- ข้อความ
- ประวัติศาสตร์
Chequerboard methodAntimicrobial in
Chequerboard method
Antimicrobial interactionswere evaluated by agar chequer- board titration.4 Plaunotol, clarithromycin and amoxicillin were dissolved in dimethylsulphoxide, methanol anddistilled water, respectively. Inocula were prepared by suspending growth from BHI blood agar plates in physiological saline equivalent to a 2.0 McFarland standard (108 cfu/mL). A final inoculum of 105 cfu/spot wasappliedusing an Auto-Inoculator (Dai Nippon Seiki Co. Ltd, Kyoto, Japan). Experimentswere performed in triplicate, and all plateswere incubated for 3 daysat 35°C under microaerophilic conditions. Fractional inhibitory concentrations(FICs) were calculated asfollows: FIC = (MIC of drug A incombination/MIC of drug A alone) + (MIC of drug B in combination/MIC of drug B alone)
FIC indiceswere interpreted asfollows: ≤0.5, synergy;
>0.5–1, additive; >1–4.0, indifference; >4, antagonism.4
Time–kill assay
H. pylori SS1 cultured overnight in 1 mL (c.2× 108 cfu/mL) of Brucella broth (Becton DickinsonandCompany,Cockeys- ville, MD, USA) supplemented with 2% heat-inactivated fetal bovine serum (FBS broth) were inoculated into a 50 mL flask containing 24 mL of drug supplemented with the same medium. The concentrationsused were the MIC of plaunotol and 0.5 × MIC of clarithromycin or 0.5 × MIC of amoxicillin. Viability countswere carried out after incubation at 37°Cona gyratory shaker rotating at 110 rpm. At 0, 6, 12, 24 and 36 h, the samples were removed and 10-fold serial dilutions were plated on to BHI blood agar plates. This experiment was carried out in triplicate. Data obtained were analysed by determining the viable count that yielded a ∆log10 cfu/mL reduction after 36 h of incubation. Synergy wasdefined asa ≥2log10 cfu/mL decrease in the viable count with the drug combination, in comparison with the most active agent alone.5 Additive activity wasdefined asa viability count of 0–1.9 log10 cfu/mL below the starting inoculum after com- bination treatment.5
Animals
Six-week-old male C57BL/6 mice were obtained from CharlesRiver Inc. (Kanagawa, Japan). The mice were fed a commercial diet (FR-2; Funabashi Farms, Chiba, Japan) and given water ad libitum. All animal experimentswere carried out according to the guidelinesprovided by the Institutional Animal Care and Use Committee of Sankyo Co., Ltd.
Induction of infection with H. pylori
H. pylori SS1 wascultured in FBS broth on a gyratory shaker at 110 rpm for 24 h at 37°C. Mice were orally inoculated with 1.5mL of bacterial suspensionof 2×108cfu/mL after 1 day of fasting. Therapy began 5 days after infection.
Combination therapy
Plaunotol was dissolved in distilled water supplemented with 0.4% Tween 80 (Tween solution; Kanto Chemical Co., Inc., Tokyo, Japan). Clarithromycin and amoxicillin were sus- pended in 0.5% sodium carboxymethyl cellulose (CMC solution, Kanto Chemical Co., Inc.). The mice received 30 or 100 mg/kg/dose of plaunotol, or 20 mg/kg/dose of clarithro- mycinoramoxicillinoncedailyfor5days.Additionaladminis- trationsincluded 30 or 100 mg/kg/dose of plaunotol with 20 mg/kg/dose of clarithromycin, and 30 or 100 mg/kg/dose of plaunotol with 20 mg/kg/dose of amoxicillin. Control mice received oral administrations of CMC and Tween solutions.
Clarithromycin-sparing effect of plaunotol in vivo
To evaluate the clarithromycin-sparing effect of plaunotol in vivo, mice were administered 30 mg/kg/dose of plaunotol plus10 mg/kg/dose of clarithromycin, or 10, 20, 30 or 40 mg/kg/dose of clarithromycin alone once daily for 5 days.
Measurement of the viable count of H. pylori in the stomachs of mice
After the final administration, the mice were fasted for 1 day, killed, and samples were obtained by incising the mucosa of the stomach. After homogenizing the samples with 2 mL of FBS broth, 100µL aliquotsfrom 10-fold serial dilutionswere inoculated onto modified Skirrow’sagar plates.3 The plates were then incubated at 37°C for 7 daysin a microaerophilic environment, and the coloniesof H. pylori were counted. Bacterial counts are expressed as cfu per stomach.
Statistical analysis
The statistical analysis was performed by two-way ANOVA to determine whether the antimicrobial combinationsshowed synergic activity, and by Dunnett’s test to determine the difference between the therapeutic effectsof clarithromycin alone and clarithromycin in combination with plaunotol. P values of
Antimicrobial interactionswere evaluated by agar chequer- board titration.4 Plaunotol, clarithromycin and amoxicillin were dissolved in dimethylsulphoxide, methanol anddistilled water, respectively. Inocula were prepared by suspending growth from BHI blood agar plates in physiological saline equivalent to a 2.0 McFarland standard (108 cfu/mL). A final inoculum of 105 cfu/spot wasappliedusing an Auto-Inoculator (Dai Nippon Seiki Co. Ltd, Kyoto, Japan). Experimentswere performed in triplicate, and all plateswere incubated for 3 daysat 35°C under microaerophilic conditions. Fractional inhibitory concentrations(FICs) were calculated asfollows: FIC = (MIC of drug A incombination/MIC of drug A alone) + (MIC of drug B in combination/MIC of drug B alone)
FIC indiceswere interpreted asfollows: ≤0.5, synergy;
>0.5–1, additive; >1–4.0, indifference; >4, antagonism.4
Time–kill assay
H. pylori SS1 cultured overnight in 1 mL (c.2× 108 cfu/mL) of Brucella broth (Becton DickinsonandCompany,Cockeys- ville, MD, USA) supplemented with 2% heat-inactivated fetal bovine serum (FBS broth) were inoculated into a 50 mL flask containing 24 mL of drug supplemented with the same medium. The concentrationsused were the MIC of plaunotol and 0.5 × MIC of clarithromycin or 0.5 × MIC of amoxicillin. Viability countswere carried out after incubation at 37°Cona gyratory shaker rotating at 110 rpm. At 0, 6, 12, 24 and 36 h, the samples were removed and 10-fold serial dilutions were plated on to BHI blood agar plates. This experiment was carried out in triplicate. Data obtained were analysed by determining the viable count that yielded a ∆log10 cfu/mL reduction after 36 h of incubation. Synergy wasdefined asa ≥2log10 cfu/mL decrease in the viable count with the drug combination, in comparison with the most active agent alone.5 Additive activity wasdefined asa viability count of 0–1.9 log10 cfu/mL below the starting inoculum after com- bination treatment.5
Animals
Six-week-old male C57BL/6 mice were obtained from CharlesRiver Inc. (Kanagawa, Japan). The mice were fed a commercial diet (FR-2; Funabashi Farms, Chiba, Japan) and given water ad libitum. All animal experimentswere carried out according to the guidelinesprovided by the Institutional Animal Care and Use Committee of Sankyo Co., Ltd.
Induction of infection with H. pylori
H. pylori SS1 wascultured in FBS broth on a gyratory shaker at 110 rpm for 24 h at 37°C. Mice were orally inoculated with 1.5mL of bacterial suspensionof 2×108cfu/mL after 1 day of fasting. Therapy began 5 days after infection.
