The OxiTop®-C static respirometry m

The OxiTop®-C static respirometry measurement system was used to study the effect of temperature on crude oil (Tyrihans; light, paraffinic crude oil, density of 0.825 g cm−3) biodegradation in seawater. To assess the effect of temperature on acclimated and enriched microbial communities, test flasks were spiked with additional substrate in the most active degradation phase. The measuring principle and application of the OxiTop®-C system has been previously described (Kuokkanen et al., 2004). Seawater samples were collected from Byfjorden (North: 58° 57′ 48″ East: 5° 43′ 8″, Randaberg, Norway, 80 m depth) without filtration (March, 2012, water temperature: 7.7 °C). Prior to distribution into test flasks (500 mL), seawater samples were aerated for 5 min with sterile-filtered air. Flasks were then filled with seawater (375 mL) and inorganic nutrients, vitamins and amino acids were added to ensure non-nutrient-limiting conditions, as described by Bagi et al. (2013). Briefly, inorganic nutrients (16.2 mg L−1 K2HPO4, 0.8 mg L−1 KH2PO4, 42.0 mg L−1 NaNO3, 0.05 mg L−1 FeCl3, 2.5 mg L−1 CaCl2 and 1.5 mg L−1 MgSO4), trace minerals, amino acids (10 μL L−1 RPMI 1640 amino acids solution 50×, Sigma) and vitamins (10 μl L−1 of a stock solution with 20 mg L−1 myoinositol, 0.1 mg L−1 thiamine-hydrochloride, 0.1 mg L−1 pyridoxine-hydrochloride, 1.0 mg L−1 nicotinic acid, 0.5 mg L−1 glycine, 0.01 mg L−1 biotin and 0.1 mg L−1 folic acid) were added to each flask, including blank and negative control. Incubation temperatures were 0.5, 5, 10, and 15 °C. Nine flasks were prepared for each incubation temperature: 5 with crude oil (100 mg L−1), 2 with sodium-benzoate (30 mg L−1) (positive control), 1 without additional carbon (blank) and 1 with oil (100 mg L−1) and sodium-azide (1 g L−1) to diminish bacterial activity (negative control). Finally, a carbon-dioxide trap was fixed in each flask. Bottles were then capped with OxiTop®-C heads and placed in temperature controlled incubator cabinets (first exposure). Magnetic stirring ensured mixing. In order to avoid oxygen depletion of the system prior to spiking, test flasks were opened and spiked with crude oil (second exposure) as soon as oxygen consumption reached approximately 50% of the measuring limit of the closed system (89 mg O2 L−1), i.e. approx. 