน้ำดี ขณะ สีฟ้าอ่อน โคมไฟเรืองแสงภายใต้ยูวีอาณานิคม ( 336 nm ) กล่าวคือ เป็น E . coliแนะนำ difco แบร์ดปาร์คเกอร์อาหารวุ้น โดย icmsf ( 1978 ) คือใช้ในการตรวจหาเชื้อ Staphylococcus aureus เพาะลูกเมียอยู่หลังจานที่ 35 และ 37 ° C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง สีดำเงาพร้อมขอบสีขาวแคบอาณานิคมและล้อมรอบด้วยเขตชัดเจนถูกนับเป็นเชื้อ Staphylococcus aureus .