Combination therapy
Plaunotol was dissolved in distilled water supplemented with 0.4% Tween 80 (Tween solution; Kanto Chemical Co., Inc., Tokyo, Japan). Clarithromycin and amoxicillin were sus- pended in 0.5% sodium carboxymethyl cellulose (CMC solution, Kanto Chemical Co., Inc.). The mice received 30 or 100 mg/kg/dose of plaunotol, or 20 mg/kg/dose of clarithro- mycinoramoxicillinoncedailyfor5days.Additionaladminis- trationsincluded 30 or 100 mg/kg/dose of plaunotol with 20 mg/kg/dose of clarithromycin, and 30 or 100 mg/kg/dose of plaunotol with 20 mg/kg/dose of amoxicillin. Control mice received oral administrations of CMC and Tween solutions.
Clarithromycin-sparing effect of plaunotol in vivo
To evaluate the clarithromycin-sparing effect of plaunotol in vivo, mice were administered 30 mg/kg/dose of plaunotol plus10 mg/kg/dose of clarithromycin, or 10, 20, 30 or 40 mg/kg/dose of clarithromycin alone once daily for 5 days.
Measurement of the viable count of H. pylori in the stomachs of mice
After the final administration, the mice were fasted for 1 day, killed, and samples were obtained by incising the mucosa of the stomach. After homogenizing the samples with 2 mL of FBS broth, 100µL aliquotsfrom 10-fold serial dilutionswere inoculated onto modified Skirrow’sagar plates.3 The plates were then incubated at 37°C for 7 daysin a microaerophilic environment, and the coloniesof H. pylori were counted. Bacterial counts are expressed as cfu per stomach.
Statistical analysis
The statistical analysis was performed by two-way ANOVA to determine whether the antimicrobial combinationsshowed synergic activity, and by Dunnett’s test to determine the difference between the therapeutic effectsof clarithromycin alone and clarithromycin in combination with plaunotol. P values of
0/5000
วิธี chequerboard
interactionswere ต้านจุลชีพการประเมินโดยวุ้น plaunotol titration.4 ตรวจสอบบอร์ด clarithromycin และ AMOXICILLIN ถูกกลืนหายไปใน DIMETHYLSULPHOXIDE, เมทานอล anddistilled น้ำตามลำดับ เชื้อตั้งต้นที่ถูกจัดทำขึ้นโดยระงับการเจริญเติบโตจากแผ่น BHI วุ้นในเลือดเทียบเท่าน้ำเกลือทางสรีรวิทยา 2.0 MCFARLAND มาตรฐาน (108 โคโลนี / มล. )เชื้อสุดท้ายของ 105 โคโลนี / จุด wasappliedusing อัตโนมัติ inoculator (dai นิปปอน seiki ร่วม จำกัด ., เกียวโต, ญี่ปุ่น) experimentswere ดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่าและ plateswere ทั้งหมดบ่ม 3 daysat 35 องศาเซลเซียสภายใต้เงื่อนไข microaerophilic ความเข้มข้นที่ยับยั้งเศษส่วน (FICS) ถูกคำนวณ asfollows:FIC = (ไมค์ของยาเสพติด incombination / ไมค์ของยาเสพติดเพียงอย่างเดียว) (ไมค์ของขยาเสพติดในการรวมกัน / ไมค์ของยาเสพติดเพียงอย่างเดียวข)
FIC indiceswere ตีความ asfollows: ≤ 0.5, พลัง;
> 0.5-1, สาร;> 1 -4.0 ไม่แยแส;> 4 antagonism.4
เวลาฆ่าทดสอบ h
SS1 pylori เลี้ยงค้างคืนใน 1 มิลลิลิตร (c.2 × 108 โคโลนี / มิลลิลิตร) น้ำซุป Brucella (dickinsonandcompany Becton, cockeys-ville, MD,usa) เสริมด้วย 2% ความร้อนอนุภาคซีรั่มของทารกในครรภ์วัว (น้ำซุป FBS) มีเชื้อลงในขวด 50 มล. ที่มี 24 มล. ของยาเสพติดเสริมด้วยสื่อเดียวกัน concentrationsused มีไมค์ของ plaunotol และ 0.5 ×ไมค์ของ clarithromycin หรือ 0.5 ×ไมค์ของยาใน ชีวิต countswere ดำเนินการหลังการบ่มที่ 37 °ปั่นแบบหมุน Cona หมุนที่ 110 รอบต่อนาที ที่ 0, 6, 12,24 และ 36 ชั่วโมงตัวอย่างที่ถูกถอดออกและเจือจาง 10 เท่าถูกชุบเพื่อ BHI แผ่นวุ้นเลือด การทดลองครั้งนี้ได้รับการดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า ข้อมูลที่ได้มาวิเคราะห์โดยการกำหนดนับได้ว่าให้ผลในการลดΔlog10โคโลนี / มล. หลังจาก 36 ชั่วโมงของการบ่ม พลัง wasdefined asa ≥ 2log10 โคโลนี / ml ลดลงในการนับทำงานได้กับการรวมกันของยาเสพติดที่ในการเปรียบเทียบกับตัวแทนใช้งานมากที่สุด alone.5 กิจกรรมเสริมศักยภาพ wasdefined นับ asa ของ 0-1.9 log10 CFU / ml ด้านล่างหัวเชื้อเริ่มต้นหลังจากคอมรวมกัน treatment.5
สัตว์หกสัปดาห์อายุเพศชาย C57BL / 6 หนูที่ได้รับ จาก charlesriver นิ้ว (คานากาว่า, ญี่ปุ่น) หนูได้รับการเลี้ยงดูอาหารเชิงพาณิชย์ (FR-2 ฟาร์ม Funabashi, จังหวัดชิ, ญี่ปุ่น) และได้รับการโฆษณา libitum น้ำสัตว์ทั้งหมด experimentswere ดำเนินการตาม guidelinesprovided โดยการดูแลสัตว์สถาบันและการใช้งานของคณะกรรมการร่วม sankyo., ltd.
เหนี่ยวนำของการติดเชื้อเอช pylori h
pylori SS1 wascultured ในน้ำซุป FBS ในเครื่องปั่นแบบหมุนที่ 110 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่ 37 องศาเซลเซียส หนูได้รับเชื้อปากเปล่าด้วย 1.5ml ของ suspensionof แบคทีเรีย 2 × 108cfu/ml หลังจาก 1 วันของการอดอาหารการรักษาเริ่ม 5 วันหลังจากการติดเชื้อรวมกัน
บำบัด plaunotol ก็เลือนหายไปในน้ำกลั่นเสริมด้วย 0.4% ทวี 80. (ทางออกที่ทวี.. ร่วมเคมีคัน, inc, โตเกียวประเทศญี่ปุ่น) clarithromycin และ AMOXICILLIN ถูก Sus-pended 0.5% โซเดียมคาร์บอกซีเซลลูโลส (CMC แก้ปัญหาร่วมเคมีคัน., inc.) หนูที่ได้รับ 30 หรือ 100 mg / kg / ปริมาณของ plaunotol,หรือ 20 mg / kg / ปริมาณของ clarithro-mycinoramoxicillinoncedailyfor5days.additionaladminis trationsincluded-30 หรือ 100 mg / kg / ปริมาณของ plaunotol กับ 20 mg / kg / ยา clarithromycin, และ 30 หรือ 100 mg / kg / ปริมาณของ plaunotol กับ 20 mg / / กก. ปริมาณของยาใน หนูที่ได้รับการควบคุมเข็มช่องปากของ cmc และการแก้ปัญหาทวี.
