DESCRIPTIONCULTURE VESSEL AND CULTU

DESCRIPTION
CULTURE VESSEL AND CULTURE METHOD


Technical Field
5 [0001]
The การประดิษฐ์นี้ relates to culture of cells and harvesting of the cells.


Background Art
[0002]
10 Along with the recent development of cell technology, new culture methods to obtain
cells having a function similar to an in-vivo function by mimicking an in-vivo pericellular
environment or morphology have been developed. An attempt has been made to use cells
cultured by such methods as a simulator for treatment or biological reaction. Various culture methods have been developed, such as a method of culturing cells using a culture support
15 composed of a sponge or fiber; a suspension culture method in which cells are suspended in a


I
1/12/r7

medium so that the cells spontaneously fonn a spheroid; and a method of culturing cells to form a spheroid by performing a cell non-adhesion treatment on a conventional culture chamber (a flask or the like). In particular, a spheroid culture is an excellent method by which interactions
of cells can be maintained, and thus the method is applied to various cells such as pancreatic islet 20 cells, liver cells, stem cells, and cancer cells. In recent years, studies focusing on the size of a
spheroid have been made. For example, in a drug screen test using cancer cells, the diameter or
volume of a spheroid is used as an index (งานเขียนที่ไม่ใช่สิทธิบัตร 1). It is also disclosed that cells
have different functions depending on the size of a spheroid (งานเขียนที่ไม่ใช่สิทธิบัตร 2 and 3). In
addition to the technique of forming a spheroid as mentioned above, a technique of controlling 25 the size of a spheroid has attracted attention. Further, since it is possible to reproduce a specific
function of a cell, it is expected that this technique of controlling the size of a spheroid will be
applicable in various fields, for example, the artificial organ and bioreactor fields. In such
applications, a technique of preparing a large number of spheroids and recovering the spheroids
is important.
30 [0003]
As means for creating a spheroid having a uniform diameter, Patent Literature 1
discloses a method of controlling the size of each spheroid formed by changing the number of cells to be seeded in a 96WP with a U-shaped bottom on which a hydrophilic membrane is






2
foinied. However, the number of spheroids per culture area is small, and thus it is difficult to
prepare a large number of spheroids. As other methods for creating a spheroid having a uniform diameter, Patent Literature 2 to 4 disclose methods of forming a spheroid in a micro-space.


5 Citation List
Patent Literature [0004]
[Patent Literature 1] Japanese Unexamined Patent Application Publication No. H08-131153
[Patent Literature 2] Japanese Unexamined Patent Application Publication No. 2010-88347 10 [Patent Literature 3] International Patent Publication No. WO 2012/036011
[Patent Literature 4] International Patent Publication No. WO 2013/042360
งานเขียนที่ไม่ใช่สิทธิบัตร
[0005]
[งานเขียนที่ไม่ใช่สิทธิบัตร 1] Juergen Friedrichl, et al., "Spheroid-based drug screen: considerations 15 and practical approach", PROTOCOL, February 12, 2009 (Published online) pp. 309-324
[งานเขียนที่ไม่ใช่สิทธิบัตร 2] Franziska Hirschhaeuser, et al., "Multicellular tumor spheroids: An
underestimated tool is catching up again", Journal of Biotechnology 148, 2010, pp. 3-15
[งานเขียนที่ไม่ใช่สิทธิบัตร 3] C'ELINE LIU BAUWENS, et al., "Control of Human Embryonic
Stem Cell Colony and Aggregate Size Heterogeneity Influences Differentiation Trajectories", 20 STEM CELL, 2008, pp. 2300-2310


Summary of Invention
Technical Problem
[0006]
25 However, in the culture method disclosed in Patent Literature 1, the culture efficiency is
extremely low, which is a rate-limiting step for the large-scale culture. In the culture methods disclosed in Patent Literature 2 and 3, the efficiency of formation of spheroids per unit area is high, but there is a possibility that the spheroids will be removed from the inside of the culture
space during replacement of the medium. Accordingly, careful attention is required during
30 replacement of the medium. Moreover, a study has been made on a method of causing a part of
a spheroid to adhere to the inside of a micro-space so as to prevent removal of the spheroid (Patent Literature 4). However, since adhesion property is different in each type of cell, it is necessary to consider a surface treatment method for each of the cells to be used, and thus the method is impractical.





