Purification and characterization o

Purification and characterization of Mn-peroxidase from Musa paradisiaca (banana) stem juice
Mn-peroxidase (MnP), a biotechnologically important enzyme was purified for the first time from a plant source Musa paradisiaca (banana) stem, which is an agro-waste easily available after harvest of banana fruits. MnP was earlier purified only from the fungal sources. The enzyme was purified from stem juice by ultrafiltration and anion-exchange column chromatography on diethylamino ethylcellulose with 8-fold purification and purification yield of 65%. The enzyme gave a single protein band in SDS-PAGE corresponding to molecular mass 43 kDa. The Native-PAGE of the enzyme also gave a single protein band, confirming the purity of the enzyme. The UV/VIS spectrum of the purified enzyme differed from the other heme peroxidases, as the Soret band was shifted towards lower wavelength and the enzyme had an intense absorption band around 250 nm. The K(m) values using MnSO4 and H2O2 as the substrates of the purified enzyme were 21.0 and 9.5 microM, respectively. The calculated k(cat) value of the purified enzyme using Mn(II) as the substrate in 50 mM lactate buffer (pH 4.5) at 25 degrees C was 6.7s(-1), giving a k(cat)/K(m) value of 0.32 microM(-1)s(-1). The k(cat) value for the MnP-catalyzed reaction was found to be dependent of the Mn(III) chelator molecules malonate, lactate and oxalate, indicating that the enzyme oxidized chelated Mn(II) to Mn(III). The pH and temperature optima of the enzyme were 4.5 and 25 degrees C, respectively. The enzyme in combination with H2O2 liberated bromine and iodine in presence of KBr and KI respectively. All these enzymatic characteristics were similar to those of fungal MnP. The enzyme has the potential as a green brominating and iodinating agent in combination with KBr/KI and H2O2.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทำให้บริสุทธิ์และคุณสมบัติของ Mn peroxidase จาก Musa paradisiaca (กล้วย) เกิดน้ำMn-peroxidase (MnP), a biotechnologically important enzyme was purified for the first time from a plant source Musa paradisiaca (banana) stem, which is an agro-waste easily available after harvest of banana fruits. MnP was earlier purified only from the fungal sources. The enzyme was purified from stem juice by ultrafiltration and anion-exchange column chromatography on diethylamino ethylcellulose with 8-fold purification and purification yield of 65%. The enzyme gave a single protein band in SDS-PAGE corresponding to molecular mass 43 kDa. The Native-PAGE of the enzyme also gave a single protein band, confirming the purity of the enzyme. The UV/VIS spectrum of the purified enzyme differed from the other heme peroxidases, as the Soret band was shifted towards lower wavelength and the enzyme had an intense absorption band around 250 nm. The K(m) values using MnSO4 and H2O2 as the substrates of the purified enzyme were 21.0 and 9.5 microM, respectively. The calculated k(cat) value of the purified enzyme using Mn(II) as the substrate in 50 mM lactate buffer (pH 4.5) at 25 degrees C was 6.7s(-1), giving a k(cat)/K(m) value of 0.32 microM(-1)s(-1). The k(cat) value for the MnP-catalyzed reaction was found to be dependent of the Mn(III) chelator molecules malonate, lactate and oxalate, indicating that the enzyme oxidized chelated Mn(II) to Mn(III). The pH and temperature optima of the enzyme were 4.5 and 25 degrees C, respectively. The enzyme in combination with H2O2 liberated bromine and iodine in presence of KBr and KI respectively. All these enzymatic characteristics were similar to those of fungal MnP. The enzyme has the potential as a green brominating and iodinating agent in combination with KBr/KI and H2O2.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การทำให้บริสุทธิ์และลักษณะของ Mn-peroxidase จากมูซา paradisiaca (กล้วย) ต้นกำเนิดน้ำ