ผล clarithromycin เจียดของ plaunotol ในร่างกาย
การประเมินผล clarithromycin เจียดของ plaunotol ในร่างกายหนูเป็นยา 30 mg / kg / ปริมาณของ plaunotol plus10 mg / kg / ยา clarithromycin, หรือ 10, 20, 30 หรือ 40 mg / kg / ยา clarithromycin คนเดียววันละครั้ง เป็นเวลา 5 วัน.
วัดนับชั่วโมงการทำงานของ pylori ในท้องของหนู
หลังจากที่การบริหารงานสุดท้ายที่หนูได้รับการอดอาหารเป็นเวลา 1 วันฆ่าตัวอย่างและได้รับโดย incising เยื่อเมือกของกระเพาะอาหาร หลังจากผสมยางตัวอย่างที่มี 2 มิลลิลิตรของน้ำซุป FBS, aliquotsfrom 100μl 10 เท่า dilutionswere อนุกรมเชื้อเข้าสู่ skirrow'sagar แก้ไข plates.3 แผ่นถูกบ่มแล้วที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 7 daysin สภาพแวดล้อม microaerophilic และ coloniesof ชั่วโมง pylori นับ ปริมาณแบคทีเรียจะแสดงเป็นโคโลนีต่อกระเพาะอาหาร
.การวิเคราะห์ทางสถิติ
การวิเคราะห์ทางสถิติได้ดำเนินการโดยสองทางวิเคราะห์เพื่อตรวจสอบว่ากิจกรรมต้านจุลชีพ synergic combinationsshowed และโดยการทดสอบภายใต้เงื่อนไขที่เพื่อตรวจสอบความแตกต่างระหว่าง clarithromycin effectsof การรักษาเพียงอย่างเดียวและ clarithromycin ร่วมกับ plaunotol ค่าพีของ <0.05 มีการพิจารณาอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ.
resultsanddiscussionmic50/mic90values (mg / l) ของ plaunotol, clarithromycin และ amoxicillinagainst 14h สายพันธุ์ pylori เป็น 3.13/12.5, 0.006 / 0.025 และ 0.1/0.1 ตามลำดับ plaunotol-clarithromycin และ plaunotol-AMOXICILLIN combinationsdemonstrated
interactionswere ต้านจุลชีพการประเมินโดยวุ้น plaunotol titration.4 ตรวจสอบบอร์ด clarithromycin และ AMOXICILLIN ถูกกลืนหายไปใน DIMETHYLSULPHOXIDE, เมทานอล anddistilled น้ำตามลำดับ เชื้อตั้งต้นที่ถูกจัดทำขึ้นโดยระงับการเจริญเติบโตจากแผ่น BHI วุ้นในเลือดเทียบเท่าน้ำเกลือทางสรีรวิทยา 2.0 MCFARLAND มาตรฐาน (108 โคโลนี / มล. )เชื้อสุดท้ายของ 105 โคโลนี / จุด wasappliedusing อัตโนมัติ inoculator (dai นิปปอน seiki ร่วม จำกัด ., เกียวโต, ญี่ปุ่น) experimentswere ดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่าและ plateswere ทั้งหมดบ่ม 3 daysat 35 องศาเซลเซียสภายใต้เงื่อนไข microaerophilic ความเข้มข้นที่ยับยั้งเศษส่วน (FICS) ถูกคำนวณ asfollows:FIC = (ไมค์ของยาเสพติด incombination / ไมค์ของยาเสพติดเพียงอย่างเดียว) (ไมค์ของขยาเสพติดในการรวมกัน / ไมค์ของยาเสพติดเพียงอย่างเดียวข)
FIC indiceswere ตีความ asfollows: ≤ 0.5, พลัง;
> 0.5-1, สาร;> 1 -4.0 ไม่แยแส;> 4 antagonism.4
เวลาฆ่าทดสอบ h
SS1 pylori เลี้ยงค้างคืนใน 1 มิลลิลิตร (c.2 × 108 โคโลนี / มิลลิลิตร) น้ำซุป Brucella (dickinsonandcompany Becton, cockeys-ville, MD,usa) เสริมด้วย 2% ความร้อนอนุภาคซีรั่มของทารกในครรภ์วัว (น้ำซุป FBS) มีเชื้อลงในขวด 50 มล. ที่มี 24 มล. ของยาเสพติดเสริมด้วยสื่อเดียวกัน concentrationsused มีไมค์ของ plaunotol และ 0.5 ×ไมค์ของ clarithromycin หรือ 0.5 ×ไมค์ของยาใน ชีวิต countswere ดำเนินการหลังการบ่มที่ 37 °ปั่นแบบหมุน Cona หมุนที่ 110 รอบต่อนาที ที่ 0, 6, 12,24 และ 36 ชั่วโมงตัวอย่างที่ถูกถอดออกและเจือจาง 10 เท่าถูกชุบเพื่อ BHI แผ่นวุ้นเลือด การทดลองครั้งนี้ได้รับการดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า ข้อมูลที่ได้มาวิเคราะห์โดยการกำหนดนับได้ว่าให้ผลในการลดΔlog10โคโลนี / มล. หลังจาก 36 ชั่วโมงของการบ่ม พลัง wasdefined asa ≥ 2log10 โคโลนี / ml ลดลงในการนับทำงานได้กับการรวมกันของยาเสพติดที่ในการเปรียบเทียบกับตัวแทนใช้งานมากที่สุด alone.5 กิจกรรมเสริมศักยภาพ wasdefined นับ asa ของ 0-1.9 log10 CFU / ml ด้านล่างหัวเชื้อเริ่มต้นหลังจากคอมรวมกัน treatment.5
สัตว์หกสัปดาห์อายุเพศชาย C57BL / 6 หนูที่ได้รับ จาก charlesriver นิ้ว (คานากาว่า, ญี่ปุ่น) หนูได้รับการเลี้ยงดูอาหารเชิงพาณิชย์ (FR-2 ฟาร์ม Funabashi, จังหวัดชิ, ญี่ปุ่น) และได้รับการโฆษณา libitum น้ำสัตว์ทั้งหมด experimentswere ดำเนินการตาม guidelinesprovided โดยการดูแลสัตว์สถาบันและการใช้งานของคณะกรรมการร่วม sankyo., ltd.
เหนี่ยวนำของการติดเชื้อเอช pylori h
pylori SS1 wascultured ในน้ำซุป FBS ในเครื่องปั่นแบบหมุนที่ 110 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่ 37 องศาเซลเซียส หนูได้รับเชื้อปากเปล่าด้วย 1.5ml ของ suspensionof แบคทีเรีย 2 × 108cfu/ml หลังจาก 1 วันของการอดอาหารการรักษาเริ่ม 5 วันหลังจากการติดเชื้อรวมกัน
บำบัด plaunotol ก็เลือนหายไปในน้ำกลั่นเสริมด้วย 0.4% ทวี 80. (ทางออกที่ทวี.. ร่วมเคมีคัน, inc, โตเกียวประเทศญี่ปุ่น) clarithromycin และ AMOXICILLIN ถูก Sus-pended 0.5% โซเดียมคาร์บอกซีเซลลูโลส (CMC แก้ปัญหาร่วมเคมีคัน., inc.) หนูที่ได้รับ 30 หรือ 100 mg / kg / ปริมาณของ plaunotol,หรือ 20 mg / kg / ปริมาณของ clarithro-mycinoramoxicillinoncedailyfor5days.additionaladminis trationsincluded-30 หรือ 100 mg / kg / ปริมาณของ plaunotol กับ 20 mg / kg / ยา clarithromycin, และ 30 หรือ 100 mg / kg / ปริมาณของ plaunotol กับ 20 mg / / กก. ปริมาณของยาใน หนูที่ได้รับการควบคุมเข็มช่องปากของ cmc และการแก้ปัญหาทวี.