3
[0007]
The การประดิษฐ์นี้ has been made in view of the above-mentioned background. An
object of the การประดิษฐ์นี้ is to design a micro-space structure which facilitates replacement
of a medium and harvesting of cells, and to provide a culture chamber having the said micro-
5 space structure, and a culture method using the said culture chamber, to make it possible to
prepare spheroids with a uniform size with high efficiency, or to prepare a large number of
spheroids with a uniform size with high efficiency.


Solution to Problem
10 [0008]
According to an aspect of the การประดิษฐ์นี้, a culture chamber according to one embodiment includes a plurality of recesses each formed of a bottom portion and an opening portion. The bottom portion has one of a hemispherical shape and a truncated cone shape. The
opening portion is defined by a wall that surrounds an area from a boundary between the opening 15 portion and the bottom portion to an end of each of the recesses, the wall having a taper angle in
a range from 1 degree to 20 degrees. In addition, an equivalent diameter of the boundary is in a
range from 50 pm to 2 mm and a depth from a bottom of the bottom portion to the end of each of
the recesses is in a range from 0.6 or more times to 3 or less times the equivalent diameter. The
wall defining the opening portion forms a surface continuous to the bottom portion, and an
20 inclination of the continuous surface changes at the boundary.
[0009]
In the culture chamber according to one embodiment, it is preferable that the end of
each of the recesses have one of a hemispherical shape, a trapezoidal shape, and an inverted
triangular shape. It is also preferable that an area between two adjacent recesses be flat and a 25 distance between the two recesses be in a range from 5µm to 50 ',mi.
Further, in the culture chamber according to one embodiment, it is preferable that the
culture chamber be a resin molding formed of one or a combination of two or more selected from
the group consisting of acrylic resin, โพลีแลคติก acid, โพลีไกลโคลิก acid, styrene resin, acrylic
styrene copolymer resin, polycarbonate resin, polyester resin, polyvinyl alcohol resin, ethylene 30 vinyl alcohol copolymer resin, thermoplastic elastomer, vinyl chloride resin, and silicon resin. It
is preferable that a functional group be formed on the recesses by a surface modification
treatment method of any one of plasma treatment, glass coating, corona discharge, and UV
ozonation, or a combination thereof and the treatment be performed so that a water contact angle
becomes 45 degrees or less.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