45 mg O2 L−1 (on day 8, 12, 28 at 15, 10 and 5 °C, respectively). Seawater incubated at 0.5 °C has been spiked when oxygen consumption reached 15 mg O2 L−1 (day 43) due to time constrains. At the same time positive controls were spiked with sodium-benzoate (Na-benzoate). The same concentrations of each substrate were added as during the first exposure. Oxygen consumption curves were used to determine lag times (tlag) and maximum oxygen consumption rate (rmax). The most active phase of degradation was selected to determine rmax values. A linear trend line was fitted and the slope was defined as rmax both for sodium-benzoate and crude oil. Lag times were defined as the time where oxygen consumption began to increase exponentially. This was determined by log-transforming the original curves and searching for the start of the linear part of this transformed curve. Q10 values were determined from the ratios of rmax and tlag at ten degrees temperature difference according to the traditional approach described in Equation (2).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ใช้ระบบ OxiTop ® C respirometry คงประเมินเพื่อศึกษาผลของอุณหภูมิในน้ำมันดิบ (Tyrihans แสง paraffinic น้ำมันดิบ ความหนาแน่น cm−3 0.825 g) biodegradation ในทะเล เพื่อประเมินผลของอุณหภูมิ acclimated และอุดมชุมชนจุลินทรีย์ น้ำทดสอบได้จัด spiked มีพื้นผิวเพิ่มเติมในขั้นตอนการย่อยสลายอยู่มากที่สุด หลักการและประยุกต์ใช้ระบบ OxiTop ® C วัดได้ถูกอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Kuokkanen et al., 2004) ตัวอย่างน้ำทะเลถูกรวบรวมจาก Byfjorden (เหนือ: 48″ 57′ 58° ตะวันออก: 5 43′ 8″, Randaberg นอร์เวย์ ความลึก 80 เมตร) โดยไม่มีการกรอง (มีนาคม 2012 อุณหภูมิของน้ำ: 7.7 ° C) ก่อนกระจายเข้าทดสอบน้ำ (500 มล.), ตัวอย่างน้ำทะเลมีอากาศสำหรับ 5 นาทีกับกระบอกกรองอากาศ น้ำนั้นเต็มไป ด้วยทะเล (375 มล.) และอนินทรีย์สารอาหาร วิตามิน และกรดอะมิโนเพิ่มให้เงื่อนไขไม่สารอาหารจำกัด ตามที่อธิบายไว้โดย Bagi et al. (2013) สั้น ๆ สารอาหารอนินทรีย์ (16.2 มิลลิกรัม L−1 K2HPO4, 0.8 มิลลิกรัม L−1 KH2PO4, 42.0 มิลลิกรัม L−1 NaNO3, 0.05 มิลลิกรัม L−1 FeCl3, 2.5 mg L−1 CaCl2 และ 1.5 มิลลิกรัม L−1 MgSO4), ติดตามแร่ธาตุ กรดอะมิโน (10 μL L−1 RPMI 1640 กรดอะมิโนโซลูชั่น 50 × ซิก) และวิตามิน (10 μl L−1 ของโซลูชันหุ้น 20 มิลลิกรัม L−1 myoinositol, L−1 0.1 มิลลิกรัมไทอามีนไฮโดรคลอไรด์ 0.1 มิลลิกรัม L−1 ไพริดอกซีนไฮโดรคลอไรด์กรด nicotinic 1.0 มิลลิกรัม L−1, glycine 0.5 mg L−1, 0.01 มิลลิกรัม L−1 ไบโอติน และกรดโฟลิค 0.1 มิลลิกรัม L−1) จะหนาวแต่ละ รวมถึงการว่าง และลบ อุณหภูมิบ่มได้ 0.5, 5, 10 และ 15 องศาเซลเซียส นำเก้าถูกเตรียมไว้สำหรับแต่ละอุณหภูมิบ่ม: 5 กับน้ำมันดิบ (100 mg L−1), 2 กับโซเดียม-benzoate (30 มิลลิกรัม L−1) (บวกควบคุม), 1 