Vibrio cholerae is naturally compet

Vibrio cholerae is naturally competent when grown on chitin. It is known that expression of the major regulator of competence, TfoX, is controlled by chitin; however, the molecular mechanisms underlying this requirement for chitin have remained unclear. In the present study, we identify and characterize a membrane-bound transcriptional regulator that positively regulates the small RNA (sRNA) TfoR, which posttranscriptionally enhances tfoX translation. We show that this regulation of the tfoR promoter is direct by performing electrophoretic mobility shift assays and by heterologous expression of this system in Escherichia coli. This transcriptional regulator was recently identified independently and was named “TfoS” (S. Yamamoto et al., Mol. Microbiol., in press, doi:10.1111/mmi.12462). Using a constitutively active form of TfoS, we demonstrate that the activity of this regulator is sufficient to promote competence in V. cholerae in the absence of chitin. Also, TfoS contains a large periplasmic domain, which we hypothesized interacts with chitin to regulate TfoS activity. In the heterologous host E. coli, we demonstrate that chitin oligosaccharides are sufficient to activate TfoS activity at the tfoR promoter. Collectively, these data characterize TfoS as a novel chitin-sensing transcriptional regulator that represents the direct link between chitin and natural competence in V. cholerae.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Cholerae ผลเป็นอำนาจโดยธรรมชาติเมื่อเติบโตขึ้นบน chitin เป็นที่รู้จักกันว่า ค่าของการควบคุมที่สำคัญสาย TfoX จะถูกควบคุม โดยไคทิน อย่างไรก็ตาม กลไกระดับโมเลกุลที่ต้นข้อกำหนดนี้สำหรับไคทินได้ยังคงไม่ชัดเจน ในการศึกษาปัจจุบัน เราระบุ และกำหนดลักษณะควบคุม transcriptional ผูกกับเมมเบรนที่กำหนดบวก TfoR (sRNA) อาร์เอ็นเอขนาดเล็ก ที่ช่วยแปล tfoX posttranscriptionally เราแสดงนี้ระเบียบของโปรโมเตอร์ tfoR ว่าโดยตรง โดยการเคลื่อนไหวด้วยกะ assays และนิพจน์ heterologous ของระบบนี้ใน Escherichia coli ควบคุมนี้ transcriptional เมื่อเร็ว ๆ นี้ระบุได้อย่างอิสระ และได้ชื่อว่า "TfoS" (S. ยามาโมโตะและ al., Mol. Microbiol. ในกด doi:10.1111/mmi.12462) โดยใช้รูปแบบ constitutively ใช้งาน TfoS เราแสดงให้เห็นว่า การควบคุมนี้เพียงพอที่จะส่งเสริมความสามารถใน V. cholerae ของไคทิน ยัง TfoS ประกอบด้วยโดเมนใหญ่ periplasmic ซึ่งเราตั้งสมมติฐานว่าโต้ตอบกับไคทินเพื่อกำหนดกิจกรรม TfoS ใน heterologous โฮสต์ E. coli เราแสดงให้เห็นว่า ไคทิน oligosaccharides เพียงพอที่จะเรียกใช้กิจกรรม TfoS ที่โปรโมเตอร์ tfoR โดยรวม ข้อมูลเหล่านี้กำหนดลักษณะ TfoS เป็นแบบนวนิยายตรวจ chitin transcriptional ควบคุมที่แสดงถึงการเชื่อมโยงโดยตรงระหว่างไคทินและความสามารถที่ธรรมชาติใน V. cholerae