รายละเอียดเรือวัฒนธรรมและวัฒนธรรมวิธีการทางเทคนิคสนาม5 [0001] การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับวัฒนธรรมของเซลล์และการเก็บเกี่ยวของเซลล์. ศิลปะพื้นหลัง[0002] 10 พร้อมกับการพัฒนาล่าสุดของเทคโนโลยีเซลล์วิธีวัฒนธรรมใหม่ที่จะได้รับเซลล์มีฟังก์ชั่นที่คล้ายกับฟังก์ชั่นในร่างกายโดยการจำลองใน-ร่างกาย pericellular สภาพแวดล้อมหรือลักษณะทางสัณฐานวิทยาได้รับการพัฒนา ความพยายามที่ได้รับการทำที่จะใช้เซลล์เพาะเลี้ยงโดยวิธีการเช่นการจำลองการรักษาหรือการเกิดปฏิกิริยาทางชีวภาพ วิธีการวัฒนธรรมต่าง ๆ ได้รับการพัฒนาเช่นวิธีการเพาะเลี้ยงเซลล์ใช้สนับสนุนวัฒนธรรม15 ประกอบด้วยฟองน้ำหรือใย; วิธีการระงับวัฒนธรรมที่เซลล์ถูกระงับในฉัน1/12 / r7 กลางเพื่อให้เซลล์ธรรมชาติ Fonn ลูกกลมนั้น และวิธีการเพาะเลี้ยงเซลล์ในรูปแบบลูกกลมโดยการดำเนินการรักษาเซลล์ยึดเกาะที่ไม่ได้อยู่ในห้องวัฒนธรรมธรรมดา (ขวดหรือชอบ) โดยเฉพาะอย่างยิ่งวัฒนธรรมลูกกลมเป็นวิธีที่ดีที่มีปฏิสัมพันธ์ของเซลล์สามารถรักษาและทำให้วิธีการที่จะนำไปใช้กับเซลล์ต่างๆเช่นเกาะตับอ่อน 20 เซลล์ตับเซลล์ต้นกำเนิดและเซลล์มะเร็ง ในปีที่ผ่านมามุ่งเน้นไปที่การศึกษาขนาดของที่ลูกกลมได้รับการทำ ยกตัวอย่างเช่นในการทดสอบยาเสพติดหน้าจอโดยใช้เซลล์มะเร็งขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางหรือปริมาณของลูกกลมที่ใช้เป็นดัชนี (งานเขียนที่ไม่ใช่สิทธิบัตร 1) มันยังมีการเปิดเผยว่าเซลล์มีฟังก์ชั่นที่แตกต่างกันขึ้นอยู่กับขนาดของลูกกลมที่ (งานเขียนที่ไม่ใช่สิทธิบัตร 2 และ 3) ในนอกจากเทคนิคการขึ้นรูปลูกกลมดังกล่าวข้างต้นเทคนิคการควบคุม 25 ขนาดของลูกกลมที่ได้รับความสนใจ นอกจากนี้เพราะมันเป็นไปได้ที่จะทำซ้ำเฉพาะฟังก์ชั่นของเซลล์เป็นที่คาดหวังว่าเทคนิคนี้ในการควบคุมขนาดของลูกกลมที่จะมีผลบังคับใช้ในด้านต่างๆ เช่นอวัยวะเทียมและสาขาเครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพ เช่นในการประยุกต์ใช้เทคนิคของการเตรียมความพร้อมเป็นจำนวนมาก spheroids และการกู้คืน spheroids เป็นสิ่งสำคัญ. 30 [0003] ในฐานะที่เป็นหมายถึงการสร้างลูกกลมมีเส้นผ่าศูนย์กลางเครื่องแบบสิทธิบัตรวรรณคดี 1 เปิดเผยวิธีการในการควบคุมขนาดของแต่ละลูกกลมที่เกิดขึ้นจาก เปลี่ยนจำนวนของเซลล์ที่จะเมล็ดใน 96WP ที่มีด้านล่างรูปตัวยูที่เมมเบรนที่ชอบน้ำเป็น2 foinied อย่างไรก็ตามจำนวนของ spheroids ต่อพื้นที่ทางวัฒนธรรมที่มีขนาดเล็กและทำให้มันยากที่จะเตรียมความพร้อมเป็นจำนวนมากspheroids ในฐานะที่เป็นวิธีการอื่น ๆ ในการสร้างลูกกลมมีเส้นผ่าศูนย์กลางเครื่องแบบวรรณคดีสิทธิบัตร 2-4 เปิดเผยวิธีการขึ้นรูปลูกกลมในพื้นที่ขนาดเล็ก. 5 อ้างอิงรายชื่อสิทธิบัตรวรรณกรรม[0004] [สิทธิบัตรวรรณคดี 1] ญี่ปุ่นที่ตีพิมพ์ unexamined ประยุกต์ใช้สิทธิบัตรเลขที่ H08 -131,153 [สิทธิบัตรวรรณกรรม 2] การประยุกต์ใช้สิทธิบัตรญี่ปุ่นที่ตีพิมพ์ฉบับที่ unexamined 2,010-88,347 10 [สิทธิบัตรวรรณคดี 3] สิทธิบัตรนานาชาติที่ตีพิมพ์ฉบับที่ WO 2012/036011 [สิทธิบัตรวรรณกรรม 4] สิทธิบัตรนานาชาติที่ตีพิมพ์ฉบับที่ WO 1] Juergen Friedrichl, et al.. "ลูกกลมที่ใช้ยาเสพติดหน้าจอ: 15 การพิจารณาและวิธีการปฏิบัติ" พิธีสาร, 12 กุมภาพันธ์ 2009 (เผยแพร่ออนไลน์) ได้ pp 309-324 [งานเขียนที่ไม่ใช่สิทธิบัตร 2] กาชาน Hirschhaeuser, และ ล. "spheroids เนื้องอกเซลล์: เป็นเครื่องมือประเมินจะจับขึ้นมาอีกครั้ง". วารสารเทคโนโลยีชีวภาพ 148, 2010, หน้า 3-15. [งานเขียนที่ไม่ใช่สิทธิบัตร 3] C'ELINE หลิว Bauwens, et al, "การควบคุมของ ตัวอ่อนมนุษย์ต้นกำเนิดเซลล์และอาณานิคมรวมขนาดเซลล์สืบพันธุ์มีอิทธิพลแตกต่างไบ"เซลล์ต้นกำเนิด 20, 2008, pp ได้. 