Mn-peroxidase (MNP) เป็นเอนไซม์ที่สำคัญเทคโนโลยีชีวภาพบริสุทธิ์เป็นครั้งแรกจากแหล่งพืชมูซา paradisiaca (กล้วย) ต้นกำเนิดซึ่งเป็นเกษตรของเสียได้อย่างง่ายดาย หลังจากที่มีการเก็บเกี่ยวของผลไม้กล้วย MNP บริสุทธิ์ก่อนหน้านี้เพียงจากแหล่งเชื้อรา เอนไซม์บริสุทธิ์จากต้นกำเนิดจากน้ำกรองและคอลัมน์แลกเปลี่ยนไอออนในเพลเลต diethylamino กับการทำให้บริสุทธิ์ 8 เท่าและผลผลิตบริสุทธิ์ 65% ให้เอนไซม์โปรตีนวงเดียวใน SDS-PAGE สอดคล้องกับมวลโมเลกุล 43 กิโลดาลตัน พื้นเมือง-PAGE ของเอนไซม์ยังให้โปรตีนวงเดียวที่ยืนยันความบริสุทธิ์ของเอนไซม์ UV / VIS สเปกตรัมของเอนไซม์แตกต่างไปจาก peroxidases heme อื่น ๆ เช่นวง Soret ถูกขยับไปความยาวคลื่นที่ต่ำกว่าและเอนไซม์ที่มีการดูดซึมที่รุนแรงวงประมาณ 250 นาโนเมตร K (เมตร) ค่าใช้ MnSO4 และ H2O2 เป็นสารตั้งต้นของเอนไซม์เป็น 21.0 และ 9.5 ไมโครโมลตามลำดับ คำนวณ k (แมว) ค่าของเอนไซม์ที่ใช้ Mn (II) เป็นสารตั้งต้นใน 50 มิลลิแลคเตทบัฟเฟอร์ (pH 4.5) ที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็น 6.7s (-1) ให้อลาสกา (แมว) / K (m) ค่าของ 0.32 ไมโครโมล (-1) s (-1) k (แมว) ค่าสำหรับปฏิกิริยา MNP เร่งปฏิกิริยาพบว่าขึ้นอยู่กับ Mn (III) โมเลกุลธาตุ malonate นมและออกซาเลตแสดงให้เห็นว่าเอนไซม์ออกซิไดซ์คี Mn (II) เพื่อ Mn (III) พีเอชและอุณหภูมิ Optima ของเอนไซม์เป็น 4.5 และ 25 องศาเซลเซียสตามลำดับ เอนไซม์ร่วมกับ H2O2 ไทโบรมีนและไอโอดีนในการปรากฏตัวของ KBr และ KI ตามลำดับ ลักษณะเหล่านี้ทั้งหมดเอนไซม์มีความคล้ายคลึงกับของเชื้อรา MNP เอนไซม์ที่มีศักยภาพเป็น brominating สีเขียวและตัวแทน iodinating ร่วมกับ KBr / KI และ H2O2

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การทำให้บริสุทธิ์และคุณสมบัติของเอนไซม์แมงกานีสจากมูซา paradisiaca ( กล้วย ) น้ำคั้นลำต้น
แมงกานีสเปอร์ออกซิเดส ( MNP ) ซึ่งเป็นเอนไซม์ที่สำคัญ biotechnologically บริสุทธิ์เป็นครั้งแรกจากแหล่งผลิตกล้วย ( กล้วย ) paradisiaca ก้านซึ่งเป็นเกษตรของเสียได้อย่างง่ายดายสามารถใช้ได้หลังเก็บเกี่ยวของผลไม้กล้วย mnp คือก่อนหน้านี้บริสุทธิ์จากแหล่งเชื้อราเท่านั้นเอนไซม์บริสุทธิ์จากน้ำคั้นลำต้นและการแลกเปลี่ยนไอออนโดยผสมคอลัมน์โครมาโทกราฟีบน diethylamino เอธิลเซลลูโลสกับ 8-fold บริสุทธิ์และบริสุทธิ์ผลผลิต 65% เอนไซม์เอนไซม์โปรตีนให้วงเดียวในที่ 43 ) มวลของโมเลกุล หน้าดั้งเดิมของเอนไซม์ยังให้แถบโปรตีนเดี่ยว ยืนยันความบริสุทธิ์ของเอนไซม์UV / VIS สเปกตรัมของเอนไซม์อื่นๆ มีความแตกต่างจาก เพอร์ กซิเดสฮีม เป็น soret วงดนตรีมีการเลื่อนไปสู่ความยาวคลื่นลดลงและเอนไซม์มีระเบิดขวดเข้มข้น 250 นาโนเมตร K ( m ) และค่าใช้ mnso4 H2O2 ตามพื้นผิวของเอนไซม์เท่ากับ 21.0 และ 9.5 microm ตามลำดับคำนวณค่า K ( แมว ) ของเอนไซม์โดยใช้แมงกานีส ( II ) เป็นสารอาหารในบัฟเฟอร์และ 50 มม. ( pH ) ที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียส 6.7s ( - 1 ) , ให้ K ( แมว ) / K ( m ) เท่ากับ 0.32 microm ( - 1 ) s ( - 1 ) K ( แมว ) ค่าติดตั้งปฏิกิริยาเคมีที่พบจะขึ้นอยู่กับของแมงกานีส ( III ) และแอลบูมิโมเลกุลมาโลเนท , lactate ออกซาเลต แสดงว่าเอนไซม์ออกซิไดซ์ Mn ( II ) แมงกานีส คีเลท ( 3 )pH และอุณหภูมิของเอนไซม์เป็น 4.5 Optima และ 25 องศาเซลเซียส ตามลำดับ เอนไซม์ในการสลายปลดปล่อยโบรมีน และไอโอดีนในการแสดงตนของ KBS และคิ ตามลำดับ โดยทั้งหมดนี้มีลักษณะคล้ายกับบรรดาของเชื้อรา MNP . เอนไซม์มีศักยภาพเป็นสีเขียวและ brominating iodinating ตัวแทนในการรวมกันกับ KBS / กิและ H2O2