ไม่ มีคาร์บอนเพิ่มเติม (ว่างเปล่า) และ 1 กับน้ำมัน (100 mg L−1) และโซเดียม-azide (1 g L−1) เพื่อลดกิจกรรมของแบคทีเรีย (ลบควบคุม) ในที่สุด กับดักคาร์บอนไดออกไซด์ถูกถาวรในหนาวละ ขวดได้ แล้วปรบมือ ด้วย OxiTop ® C หัว และวางไว้ในตู้ควบคุมอุณหภูมิ incubator (แสงแรก) แม่เหล็กกวนมั่นใจผสม เพื่อหลีกเลี่ยงการลดลงของออกซิเจนของระบบก่อน spiking ทดสอบน้ำถูกเปิด และ spiked กับดิบน้ำมัน (สองแสง) เป็นปริมาณการใช้ออกซิเจนถึงประมาณ 50% ของวงเงินวัดปิดระบบ (89 มิลลิกรัม O2 L−1), เช่นประมาณ 45 มิลลิกรัม O2 L−1 (ในวันที่ 8, 12, 28 ที่ 15, 10 และ 5 ° C ตามลำดับ) มีการ spiked ทะเล incubated ที่ 0.5 ° C เมื่อปริมาณการใช้ออกซิเจนถึง 15 มิลลิกรัม O2 L−1 (วัน 43) เนื่องจากเวลาจำกัด ในเวลาเดียวกัน บวกควบคุมมี spiked กับโซเดียม-benzoate (นา-benzoate) มีเพิ่มความเข้มข้นเดียวกันของแต่ละพื้นผิวตามช่วงแสงแรก ปริมาณออกซิเจนที่ใช้เส้นโค้งในการกำหนดช่วงห่างเวลา (tlag) และอัตราการใช้ออกซิเจนสูงสุด (rmax) ระยะใช้งานมากที่สุดของการลดประสิทธิภาพที่เลือกกำหนดค่า rmax เส้นแนวโน้มเชิงเส้นถูกติดตั้ง และความชันถูกกำหนดเป็น rmax ทั้งโซเดียม benzoate และน้ำมันดิบ เวลาความล่าช้าที่กำหนดเป็นเวลาที่เพิ่มเป็นทวีคูณเมื่อเริ่มการใช้ออกซิเจน นี้ถูกกำหนด โดยล็อกเปลี่ยนเส้นโค้งเดิม และค้นหาจุดเริ่มต้นของส่วนของเส้นโค้งนี้แปรรูปเชิงเส้น ค่า Q10 ถูกกำหนดจากอัตรา rmax และ tlag ที่ความแตกต่างของอุณหภูมิ 10 องศาตามวิธีโบราณที่อธิบายไว้ในสมการ (2)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

OxiTop®-C คงที่ระบบการวัด respirometry ถูกใช้ในการศึกษาผลของอุณหภูมิที่มีน้ำมันดิบ (Tyrihans; แสงน้ำมันดิบพาราความหนาแน่นของ 0.825 กรัมเซนติเมตร 3) การย่อยสลายในน้ำทะเล เพื่อประเมินผลกระทบของอุณหภูมิที่มีต่อการปรับตัวและการผสานชุมชนจุลินทรีย์ขวดทดสอบที่ผสมกับสารตั้งต้นเพิ่มเติมในขั้นตอนการย่อยสลายใช้งานมากที่สุด หลักการวัดและการประยุกต์ใช้ระบบOxiTop®-C ได้รับการอธิบายไว้ก่อนหน้า (Kuokkanen et al., 2004) ตัวอย่างน้ำทะเลที่ถูกเก็บรวบรวมจาก Byfjorden (ภาคเหนือ: 58 ° 57 '48 "ตะวันออก: 5 ° 43' 8", Randaberg, นอร์เวย์, 80 เมตรความลึก) โดยการกรอง (มีนาคม, 2012, อุณหภูมิของน้ำ: 7.7 ° C) ก่อนที่จะกระจายลงไปในขวดทดสอบ (500 มิลลิลิตร) ตัวอย่างน้ำทะเลถูกมวลเบาเป็นเวลา 5 นาทีกับอากาศหมันกรอง ขวดที่เต็มไปแล้วด้วยน้ำทะเล (375 มิลลิลิตร) และสารอาหารนินทรีย์, วิตามินและกรดอะมิโนที่ถูกเพิ่มเพื่อให้แน่ใจว่าไม่ใช่สารอาหาร จำกัด เงื่อนไขตามที่อธิบาย Bagi และคณะ (2013) สั้น ๆ สารอาหารนินทรีย์ (16.2 มก. L-1 K2HPO4 0.8 มิลลิกรัม L-1 KH2PO4 42.0 มิลลิกรัม L-1 Na​​NO3, 0.05 มิลลิกรัม L-1 FeCl3 2.5 มิลลิกรัม L-1 CaCl2 และ 1.5 มก. L-1 MgSO4), แร่ธาตุ กรดอะมิโน (10 ไมโครลิตร L-1 RPMI 1640 อะมิโนกรดแก้ปัญหา 50 ×ซิก) และวิตามิน (10 ไมโครลิตร