2300-2310 สรุปการประดิษฐ์เทคนิคปัญหา[0006] 25 แต่ในวิธีการเพาะเลี้ยงไว้ในสิทธิบัตรวรรณคดี 1, ประสิทธิภาพวัฒนธรรมคือต่ำมากซึ่งเป็นขั้นตอนการ จำกัด อัตราการสำหรับวัฒนธรรมขนาดใหญ่ ในวิธีการวัฒนธรรมเปิดเผยในวรรณคดีสิทธิบัตรที่ 2 และ 3 ที่มีประสิทธิภาพของการก่อตัวของ spheroids ต่อหน่วยพื้นที่สูง แต่มีความเป็นไปได้ว่า spheroids จะถูกลบออกจากด้านในของวัฒนธรรมที่เป็นพื้นที่ในระหว่างการเปลี่ยนของกลาง ดังนั้นความเอาใจใส่และระมัดระวังในช่วงวันที่30 แทนของสื่อ นอกจากนี้การศึกษาได้รับการทำในวิธีการของการก่อให้เกิดการเป็นส่วนหนึ่งของลูกกลมให้เป็นไปตามที่อยู่ภายในพื้นที่ขนาดเล็กเพื่อป้องกันไม่ให้การกำจัดของลูกกลมนี้ (สิทธิบัตรวรรณกรรม 4) แต่เนื่องจากสถานที่ให้การยึดเกาะที่แตกต่างกันในแต่ละชนิดของเซลล์ที่มีความจำเป็นที่จะต้องพิจารณาวิธีการรักษาพื้นผิวแต่ละเซลล์ที่จะใช้และทำให้วิธีการที่จะทำไม่ได้. 3 [0007] การประดิษฐ์นี้ได้ทำใน มุมมองของพื้นหลังดังกล่าวข้างต้น วัตถุของการประดิษฐ์นี้คือการออกแบบโครงสร้างพื้นที่ขนาดเล็กซึ่งจะเอื้อต่อการเปลี่ยนของสื่อและการเก็บเกี่ยวของเซลล์และเพื่อให้ห้องที่มีวัฒนธรรมกล่าวว่าไมโคร5 โครงสร้างพื้นที่และวิธีการเพาะเลี้ยงโดยใช้ห้องวัฒนธรรมกล่าวว่า ที่จะทำให้มันเป็นไปได้ที่จะเตรียมความพร้อมspheroids ที่มีขนาดสม่ำเสมอมีประสิทธิภาพสูงหรือการเตรียมความพร้อมเป็นจำนวนมากspheroids ที่มีขนาดสม่ำเสมอที่มีประสิทธิภาพสูง. วิธีการแก้ปัญหา10 [0008] ตามลักษณะของการประดิษฐ์นี้า, ห้องวัฒนธรรมตามหนึ่งศูนย์รวมรวมถึงส่วนใหญ่ของแต่ละซุ้มเกิดขึ้นจากส่วนล่างและส่วนที่เปิด ส่วนล่างมีหนึ่งในรูปทรงครึ่งวงกลมและรูปทรงกรวยที่ถูกตัดทอน ส่วนการเปิดถูกกำหนดด้วยกำแพงที่ล้อมรอบพื้นที่จากเขตแดนระหว่างเปิด 15 ส่วนและส่วนล่างไปยังจุดสิ้นสุดของแต่ละซุ้มที่เป็นผนังที่มีมุมเรียวในช่วงตั้งแต่วันที่1 องศา 20 องศา นอกจากนี้ยังมีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางเทียบเท่าเขตแดนอยู่ในช่วงตั้งแต่ 50 โมงถึง 2 มิลลิเมตรและความลึกจากด้านล่างของส่วนล่างไปยังจุดสิ้นสุดของแต่ละซุ้มอยู่ในช่วงจาก0.6 ครั้งหรือมากกว่าที่จะ 3 หรือน้อยกว่า ครั้งเส้นผ่าศูนย์กลางเทียบเท่า ผนังกำหนดส่วนการเปิดตัวรูปแบบพื้นผิวอย่างต่อเนื่องส่วนล่างและความโน้มเอียงที่ 20 ของการเปลี่ยนแปลงพื้นผิวอย่างต่อเนื่องในขอบเขต. [0009] ในห้องวัฒนธรรมตามหนึ่งศูนย์รวมจะดีกว่าว่าในตอนท้ายของแต่ละซุ้มมีหนึ่งในรูปทรงครึ่งวงกลม, รูปทรงสี่เหลี่ยมคางหมูและคว่ำรูปสามเหลี่ยม นอกจากนี้ยังเป็นที่นิยมที่พื้นที่ระหว่างสองซุ้มที่อยู่ติดกันจะแบนและ 25 ระยะห่างระหว่างสองซุ้มอยู่ในช่วงจาก5μm 50 'ไมล์. นอกจากนี้ในห้องวัฒนธรรมตามหนึ่งศูนย์รวมจะดีกว่าว่าวัฒนธรรมห้องจะปั้นเรซินที่เกิดขึ้นอย่างใดอย่างหนึ่งหรือรวมกันของสองคนหรือมากกว่าการคัดเลือกจากกลุ่มประกอบด้วยเรซินอะคริลิโพลีแลคติกกรดโพลีไกลโคกรดลิกเรซินสไตรีนคริลิคเรซินพอลิสไตรีนเรซินโพลีคาร์บอเนตเรซินโพลีเอสเตอร์เรซินโพลีไวนิลแอลกอฮอล์, เอทิลีน 30 เม็ดพลาสติกพอลิไวนิลแอลกอฮอล์, ยางเทอร์โมยางไวนิลคลอไรด์และเรซินซิลิกอน มันเป็นที่นิยมว่ากลุ่มการทำงานจะเกิดขึ้นในหลืบโดยการปรับเปลี่ยนพื้นผิววิธีการรักษาของคนใดคนหนึ่งของการรักษาพลาสม่าเคลือบแก้วปล่อยโคโรนาและรังสียูวีโอโซนหรือการรวมกันดังกล่าวและการรักษาจะดำเนินการเพื่อให้มุมสัมผัสน้ำจะกลายเป็น 45 องศาหรือน้อยกว่า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