ผล clarithromycin เจียดของ plaunotol ในร่างกาย
การประเมินผล clarithromycin เจียดของ plaunotol ในร่างกายหนูเป็นยา 30 mg / kg / ปริมาณของ plaunotol plus10 mg / kg / ยา clarithromycin, หรือ 10, 20, 30 หรือ 40 mg / kg / ยา clarithromycin คนเดียววันละครั้ง เป็นเวลา 5 วัน.
วัดนับชั่วโมงการทำงานของ pylori ในท้องของหนู
หลังจากที่การบริหารงานสุดท้ายที่หนูได้รับการอดอาหารเป็นเวลา 1 วันฆ่าตัวอย่างและได้รับโดย incising เยื่อเมือกของกระเพาะอาหาร หลังจากผสมยางตัวอย่างที่มี 2 มิลลิลิตรของน้ำซุป FBS, aliquotsfrom 100μl 10 เท่า dilutionswere อนุกรมเชื้อเข้าสู่ skirrow'sagar แก้ไข plates.3 แผ่นถูกบ่มแล้วที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 7 daysin สภาพแวดล้อม microaerophilic และ coloniesof ชั่วโมง pylori นับ ปริมาณแบคทีเรียจะแสดงเป็นโคโลนีต่อกระเพาะอาหาร
.การวิเคราะห์ทางสถิติ
การวิเคราะห์ทางสถิติได้ดำเนินการโดยสองทางวิเคราะห์เพื่อตรวจสอบว่ากิจกรรมต้านจุลชีพ synergic combinationsshowed และโดยการทดสอบภายใต้เงื่อนไขที่เพื่อตรวจสอบความแตกต่างระหว่าง clarithromycin effectsof การรักษาเพียงอย่างเดียวและ clarithromycin ร่วมกับ plaunotol ค่าพีของ <0.05 มีการพิจารณาอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ.
resultsanddiscussionmic50/mic90values (mg / l) ของ plaunotol, clarithromycin และ amoxicillinagainst 14h สายพันธุ์ pylori เป็น 3.13/12.5, 0.006 / 0.025 และ 0.1/0.1 ตามลำดับ plaunotol-clarithromycin และ plaunotol-AMOXICILLIN combinationsdemonstrated
การแปล กรุณารอสักครู่..
วิธี Chequerboard
interactionswere จุลินทรีย์ที่ประเมิน โดย titration.4 บอร์ด chequer agar Plaunotol, clarithromycin และ amoxicillin ได้ละลายใน dimethylsulphoxide เม anddistilled น้ำ ตามลำดับ Inocula ถูกจัดทำ โดยระงับการเจริญเติบโตจากแผ่น BHI agar เลือดในน้ำเกลือ physiological เทียบเท่ากับตัว 2.0 McFarland มาตรฐาน (108 cfu/mL) สุดท้าย inoculum ของ 105 cfu/จุด wasappliedusing ที่ Inoculator อัตโนมัติ (Dai Nippon Seiki Co. Ltd เกียวโต ญี่ปุ่น) Experimentswere ดำเนินการใน triplicate และ incubated plateswere ทั้งหมดสำหรับ daysat 3 35° C ภายใต้เงื่อนไข microaerophilic ลิปกลอสไข concentrations(FICs) เศษถูกคำนวณ asfollows: FIC = (MIC ของยา A incombination/MIC ของยาได้คนเดียว) (MIC ของยา B ใน ชุด/MIC ของยาคนเดียว B)
FIC indiceswere แปล asfollows: ≤0.5, synergy;
> 0.5–1 การบวก > 1–4.0 ท่าน > ทดสอบ antagonism.4
Time–kill 4
H. pylori SS1 cultured ค้างคืนใน 1 mL (c.2× 108 cfu/mL) ของ Brucella ซุป (Becton DickinsonandCompany วิลล์ Cockeys, MD สหรัฐอเมริกา) เสริม ด้วย 2% ยกเลิกร้อนครรภ์วัวรั่ม (FBS ซุป) มี inoculated เป็นหนาว 50 mL ที่ประกอบด้วย 24 mL ของยาเสริม ด้วยสื่อเดียวกัน Concentrationsused มี MIC plaunotol และ 0.5 × MIC clarithromycin หรือ 0.5 × MIC ของ amoxicillin Countswere ชีวิตดำเนินหลังจากบ่มที่เชค 37 ° Cona gyratory เกอร์หมุนที่ 110 รอบต่อนาที ที่ 0, 6, 12 24 และ 36 h ตัวอย่างถูกเอาออก และ dilutions 10-fold ประจำถูกชุบระบบแผ่นเลือด agar BHI การทดลองนี้ถูกดำเนินใน triplicate ข้อมูลที่ได้ถูก analysed โดยกำหนดนับได้ที่ให้ผลลด ∆log10 cfu/mL หลังจาก 36 h ของคณะทันตแพทยศาสตร์ Synergy wasdefined asa ≥2log10 cfu/mL ลดจำนวนการทำงานได้ด้วยชุดยา เมื่อเปรียบเทียบกับ alone.5 ตัวแทนจำหน่ายอยู่มากที่สุดการบวกกิจกรรม wasdefined asa ชีวิตจำนวน 0–1.9 log10 cfu/mL ใต้ inoculum เริ่มต้นหลังจาก com bination treatment.5
Animals
Six สัปดาห์อายุชาย C57BL/6 หนูได้รับมาจาก CharlesRiver Inc. (คานางาวะ ญี่ปุ่น) หนูถูกเลี้ยงอาหารเชิงพาณิชย์ (FR-2 ฟาร์มฟุนะ ชิบะ ญี่ปุ่น) และ ad libitum น้ำ Experimentswere สัตว์ทั้งหมดดำเนินตาม guidelinesprovided สัตว์ดูแลสถาบันและใช้คณะกรรมการของ Sankyo Co., Ltd.