L-1 ของการแก้ปัญหาสต็อกที่มี 20 มิลลิกรัม L-1 myoinositol 0.1 มิลลิกรัม L-1 วิตามินบี-ไฮโดรคลอไร 0.1 มิลลิกรัม L-1 ไพริดอกซิ-ไฮโดรคลอไร 1.0 มิลลิกรัม L-1 กรด nicotinic, 0.5 มิลลิกรัม L-1 Glycine, 0.01 มิลลิกรัม L-1 และไบโอติน 0.1 มิลลิกรัม L-1 กรดโฟลิค) ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละขวดรวมถึงการควบคุมที่ว่างเปล่าและเชิงลบ อุณหภูมิบ่มเพาะเป็น 0.5, 5, 10 และ 15 องศาเซลเซียส เก้าขวดถูกเตรียมไว้สำหรับอุณหภูมิบ่มแต่ละ: 5 น้ำมันดิบ (100 มก. L-1), 2 กับโซเดียมเบนโซเอ-(30 มก. L-1) (การควบคุมบวก), 1 โดยไม่ต้องเพิ่มเติมคาร์บอน (ว่าง) และ 1 น้ำมัน ( 100 mg L-1) และโซเดียม azide (1 กรัม L-1) ที่จะลดกิจกรรมของแบคทีเรีย (ควบคุมเชิงลบ) สุดท้ายดักจับคาร์บอนไดออกไซด์ได้รับการแก้ไขในแต่ละขวด ขวดที่ถูกปกคลุมไปด้วยหัวOxiTop®-C และวางไว้ในการควบคุมอุณหภูมิตู้ฟักไข่ (สัมผัสแรก) กวนแม่เหล็กมั่นใจผสม เพื่อหลีกเลี่ยงการสูญเสียออกซิเจนของระบบก่อนที่จะมีองศาขวดทดสอบถูกเปิดและถูกแทงด้วยน้ำมันดิบแสง (วินาที) เร็วที่สุดเท่าที่ใช้ออกซิเจนถึงประมาณ 50% ของวงเงินการวัดของระบบปิด (89 มิลลิกรัม O2 L-1 ) คือประมาณ 45 มก O2 L-1 (ในวันที่ 8, 12, 28, 15, 10 และ 5 องศาเซลเซียสตามลำดับ) น้ำทะเลบ่มที่อุณหภูมิ 0.5 องศาเซลเซียสได้รับการถูกแทงเมื่อใช้ออกซิเจนถึง 15 มิลลิกรัม O2 L-1 (วันที่ 43) เนื่องจากเวลา constrains ในขณะเดียวกันการควบคุมเชิงบวกที่ผสมกับโซเดียมเบนโซเอ-(นาเบนโซเอต) ความเข้มข้นเดียวกันของแต่ละพื้นผิวที่ถูกเพิ่มเข้าในระหว่างการเปิดรับครั้งแรก เส้นโค้งการใช้ออกซิเจนที่ถูกใช้ในการกำหนดเวลาที่ล่าช้า (tlag) และอัตราการใช้ออกซิเจนสูงสุด (Rmax) ขั้นตอนการใช้งานมากที่สุดของการย่อยสลายได้รับเลือกในการกำหนดค่า Rmax เส้นแนวโน้มเชิงเส้นก็พอดีและความลาดชันได้รับการกำหนดให้เป็น Rmax ทั้งโซเดียมเบนโซเอตและน้ำมันดิบ ครั้ง Lag ถูกกำหนดให้เป็นเวลาที่ใช้ออกซิเจนเริ่มที่จะเพิ่มขึ้นชี้แจง นี้ถูกกำหนดโดยการเข้าสู่ระบบเปลี่ยนเส้นโค้งเดิมและการค้นหาสำหรับการเริ่มต้นของส่วนของเส้นโค้งเชิงเส้นเปลี่ยนนี้ Q10 ค่าได้รับการพิจารณาจากอัตราส่วนของ Rmax และ tlag ที่สิบองศาแตกต่างของอุณหภูมิตามวิธีการแบบดั้งเดิมที่อธิบายไว้ในสมการที่ (2)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การ oxitop ® - C คงที่ respirometry ระบบการวัดที่ใช้ศึกษาผลของอุณหภูมิในน้ำมันดิบ ( tyrihans ; แสง , พาราฟินิกน้ำมันดิบ ความหนาแน่นของ CM 0.825 G − 3 ) การย่อยสลายในน้ำทะเล เพื่อศึกษาผลของอุณหภูมิต่อชุมชนและให้อุดมด้วยจุลินทรีย์ , flasks ทดสอบ C เพิ่มเติม ( ในขั้นตอนการใช้งานมากที่สุดวัดทฤษฎีและการประยุกต์ของ oxitop ® - ระบบ C ได้อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( kuokkanen et al . , 2004 ) จากการเก็บตัวอย่างน้ำทะเล byfjorden ( เหนือ : 58 / 57 ’ 48 เพลงตะวันออก : 5 / 43 นั้น 