รายละเอียด
วัฒนธรรมเรือและวิธีการเลี้ยง


เทคนิคสนาม
5 [ 001 ]
การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับวัฒนธรรมของเซลล์ และการเก็บเกี่ยวเซลล์



[ ]
ศิลปะพื้นหลัง 0002 10 พร้อมกับการพัฒนาล่าสุดของเทคโนโลยีเซลล์วิธีการวัฒนธรรมใหม่เพื่อขอรับ
เซลล์มีการทำงานคล้ายกับปี 2544 เป็นปี 2544 โดยการเลียนแบบการทำงาน pericellular
ลักษณะสภาพแวดล้อมหรือได้รับการพัฒนา ความพยายามได้รับการทำที่จะใช้เพาะเลี้ยงเซลล์
โดยวิธีการเช่นการจำลองการรักษาหรือปฏิกิริยาทางชีวภาพ วิธีการวัฒนธรรมต่าง ๆ ที่ได้รับการพัฒนา เช่น วิธีการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่ใช้สนับสนุนวัฒนธรรม
15 ประกอบด้วยฟองน้ำหรือใย ; ระงับวิธีการเลี้ยงที่เซลล์จะถูกระงับใน


ผม
1 / 12 / r7

กลางเพื่อให้เซลล์ได้ fonn เป็นรูปกลมรี และวิธีเพาะเลี้ยงเซลล์เป็นรูปทรงคล้ายทรงกลมโดยการยึดเกาะเซลล์ไม่รักษาวัฒนธรรมแบบเดิม ( ห้องหนาวหรือชอบ ) โดยเฉพาะ เป็นรูปกลมรี วัฒนธรรมเป็นวิธีที่ยอดเยี่ยมที่ปฏิสัมพันธ์
ของเซลล์ที่สามารถรักษาได้ และดังนั้นจึงเป็นวิธีการที่ใช้กับเซลล์ต่าง ๆ เช่น ตับอ่อน Islet 20 เซลล์ตับเซลล์ , เซลล์ต้นกำเนิดและเซลล์มะเร็ง ใน ปี ล่าสุด การศึกษาที่เน้นขนาดของ
รูปกลมรี เรียบร้อยแล้ว ตัวอย่างเช่น ในยาทดสอบจอโดยใช้เซลล์มะเร็ง , เส้นผ่าศูนย์กลางหรือ
ปริมาตรของสุลต่านสุลัยมานแห่งจักรวรรดิออตโตมันที่ใช้เป็นดัชนี ( งานเขียนที่ไม่ใช่สิทธิบัตร 1 ) นอกจากนี้ยังพบว่าเซลล์
มีฟังก์ชั่นที่แตกต่างกันขึ้นอยู่กับขนาดของสุลต่านสุลัยมานแห่งจักรวรรดิออตโตมัน ( งานเขียนที่ไม่ใช่สิทธิบัตร 2 และ 3 ) ใน
นอกจากเทคนิคการขึ้นรูปทรงคล้ายทรงกลมดังกล่าวข้างต้น เทคนิคการควบคุม 25 ขนาดของสุลต่านสุลัยมานแห่งจักรวรรดิออตโตมันได้ดึงดูดความสนใจ เพิ่มเติม เนื่องจากมันเป็นไปได้ที่จะสร้างฟังก์ชันเฉพาะ
ของเซลล์คาดว่าเทคนิคนี้ควบคุมขนาดของสุลต่านสุลัยมานแห่งจักรวรรดิออตโตมันจะ
ที่ใช้ในสาขาต่างๆ เช่น อวัยวะเทียม และแบบเขต ในการใช้งานเช่น
, เทคนิคในการเตรียมและการกู้คืนจำนวนมากของ diethyl diethyl