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Vibrio cholerae มีอำนาจตามธรรมชาติเมื่อปลูกในไคติน เป็นที่ทราบกันว่าการแสดงออกของการควบคุมที่สำคัญของความสามารถ TfoX ถูกควบคุมโดยไคติน; แต่กลไกระดับโมเลกุลพื้นฐานความต้องการนี​​้ได้ไคตินยังคงไม่มีความชัดเจนได้ ในการศึกษาปัจจุบันเราระบุและลักษณะของเมมเบรนที่ถูกผูกไว้ควบคุมการถอดรหัสที่บวกควบคุม RNA ขนาดเล็ก (sRNA) TfoR ซึ่งช่วยเพิ่ม posttranscriptionally แปล tfoX เราแสดงให้เห็นว่ากฎระเบียบของโปรโมเตอร์ tfoR นี้โดยตรงโดยการดำเนินการตรวจการเปลี่ยนแปลงการเคลื่อนไหว electrophoretic และโดยการแสดงออก heterologous ของระบบนี้ในเชื้อ Escherichia coli ควบคุมการถอดรหัสนี้ถูกระบุว่าเมื่อเร็ว ๆ นี้เป็นอิสระและได้รับการตั้งชื่อว่า "TfoS" (เอสยามาโมโตะ, et al, Mol Microbiol ในกดดอย:... 10.1111 / mmi.12462) โดยใช้รูปแบบการใช้งานของ constitutively TfoS เราแสดงให้เห็นว่ากิจกรรมของการควบคุมนี้จะเพียงพอที่จะส่งเสริมความสามารถในการ V. cholerae ในกรณีที่ไม่มีไคติน นอกจากนี้ยังมี TfoS โดเมน periplasmic ขนาดใหญ่ซึ่งเราตั้งสมมติฐานปฏิสัมพันธ์กับไคตินในการควบคุมกิจกรรม TfoS ในการเป็นเจ้าภาพ heterologous เชื้อ E. coli เราแสดงให้เห็นว่า oligosaccharides ไคตินมีเพียงพอที่จะเปิดใช้งานกิจกรรม TfoS ที่ก่อการ tfoR เรียกรวมกันว่าข้อมูลเหล่านี้เป็นลักษณะ TfoS นวนิยายไคตินตรวจจับควบคุมการถอดรหัสที่แสดงถึงการเชื่อมโยงโดยตรงระหว่างไคตินและความสามารถในธรรมชาติ V. cholerae

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

Vibrio cholerae ความสามารถโดยธรรมชาติ เมื่อปลูกในไคติน มันเป็นที่รู้จักกันว่า การแสดงออกของการควบคุมหลักของความสามารถ tfox ถูกควบคุมโดยไคติน อย่างไรก็ตาม กลไกระดับโมเลกุลพื้นฐานความต้องการนี้ไคยังคงไม่ชัดเจน ในการศึกษาครั้งนี้เราระบุและลักษณะมี particle ควบคุมที่บวกควบคุม RNA ขนาดเล็ก ( สรณะ ) tfor ซึ่ง posttranscriptionally ช่วยเพิ่มการแปล tfox . เราแสดงให้เห็นว่านี้ระเบียบของ tfor ผู้สนับสนุนโดยตรง โดยการแสดงยูไนเต็ดกะ ) และโดยการแสดงออกชนิดของระบบนี้ใน Escherichia coliลองปรับเป็นอิสระ และเมื่อเร็วๆ นี้ ระบุเป็นชื่อ " tfos " ( S . ยามาโมโตะ et al . , โมล ธนิดา เหรียญทอง B Sc . , ในข่าว , ดอย : 10.1111 / MMI . 12462 ) การใช้แบบฟอร์ม constitutively ปราดเปรียวของ tfos เราแสดงให้เห็นว่ากิจกรรมของการควบคุมนี้จะเพียงพอที่จะส่งเสริมความสามารถใน V . cholerae ในการขาดงานของไคติน นอกจากนี้ tfos มีโดเมนเป็น periplasmic ขนาดใหญ่ที่เราตั้งสมมุติฐาน มีการโต้ตอบกับไคตินเพื่อควบคุมกิจกรรม tfos . ในโฮสต์ชนิด E . coli , เราแสดงให้เห็นว่าไคตินโอลิโกแซคคาไรด์มีเพียงพอที่จะใช้ในกิจกรรม tfos tfor โปรโมเตอร์ เรียกข้อมูลเหล่านี้จัดเป็นนวนิยายจากไคติน tfos particle ควบคุมที่แสดงถึงการเชื่อมโยงโดยตรงระหว่างไคตินและความสามารถตามธรรมชาติใน V . cholerae .