8 เพลง รานดาเบิก , นอร์เวย์ , 80 ม. ลึก ) โดยการกรอง ( มีนาคม , 2012 , อุณหภูมิน้ำ : 7.7 ° C ) ก่อนการสอบในขวด ( 500 มล. )ตัวอย่างน้ำทะเลอยู่ 5 5 นาที ปลอดเชื้อ กรองอากาศ ขวด จึงเต็มไปด้วยน้ำทะเล ( 375 มิลลิลิตร ) และสารอาหารอนินทรีย์ , วิตามินและกรดอะมิโนถูกเพิ่มเพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีสารอาหารจำกัดเงื่อนไขตามที่อธิบายไว้โดยสําหรับส่วน et al . ( 2013 ) สั้นสารอาหารอนินทรีย์ ( 16.2 มิลลิกรัมต่อลิตร k2hpo4 − 1 , − 1 0.8 มิลลิกรัมต่อลิตร kh2po4 42.0 มก. L − 1 , − 1 ลิตร NaNO3 0.05 มิลลิกรัม FeCl3 2.5 มิลลิกรัม L − 1 ผลิต 15 mg L − 1 MgSO4 ใ ) , แร่ธาตุ , กรดอะมิโน ( 10 μ L L − 1 RPMI 1640 กรดอะมิโนโซลูชั่น 50 × , Sigma ) และวิตามิน ( 10 μ L L − 1 ของโซลูชั่นหุ้นกับ 20 mg L − 1 ไมโอ นอซิทอส , 0.1 mg L − 1 กีฬาเทนนิส , 0.1 mg L − 1 pyridoxine ไฮโดรคลอไรด์ , 1.0 mg L − 1 กรดนิโคตินิก , 0.5 mg L − 1 glycine , 0.01 มิลลิกรัม L − 1 นอกจากนั้น 0.1 mg L − 1 กรดโฟลิก ) ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละขวดรวมทั้งลบที่ว่างเปล่าและการควบคุม อุณหภูมิการบ่ม คือ 0.5 , 5 , 10 และ 15 องศา เก้าขวดเตรียมไว้สำหรับแต่ละบ่มอุณหภูมิ : 5 กับน้ำมันดิบ ( 100 mg L − 1 ) 2 กับโซเดียมเบนโซเอต ( 30 mg L − 1 ) ( ควบคุมบวก ) 1 ไม่มีคาร์บอนเพิ่มเติม ( ว่าง ) และ 1 กับน้ำมัน ( 100 มก. L − 1 ) และโซเดียม ( 1 กรัม ไซด์ L − 1 ) เพื่อลดกิจกรรมของแบคทีเรีย ( ดิน ) ในที่สุดคาร์บอนไดออกไซด์ กับดัก หรือในแต่ละขวด ขวดถูกปกคลุมด้วย oxitop ® c - หัวและวางไว้ในตู้ควบคุมอุณหภูมิตู้ฟักไข่ ( แสง ) แม่เหล็กชุดกวนผสม เพื่อหลีกเลี่ยงการพร่องออกซิเจนของระบบก่อนที่จะ spikingขวดแบบเปิดและถูกแทงด้วยน้ำมันดิบ ( แสงที่สอง ) ทันทีที่ปริมาณการใช้ออกซิเจนถึงประมาณ 50% ของค่าขีด จำกัด ของระบบปิด ( 89 mg O2 L − 1 ) คือประมาณ 45 มิลลิกรัม O2 L − 1 ( วันที่ 8 , 12 , 28 , 15 , 10 และ 5 ° C ตามลำดับ ) น้ำทะเลอุณหภูมิ 0.5 ° C ได้รับจากการบริโภคเมื่อออกซิเจนถึง 15 มก. O2 L − 1 ( 43 วัน ) เนื่องจากเวลาจำกัด .ในเวลาเดียวกันการควบคุมบวกเป็นแหลมที่มีโซเดียมเบนโซเอต ( na benzoate ) ความเข้มข้นเดียวกันของแต่ละแผ่นถูกเพิ่มในระหว่างการเปิดรับครั้งแรก เส้นโค้งการบริโภคออกซิเจนถูกใช้เพื่อตรวจสอบความล่าช้าครั้ง ( tlag ) และอัตราการใช้ออกซิเจนสูงสุด ( rmax ) ระยะที่ใช้งานมากที่สุดของการเลือกเพื่อตรวจสอบ rmax ค่าเส้นแนวโน้มเชิงเส้นถูกติดตั้งและความลาดชันที่ถูกนิยามว่า rmax ทั้ง Benzoate โซเดียม และน้ำมันดิบ ความล่าช้าครั้งกำหนดเป็นเวลาที่การบริโภคออกซิเจนเริ่มเพิ่มขึ้นชี้แจง นี้ถูกกำหนดโดยเข้าสู่ระบบเปลี่ยนเส้นโค้งเดิมและค้นหาเริ่มต้นของส่วนเส้นนี้เปลี่ยนเส้นโค้งคิวเท็นค่าถูกกำหนดจากอัตราส่วนของ rmax tlag 10 องศาและอุณหภูมิแตกต่าง ตามแบบวิธีการที่อธิบายไว้ในสมการที่ ( 2 )