เหนี่ยวนำติดเชื้อ H. pylori ด้วย
H. pylori SS1 wascultured ใน FBS ซุปในเชคเกอร์ gyratory ที่ 110 rpm ใน 24 ชมที่ 37 องศาเซลเซียส เนื้อหาหนูได้ inoculated กับ 1.5mL ของแบคทีเรีย suspensionof 2 × 108cfu/mL หลังจากการถือศีลอด 1 วัน บำบัดเริ่ม 5 วันหลังจากการติดเชื้อ
ชุดบำบัด
Plaunotol ที่ละลายในน้ำกลั่นที่เสริม ด้วย 0.4% Tween 80 (Tween โซลูชัน คันเคมี Co., Inc. โตเกียว ญี่ปุ่น) Clarithromycin และ amoxicillin มี sus pended ใน 0.5% โซเดียม carboxymethyl เซลลูโลส (CMC โซลูชัน คันเคมี Co., Inc.) หนูได้รับ 30 หรือ 100 มก./กก./ยาของ plaunotol หรือ 20 มิลลิกรัม/กิโลกรัม/ยาของ clarithro-mycinoramoxicillinoncedailyfor5daysAdditionaladminis-trationsincluded 30 หรือ 100 มก./กก./ยาของ plaunotol ด้วย 20 มก./กก./ยา clarithromycin และ 30 หรือ 100 มก./กก./ยาของ plaunotol กับ 20 มิลลิกรัม/กิโลกรัม/ยาของ amoxicillin ควบคุมหนูรับปากจัดการของ CMC และ Tween โซลูชั่น
Clarithromycin sparing ผลของสัตว์ทดลองใน plaunotol
ประเมินผล clarithromycin sparing ของ plaunotol ในสัตว์ทดลอง หนูถูกปกครอง 30 มก./กก./ยา plaunotol plus10/กก./มิลลิกรัม ของ clarithromycin หรือ 10, 20, 30 หรือ 40 มก./กก./ยาของ clarithromycin คนเดียวครั้งเดียวทุกวันสำหรับ 5 วัน
วัดจำนวน H. pylori ใน stomachs ของหนูได้
หลังจากจัดการขั้นสุดท้าย หนูถูกอด 1 วันฆ่า และตัวอย่างได้รับมา โดย incising mucosa ของกระเพาะอาหาร หลัง homogenizing ตัวอย่าง มี 2 mL ของ FBS ซุป 100µL aliquotsfrom dilutionswere 10-fold ประจำ inoculated บน plates.3 Skirrow'sagar ปรับเปลี่ยนแผ่นได้แล้ว incubated ที่ 37° C สำหรับ 7 daysin นับเป็น microaerophilic และสภาพแวดล้อม coloniesof H. pylori จำนวนแบคทีเรียจะแสดงเป็น cfu ต่อกระเพาะ
วิเคราะห์ทางสถิติ
ทำการวิเคราะห์ทางสถิติ โดยการวิเคราะห์ความแปรปรวนสองทางเพื่อตรวจสอบว่ากิจกรรม synergic combinationsshowed จุลินทรีย์ และ โดยการทดสอบของ Dunnett เพื่อดูความแตกต่างระหว่างคนเดียว effectsof ยา clarithromycin และ clarithromycin ร่วมกับ plaunotol ค่า P ของ < ได้ถืออย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ 0.05 การ
Resultsanddiscussion
MIC50/MIC90values(mg/L) plaunotol, clarithromycin และ amoxicillinagainst H. ที่ 14 สายพันธุ์ pylori ถูก 3.13/12.5,0.006/ 0.025 และ 0.1/0.1 ตามลำดับ Combinationsdemonstrated plaunotol–clarithromycin และ plaunotol–amoxicillin
interactionswere จุลินทรีย์ที่ประเมิน โดย titration.4 บอร์ด chequer agar Plaunotol, clarithromycin และ amoxicillin ได้ละลายใน dimethylsulphoxide เม anddistilled น้ำ ตามลำดับ Inocula ถูกจัดทำ โดยระงับการเจริญเติบโตจากแผ่น BHI agar เลือดในน้ำเกลือ physiological เทียบเท่ากับตัว 2.0 McFarland มาตรฐาน (108 cfu/mL) สุดท้าย inoculum ของ 105 cfu/จุด wasappliedusing ที่ Inoculator อัตโนมัติ (Dai Nippon Seiki Co. Ltd เกียวโต ญี่ปุ่น) Experimentswere ดำเนินการใน triplicate และ incubated plateswere ทั้งหมดสำหรับ daysat 3 35° C ภายใต้เงื่อนไข microaerophilic ลิปกลอสไข concentrations(FICs) เศษถูกคำนวณ asfollows: FIC = (MIC ของยา A incombination/MIC ของยาได้คนเดียว) (MIC ของยา B ใน ชุด/MIC ของยาคนเดียว B)
FIC indiceswere แปล asfollows: ≤0.5, synergy;
> 0.5–1 การบวก > 1–4.0 ท่าน > ทดสอบ antagonism.4
Time–kill 4
H. pylori SS1 cultured ค้างคืนใน 1 mL (c.2× 108 cfu/mL) ของ Brucella ซุป (Becton DickinsonandCompany วิลล์ Cockeys, MD สหรัฐอเมริกา) เสริม ด้วย 2% ยกเลิกร้อนครรภ์วัวรั่ม (FBS ซุป) มี inoculated เป็นหนาว 50 mL ที่ประกอบด้วย 24 mL ของยาเสริม ด้วยสื่อเดียวกัน Concentrationsused มี MIC plaunotol และ 0.5 × MIC clarithromycin หรือ 0.5 × MIC ของ amoxicillin Countswere ชีวิตดำเนินหลังจากบ่มที่เชค 37 ° Cona gyratory เกอร์หมุนที่ 110 รอบต่อนาที ที่ 0, 6, 12 24 และ 36 h ตัวอย่างถูกเอาออก และ dilutions 10-fold ประจำถูกชุบระบบแผ่นเลือด agar BHI การทดลองนี้ถูกดำเนินใน triplicate ข้อมูลที่ได้ถูก analysed โดยกำหนดนับได้ที่ให้ผลลด ∆log10 cfu/mL หลังจาก 36 h ของคณะทันตแพทยศาสตร์ Synergy wasdefined asa ≥2log10 cfu/mL ลดจำนวนการทำงานได้ด้วยชุดยา เมื่อเปรียบเทียบกับ alone.5 ตัวแทนจำหน่ายอยู่มากที่สุดการบวกกิจกรรม wasdefined asa ชีวิตจำนวน 0–1.9 log10 cfu/mL ใต้ inoculum เริ่มต้นหลังจาก com bination treatment.5
Animals
Six สัปดาห์อายุชาย C57BL/6 หนูได้รับมาจาก CharlesRiver Inc. (คานางาวะ ญี่ปุ่น) หนูถูกเลี้ยงอาหารเชิงพาณิชย์ (FR-2 ฟาร์มฟุนะ ชิบะ ญี่ปุ่น) และ ad libitum น้ำ Experimentswere สัตว์ทั้งหมดดำเนินตาม guidelinesprovided สัตว์ดูแลสถาบันและใช้คณะกรรมการของ Sankyo Co., Ltd.