เป็นสำคัญ 0003 30 [ ]
เป็นหมายถึงการสร้างทรงคล้ายทรงกลมที่มีเส้นผ่าศูนย์กลางชุดสิทธิบัตร 1
, วรรณกรรมเปิดเผยวิธีการในการควบคุมขนาดของแต่ละรูปกลมรีขึ้นโดยการเปลี่ยนจำนวนเซลล์เป็นเมล็ดใน 96wp กับก้นตัวยูซึ่งเยื่อน้ำคือ 2







foinied . อย่างไรก็ตาม หมายเลขของ diethyl ต่อวัฒนธรรม พื้นที่มีขนาดเล็กและดังนั้นจึงเป็นเรื่องยากที่จะ
เตรียมหมายเลขขนาดใหญ่ของ diethyl . เป็นวิธีการอื่น ๆเพื่อสร้างเป็นรูปกลมรี มีขนาดสม่ำเสมอสิทธิบัตรวรรณกรรม 2 เปิดเผยวิธีการขึ้นรูปทรงคล้ายทรงกลมในพื้นที่ขนาดเล็ก .



5 อ้างอิงรายการสิทธิบัตรวรรณกรรม [ จดจํา ]
[ 1 ] ญี่ปุ่น unexamined วรรณกรรมสิทธิบัตรสิทธิบัตรสิ่งพิมพ์ไม่ h08-131153
[ 2 ] ญี่ปุ่น unexamined วรรณกรรมสิทธิบัตรสิทธิบัตรสิ่งพิมพ์ไม่ 2010-88347 10 [ 3 ] วรรณกรรมสิทธิบัตรสิทธิบัตรนานาชาติประกาศไม่ 2012 / 036011
wo[ 4 ] วรรณกรรมสิทธิบัตรนานาชาติสิ่งพิมพ์สิทธิบัตรเลขที่ wo 2013 / 042360

[ ]
งานเขียนที่ไม่ใช่สิทธิบัตร 0005 [ 1 ] งานเขียนที่ไม่ใช่สิทธิบัตร Juergen friedrichl et al . , " หน้าจอยาเสพติดจากสุลต่านสุลัยมานแห่งจักรวรรดิออตโตมัน : ข้อควรพิจารณาและแนวทางการปฏิบัติ " , โปรโตคอล , 12 กุมภาพันธ์ 2552 ( เผยแพร่ออนไลน์ ) 309-324
.[ 2 ] งานเขียนที่ไม่ใช่สิทธิบัตร Franziska hirschhaeuser et al . , " หลายเซลล์เนื้องอก diethyl :
underestimated เครื่องมือจับขึ้นอีกครั้ง " , วารสารเทคโนโลยีชีวภาพ 148 , 2553 . [ 3 ] 2
งานเขียนที่ไม่ใช่สิทธิบัตร c'eline ลิวโบเวน , et al . , " การควบคุม
ตัวอ่อนมนุษย์เซลล์ต้นกำเนิดและการรวมอิทธิพลอาณานิคมขนาดสามารถแยกย่อยวิถี " , 20 สเต็มเซลล์ , 2008 , pp . 2300-2310


สรุปปัญหาทางเทคนิคการประดิษฐ์

[ ]
0006 25 อย่างไรก็ตามในวัฒนธรรมแบบเปิดเผยในวรรณกรรมสิทธิบัตร 1 , วัฒนธรรมประสิทธิภาพ
ต่ำมาก ซึ่งมีอัตราการก้าวสำหรับวัฒนธรรม ขนาดใหญ่