2.5. Expression and purification of

2.5. Expression and purification of the recombinant crustin(rCrustin)
The expression and purification of rCrustin from shrimp source were carried out as per Maiti et al. (2010). The PCR-positive clones were grown overnight in LB broth containing ampicillin (100 g ml−1) and kanamycin (25 g ml−1) and over-expressed using 1 mm of isopropyl -d-1-thiogalactopyranoside (IPTG).Sodium dodecyl sulphate polyacrymamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) was performed (Laemmli, 1970) and the recombinant molecule purified by Ni-NTA affinity chromatography. The purity of the peptide was checked and the concentration determined by Lowry’s method (Lowry et al., 1951).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5. นิพจน์และฟอก recombinant crustin(rCrustin)นิพจน์และฟอก rCrustin จากแหล่งกุ้งได้ดำเนินการตาม Maiti et al. (2010) โคลนที่ PCR เป็นบวกถูกปลูกข้ามคืนในซุป LB ที่ประกอบด้วยแอมพิซิลลิน (ml−1 100 กรัม) และกานามัยซิน (ml−1 25 กรัม) และมากกว่าแสดงใช้ isopropyl -d-1-thiogalactopyranoside (IPTG) 1 มม. ทำ dodecyl โซเดียมซัลเฟต polyacrymamide เจอิ (SDS-หน้า) (Laemmli, 1970) และโมเลกุล recombinant ที่บริสุทธิ์ โดย Ni มูลค่าความสัมพันธ์ chromatography ความบริสุทธิ์ของเพปไทด์ถูกตรวจสอบ และกำหนดความเข้มข้น โดยวิธีของของประเทศ (ของประเทศ et al. 1951)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 การแสดงออกและการทำให้บริสุทธิ์ของ crustin recombinant (rCrustin)
การแสดงออกและการทำให้บริสุทธิ์ของ rCrustin จากแหล่งเลี้ยงกุ้งได้ดำเนินการตาม Maiti et al, (2010) โคลน PCR-บวกปลูกค้างคืนในน้ำซุปที่มี LB ampicillin (100 กรัม ML-1) และกานามัยซิ (25? G ML-1) และมากกว่าใช้แสดง 1 มิลลิเมตร isopropyl? -d-1-thiogalactopyranoside (IPTG) .Sodium โดเดซิลซัลเฟต polyacrymamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) ได้ดำเนินการ (Laemmli, 1970) และโมเลกุล recombinant บริสุทธิ์โดย Ni-NTA ความสัมพันธ์ Chromatography ความบริสุทธิ์ของเปปไทด์ถูกตรวจสอบและความเข้มข้นที่กำหนดโดยวิธีการของโลว์รีย์ (Lowry et al., 1951)