เหนี่ยวนำติดเชื้อ H. pylori ด้วย
H. pylori SS1 wascultured ใน FBS ซุปในเชคเกอร์ gyratory ที่ 110 rpm ใน 24 ชมที่ 37 องศาเซลเซียส เนื้อหาหนูได้ inoculated กับ 1.5mL ของแบคทีเรีย suspensionof 2 × 108cfu/mL หลังจากการถือศีลอด 1 วัน บำบัดเริ่ม 5 วันหลังจากการติดเชื้อ
ชุดบำบัด
Plaunotol ที่ละลายในน้ำกลั่นที่เสริม ด้วย 0.4% Tween 80 (Tween โซลูชัน คันเคมี Co., Inc. โตเกียว ญี่ปุ่น) Clarithromycin และ amoxicillin มี sus pended ใน 0.5% โซเดียม carboxymethyl เซลลูโลส (CMC โซลูชัน คันเคมี Co., Inc.) หนูได้รับ 30 หรือ 100 มก./กก./ยาของ plaunotol หรือ 20 มิลลิกรัม/กิโลกรัม/ยาของ clarithro-mycinoramoxicillinoncedailyfor5daysAdditionaladminis-trationsincluded 30 หรือ 100 มก./กก./ยาของ plaunotol ด้วย 20 มก./กก./ยา clarithromycin และ 30 หรือ 100 มก./กก./ยาของ plaunotol กับ 20 มิลลิกรัม/กิโลกรัม/ยาของ amoxicillin ควบคุมหนูรับปากจัดการของ CMC และ Tween โซลูชั่น
Clarithromycin sparing ผลของสัตว์ทดลองใน plaunotol
ประเมินผล clarithromycin sparing ของ plaunotol ในสัตว์ทดลอง หนูถูกปกครอง 30 มก./กก./ยา plaunotol plus10/กก./มิลลิกรัม ของ clarithromycin หรือ 10, 20, 30 หรือ 40 มก./กก./ยาของ clarithromycin คนเดียวครั้งเดียวทุกวันสำหรับ 5 วัน
วัดจำนวน H. pylori ใน stomachs ของหนูได้
หลังจากจัดการขั้นสุดท้าย หนูถูกอด 1 วันฆ่า และตัวอย่างได้รับมา โดย incising mucosa ของกระเพาะอาหาร หลัง homogenizing ตัวอย่าง มี 2 mL ของ FBS ซุป 100µL aliquotsfrom dilutionswere 10-fold ประจำ inoculated บน plates.3 Skirrow'sagar ปรับเปลี่ยนแผ่นได้แล้ว incubated ที่ 37° C สำหรับ 7 daysin นับเป็น microaerophilic และสภาพแวดล้อม coloniesof H. pylori จำนวนแบคทีเรียจะแสดงเป็น cfu ต่อกระเพาะ
วิเคราะห์ทางสถิติ
ทำการวิเคราะห์ทางสถิติ โดยการวิเคราะห์ความแปรปรวนสองทางเพื่อตรวจสอบว่ากิจกรรม synergic combinationsshowed จุลินทรีย์ และ โดยการทดสอบของ Dunnett เพื่อดูความแตกต่างระหว่างคนเดียว effectsof ยา clarithromycin และ clarithromycin ร่วมกับ plaunotol ค่า P ของ < ได้ถืออย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ 0.05 การ
Resultsanddiscussion
MIC50/MIC90values(mg/L) plaunotol, clarithromycin และ amoxicillinagainst H. ที่ 14 สายพันธุ์ pylori ถูก 3.13/12.5,0.006/ 0.025 และ 0.1/0.1 ตามลำดับ Combinationsdemonstrated plaunotol–clarithromycin และ plaunotol–amoxicillin
การแปล กรุณารอสักครู่..
interactionswere checkrboard วิธีการ
ชนิดโดยประเมินจากสาหร่ายทะเล plaunotol ตาหมากรุก - บอร์ด titration. 4 clarithromycin และ amoxicillin ก็ละลายได้ในน้ำโรงงานเมธานอล dimethylsulphoxide anddistilled ตามลำดับ inocula ได้เตรียมความพร้อมโดยการพักการขยายตัวออกจากแผ่นทำความร้อนสาหร่ายทะเลเลือด bhi ในมาตรฐาน McFarland เทียบเท่ากับ 2.0 น้ำเกลือทางสรีรวิทยาจากสนามแม่เหล็ก( 108 มล. CFU ,/)inoculum สุดท้ายของ 105 CFU ,/ wasappliedusing จุด auto-inoculator ( Dai Nippon seiki Co ., Ltd เกียวโตสคูลประเทศญี่ปุ่น) experimentswere ดำเนินการในเป็นสามและ incubated plateswere ทั้งหมดสำหรับ 3 C 35 ° C daysat ภายใต้ เงื่อนไข microaerophilic เศษเสี้ยวความเข้มข้น inhibitory ( fics )ได้คำนวณ asfollowsFIC =(ไมโครโฟนของยาที่ incombination /ไมโครโฟนของการให้ยาที่คนเดียว)(ไมโครโฟนของยา B ในการผสมผสาน/ไมโครโฟนของการให้ยา B ตามลำพัง)
FIC indiceswere ตีความ asfollows : ≤0.5 ,ผนึกกำลังกัน;
> 0.5 - 1 ,สาร;> 1 - 4.0 ,ทำเป็นทองไม่รู้ร้อน;> 4 , antagonism. 4
เวลา - ฆ่าสอบ
H . pylori SS 1 วัฒนธรรมพักค้างคืนใน 1 มล.( C 2 × 108 CFU ,/มล.)ของ brucella น้ำซุป( becton dickinsonandcompany , cockeys - Ville , MD ,USA )ซึ่งเพิ่มเติมพร้อมด้วย 2% ความร้อน - ป้อมปราการหลังจากเฝ้าระวังและติดตามสัญญาณชีพทารกเจลมาสก์มอยเจอร์ไรเซอร์(ซุป FBS สำหรับผู้ป่วยเบาหวาน)เป็น inoculated เข้าสู่ 50 มล.กระติกน้ำที่ประกอบด้วย 24 มล.และเสริมยาพร้อมด้วยขนาดกลางเดียวกัน concentrationsused ที่มีไมโครโฟนของ plaunotol และ 0.5 MIC ×ไมโครโฟนของ clarithromycin หรือ 0.5 ×ของ amoxicillin countswere ความอยู่รอดไปหลังจากผู้ประกอบการเครื่องเขย่าที่หมุน cona 37 °หมุนได้ที่ 110 รอบต่อนาที ที่ 0 , 6 , 1224 และ 36 ชั่วโมงตัวอย่างที่ได้ถูกลบออกและ dilutions Serial 10 เท่าเป็นตัวเสียบเคลือบทองบนแผ่นทำความร้อน bhi สาหร่ายทะเลเลือด การทดลองนี้เป็นการกระทำที่เป็นสาม ข้อมูลได้รับก็วิเคราะห์ได้โดยการกำหนดจำนวนที่ลดลงส่งผลต่อ ∆log 10 CFU ,/ ML หลังจาก 36 ชั่วโมงของผู้ประกอบการ ผนึกกำลังกัน wasdefined ลดลง 2 ล็อกอินเข้าสู่ 10 CFU ,/ ML อาสา≥ในจำนวนที่ได้พร้อมด้วยการผสมผสานให้ยาในการเปรียบเทียบกับที่มากที่สุดของ Agent alone. 5 บวกกิจกรรม wasdefined อาสาอย่างรอบคอบจำนวน 0 - 1.9 ล็อกอินเข้าสู่ 10 CFU ,/ ML ด้านล่างโดยเริ่ม inoculum หลังจาก COM - bination treatment. 5
ซึ่งจะช่วยสัตว์หก - สัปดาห์ - เก่าตัวผู้ C 57 BL / 6 หนูได้จาก charlesriver , Inc .(นางาโนะ,ญี่ปุ่น) หนูเป็นอาหารกินอาหารที่ทางการค้า( FR 2 funabashi ฟาร์มชิบะประเทศญี่ปุ่น)และให้น้ำตาม อำเภอ ใจทั้งหมดสัตว์ experimentswere ไปตามที่ guidelinesprovided โดยที่สถาบันสัตว์ดูแลและใช้คณะกรรมการของ sankyo . co . th , Ltd .
:เตาแม่เหล็กไฟฟ้าของการติดเชื้อด้วย H . H . pylori pylori
SS 1 wascultured FBS สำหรับผู้ป่วยเบาหวานในน้ำซุปที่หมุนเครื่องเขย่าที่ 110 รอบต่อนาทีสำหรับ 24 ชั่วโมงที่ 37 ° C เมาส์อยู่ด้วยปาก inoculated พร้อมด้วย 1.5 มล.ของเชื้อแบคทีเรีย suspensionof 2 x 108 CFU ,/ ML หลังจาก 1 วันของการอดอาหารการบำบัดด้วยการเริ่ม 5 วันหลังจากการติดเชื้อ.
การผสมผสานการบำบัดโรคด้วย
plaunotol ก็ละลายได้ในน้ำกลั่นเพิ่มเติมพร้อมด้วย 0.4% ส่วนกลาง 80 (โซลูชันกลิ้ง"สารเคมี. co . th , Inc .กรุงโตเกียวประเทศญี่ปุ่น) amoxicillin และ clarithromycin เป็น SUS - pended ในเซลลูโลส carboxymethyl โซเดียม 0.5% (โซลูชันเจ๋อหมิ"เคมิคอล. co . th , Inc .) เมาส์ที่ได้รับ 30 หรือ 100 ยา/กก./มก.ของ plaunotolหรือ 20 มก./กก./ขนาดของ clarithro - mycinoramoxicillinoncedailyfor 5 วัน. additionaladminis - trationsincluded 30 หรือ 100 มก./กก./ขนาดของ plaunotol พร้อมด้วย 20 มก./กก./ขนาดของ clarithromycin และ 30 หรือ 100 มก./กก./ขนาดของ plaunotol พร้อมด้วย 20 มก./กก./ขนาดของ amoxicillin . การควบคุมเมาส์ได้รับผลกระทบด้านพัสดุด้วยวาจาของเจ๋อหมิและโซลูชันส่วนกลาง.
clarithromycin - การสำรองของ plaunotol ในไปยังสถานี Vivo
ในการประเมินที่ clarithromycin - ,การสำรองหน่วยความจำ,ผลของ plaunotol ในไปยังสถานี Vivo ,หนูก็บริหารงาน 30 มก./กก./ขนาดของ plaunotol รวมถึง 10 มก./กก./ขนาดของ clarithromycin ,หรือ 10 , 20 , 30 หรือ 40 มก./กก./ขนาดของ clarithromycin ตามลำพังเมื่อทุกวันสำหรับ 5 วัน.
การวัดที่ได้จำนวนของ H . pylori ในที่มีกระเพาะอาหารของหนู
หลังจากที่ครั้งสุดท้ายการดูแลที่หนูก็อดอาหารสำหรับ 1 วัน,ฆ่า,ตัวอย่างและได้รับการรับรองจาก incising mucosa ในท้องทำให้ หลังจากการผสมให้เข้ากันตัวอย่างพร้อมด้วย 2 มล. FBS สำหรับผู้ป่วยเบาหวานของน้ำซุป, 100 μ L aliquotsfrom 10 - พับ Serial dilutionswere inoculated เข้าแก้ไข skirrow 'บนที่ตั้งที่เหมาะสมตั้งอยู่ plates. 3 แผ่นความร้อนอยู่แล้ว incubated ที่ 37 ° C สำหรับ 7 daysin ที่ microaerophilic สภาพแวดล้อม และ coloniesof H . pylori นับ. นับถอยหลังฆ่าเชื้อแบคมีเรียมีหน่วยเป็น CFU ,ต่อกระเพาะอาหาร.
การวิเคราะห์ข้อมูลทางสถิติ
ซึ่งจะช่วยให้การวิเคราะห์ข้อมูลทางสถิติได้ดำเนินการโดย anova แบบสองทางเพื่อตรวจสอบว่ากลุ่มยาปฎิชีวนะชนิดที่ combinationsshowed synergic กิจกรรมและการทดสอบของ dunnett เพื่อกำหนดความแตกต่างระหว่าง effectsof เพื่อการบำบัดโรคที่ clarithromycin ตามลำพังและ clarithromycin ร่วมกับ plaunotol ค่าของ P < 0.05 เป็นการพิจารณาอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ.
resultsanddiscussionMIC 50 / 90 ค่าไมโครโฟน(มก./ลิตร)ในด้านพันธุ์ amoxicillinagainst 14 H . pylori และ clarithromycin plaunotol เป็น 3.13/12.50.0060.025 0.1/0.1 และตามลำดับ combinationsdemonstrated plaunotol - clarithromycin และ plaunotol - amoxicillin ได้
ชนิดโดยประเมินจากสาหร่ายทะเล plaunotol ตาหมากรุก - บอร์ด titration. 4 clarithromycin และ amoxicillin ก็ละลายได้ในน้ำโรงงานเมธานอล dimethylsulphoxide anddistilled ตามลำดับ inocula ได้เตรียมความพร้อมโดยการพักการขยายตัวออกจากแผ่นทำความร้อนสาหร่ายทะเลเลือด bhi ในมาตรฐาน McFarland เทียบเท่ากับ 2.0 น้ำเกลือทางสรีรวิทยาจากสนามแม่เหล็ก( 108 มล. CFU ,/)inoculum สุดท้ายของ 105 CFU ,/ wasappliedusing จุด auto-inoculator ( Dai Nippon seiki Co ., Ltd เกียวโตสคูลประเทศญี่ปุ่น) experimentswere ดำเนินการในเป็นสามและ incubated plateswere ทั้งหมดสำหรับ 3 C 35 ° C daysat ภายใต้ เงื่อนไข microaerophilic เศษเสี้ยวความเข้มข้น inhibitory ( fics )ได้คำนวณ asfollowsFIC =(ไมโครโฟนของยาที่ incombination /ไมโครโฟนของการให้ยาที่คนเดียว)(ไมโครโฟนของยา B ในการผสมผสาน/ไมโครโฟนของการให้ยา B ตามลำพัง)
FIC indiceswere ตีความ asfollows : ≤0.5 ,ผนึกกำลังกัน;
> 0.5 - 1 ,สาร;> 1 - 4.0 ,ทำเป็นทองไม่รู้ร้อน;> 4 , antagonism. 4
เวลา - ฆ่าสอบ
H . pylori SS 1 วัฒนธรรมพักค้างคืนใน 1 มล.( C 2 × 108 CFU ,/มล.)ของ brucella น้ำซุป( becton dickinsonandcompany , cockeys - Ville , MD ,USA )ซึ่งเพิ่มเติมพร้อมด้วย 2% ความร้อน - ป้อมปราการหลังจากเฝ้าระวังและติดตามสัญญาณชีพทารกเจลมาสก์มอยเจอร์ไรเซอร์(ซุป FBS สำหรับผู้ป่วยเบาหวาน)เป็น inoculated เข้าสู่ 50 มล.กระติกน้ำที่ประกอบด้วย 24 มล.และเสริมยาพร้อมด้วยขนาดกลางเดียวกัน concentrationsused ที่มีไมโครโฟนของ plaunotol และ 0.5 MIC ×ไมโครโฟนของ clarithromycin หรือ 0.5 ×ของ amoxicillin countswere ความอยู่รอดไปหลังจากผู้ประกอบการเครื่องเขย่าที่หมุน cona 37 °หมุนได้ที่ 110 รอบต่อนาที ที่ 0 , 6 , 1224 และ 36 ชั่วโมงตัวอย่างที่ได้ถูกลบออกและ dilutions Serial 10 เท่าเป็นตัวเสียบเคลือบทองบนแผ่นทำความร้อน bhi สาหร่ายทะเลเลือด การทดลองนี้เป็นการกระทำที่เป็นสาม ข้อมูลได้รับก็วิเคราะห์ได้โดยการกำหนดจำนวนที่ลดลงส่งผลต่อ ∆log 10 CFU ,/ ML หลังจาก 36 ชั่วโมงของผู้ประกอบการ ผนึกกำลังกัน wasdefined ลดลง 2 ล็อกอินเข้าสู่ 10 CFU ,/ ML อาสา≥ในจำนวนที่ได้พร้อมด้วยการผสมผสานให้ยาในการเปรียบเทียบกับที่มากที่สุดของ Agent alone. 5 บวกกิจกรรม wasdefined อาสาอย่างรอบคอบจำนวน 0 - 1.9 ล็อกอินเข้าสู่ 10 CFU ,/ ML ด้านล่างโดยเริ่ม inoculum หลังจาก COM - bination treatment. 5
ซึ่งจะช่วยสัตว์หก - สัปดาห์ - เก่าตัวผู้ C 57 BL / 6 หนูได้จาก charlesriver , Inc .(นางาโนะ,ญี่ปุ่น) หนูเป็นอาหารกินอาหารที่ทางการค้า( FR 2 funabashi ฟาร์มชิบะประเทศญี่ปุ่น)และให้น้ำตาม อำเภอ ใจทั้งหมดสัตว์ experimentswere ไปตามที่ guidelinesprovided โดยที่สถาบันสัตว์ดูแลและใช้คณะกรรมการของ sankyo . co . th , Ltd .
:เตาแม่เหล็กไฟฟ้าของการติดเชื้อด้วย H . H . pylori pylori
SS 1 wascultured FBS สำหรับผู้ป่วยเบาหวานในน้ำซุปที่หมุนเครื่องเขย่าที่ 110 รอบต่อนาทีสำหรับ 24 ชั่วโมงที่ 37 ° C เมาส์อยู่ด้วยปาก inoculated พร้อมด้วย 1.5 มล.ของเชื้อแบคทีเรีย suspensionof 2 x 108 CFU ,/ ML หลังจาก 1 วันของการอดอาหารการบำบัดด้วยการเริ่ม 5 วันหลังจากการติดเชื้อ.
การผสมผสานการบำบัดโรคด้วย
plaunotol ก็ละลายได้ในน้ำกลั่นเพิ่มเติมพร้อมด้วย 0.4% ส่วนกลาง 80 (โซลูชันกลิ้ง"สารเคมี. co . th , Inc .กรุงโตเกียวประเทศญี่ปุ่น) amoxicillin และ clarithromycin เป็น SUS - pended ในเซลลูโลส carboxymethyl โซเดียม 0.5% (โซลูชันเจ๋อหมิ"เคมิคอล. co . th , Inc .) เมาส์ที่ได้รับ 30 หรือ 100 ยา/กก./มก.ของ plaunotolหรือ 20 มก./กก./ขนาดของ clarithro - mycinoramoxicillinoncedailyfor 5 วัน. additionaladminis - trationsincluded 30 หรือ 100 มก./กก./ขนาดของ plaunotol พร้อมด้วย 20 มก./กก./ขนาดของ clarithromycin และ 30 หรือ 100 มก./กก./ขนาดของ plaunotol พร้อมด้วย 20 มก./กก./ขนาดของ amoxicillin . การควบคุมเมาส์ได้รับผลกระทบด้านพัสดุด้วยวาจาของเจ๋อหมิและโซลูชันส่วนกลาง.
clarithromycin - การสำรองของ plaunotol ในไปยังสถานี Vivo
ในการประเมินที่ clarithromycin - ,การสำรองหน่วยความจำ,ผลของ plaunotol ในไปยังสถานี Vivo ,หนูก็บริหารงาน 30 มก./กก./ขนาดของ plaunotol รวมถึง 10 มก./กก./ขนาดของ clarithromycin ,หรือ 10 , 20 , 30 หรือ 40 มก./กก./ขนาดของ clarithromycin ตามลำพังเมื่อทุกวันสำหรับ 5 วัน.
การวัดที่ได้จำนวนของ H . pylori ในที่มีกระเพาะอาหารของหนู
หลังจากที่ครั้งสุดท้ายการดูแลที่หนูก็อดอาหารสำหรับ 1 วัน,ฆ่า,ตัวอย่างและได้รับการรับรองจาก incising mucosa ในท้องทำให้ หลังจากการผสมให้เข้ากันตัวอย่างพร้อมด้วย 2 มล. FBS สำหรับผู้ป่วยเบาหวานของน้ำซุป, 100 μ L aliquotsfrom 10 - พับ Serial dilutionswere inoculated เข้าแก้ไข skirrow 'บนที่ตั้งที่เหมาะสมตั้งอยู่ plates. 3 แผ่นความร้อนอยู่แล้ว incubated ที่ 37 ° C สำหรับ 7 daysin ที่ microaerophilic สภาพแวดล้อม และ coloniesof H . pylori นับ. นับถอยหลังฆ่าเชื้อแบคมีเรียมีหน่วยเป็น CFU ,ต่อกระเพาะอาหาร.
การวิเคราะห์ข้อมูลทางสถิติ
ซึ่งจะช่วยให้การวิเคราะห์ข้อมูลทางสถิติได้ดำเนินการโดย anova แบบสองทางเพื่อตรวจสอบว่ากลุ่มยาปฎิชีวนะชนิดที่ combinationsshowed synergic กิจกรรมและการทดสอบของ dunnett เพื่อกำหนดความแตกต่างระหว่าง effectsof เพื่อการบำบัดโรคที่ clarithromycin ตามลำพังและ clarithromycin ร่วมกับ plaunotol ค่าของ P < 0.05 เป็นการพิจารณาอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ.
resultsanddiscussionMIC 50 / 90 ค่าไมโครโฟน(มก./ลิตร)ในด้านพันธุ์ amoxicillinagainst 14 H . pylori และ clarithromycin plaunotol เป็น 3.13/12.50.0060.025 0.1/0.1 และตามลำดับ combinationsdemonstrated plaunotol - clarithromycin และ plaunotol - amoxicillin ได้
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภาษาอื่น ๆ
การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.
- ลูกจะตั้งใจทำความดี
- เเล้วคุณรู้ได้อย่างไรว่าเป็นรูปภาพของผม
- คำถาม
- บัตรของคุณชำรุดค่ะ
- หมาและแมวส่วนใหญ่จะตกใจเมื่อถูกพ่นน้ำยาใ
- วันนี้ฉันมีความสุขมาก
- รองเท้าสวย?
- ตัวคนเดียว
- ก็จะเกิดผลเสีย
- เราต้องการใช้รถไฟด่วนเพื่อไปถึงสถานที่นั
- what am I see in this world
- ซึ่งเราจะได้ศึกษากันว่า
- พบกันใหม่ในวันพรุ่ง นี้ ฝันดี
- ฉันงอน
- โกรธแล้วนะ
- ขอ
- ขอบคุณ
- ป๊อก
- รักมากๆนะ รักจนรักใครไม่ได้แล้ว อย่ามีแฟ
- please return the completed form to the
- คุณพักที่ไหน
- ribosome formation
- PUBLIC RELATIONS
- 彼の姿をみせたいけれど、日本では無理です T T
