Extracellular enzyme activity assay

Extracellular enzyme activity assays
All assays were performed on solid YM medium supplemented
with 2% glucose (unless otherwise specified) and
the appropriate substrate for enzyme activity. The plates
were incubated at the optimal growth temperature of
the individual yeast isolate, and the enzyme activities
determined as described below.



Amylolytic activity. The cells were grown in medium
containing 0.2% soluble starch. The plates were floodedwith 1 ml of iodine solution, and positive activity was
defined as a clear halo around the colony on a purple
background [48].
Cellulase activity. The cells were grown in medium
supplemented with 0.5% carboxymethylcellulose [49].
The plates were flooded with 1 mg/ml of Congo red
solution, which was poured off after 15 min. The plates
were then flooded with 1 M NaCl for 15 min. Positive
cellulase activity was defined as a clear halo around the
colony on a red background [50].
Chitinase activity. The cells were grown in medium
containing 2.5% purified chitin. Chitinase activity was
indicated directly by the presence of a clear halo
around the colony [48].
Lipase activity. The cells were grown in medium
containing 1% tributyrin. Lipase activity was indicated
by a clear halo around the colony [51].
Protease activity. The cells were grown in medium
supplemented with 2% casein at pH 6.5. Protease
activity was indicated by the presence of a white
precipitate around the colony [49].
Xylanase activity. The cells were grown in medium
supplemented with 0.5% xylan [52]. Xylanase activity
was indicated by a clear halo around the colony.
Pectinase activity. The cells were grown in 0.67% YNB
medium, pH 7.0, containing 1% pectin [26]. The plates
were flooded with 1% hexadecyltrimethylammonium
bromide, and activity was indicated by a clear halo
around the colony on a red background [48].
Esterase activity. The cells were grown in medium
composed of 1% bacto peptone, 0.5% NaCl, 0.4%
CaCl2*2H2O and 1% Tween 80 [53], and esterase
activity was indicated by a white precipitate around the
colony.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Extracellular เอนไซม์กิจกรรม assays
assays ทั้งหมดดำเนินบนกลาง YM แข็งเสริม
กับกลูโคส 2% (ยกเว้นระบุเป็นอย่างอื่น) และ
substrate ที่เหมาะสมสำหรับเอนไซม์ แผ่น
ถูก incubated ที่อุณหภูมิเติบโตดีที่สุด
แยกยีสต์แต่ละ และกิจกรรมของเอนไซม์
กำหนดตามที่อธิบายไว้ด้านล่าง


กิจกรรม Amylolytic เซลล์ที่โตใน
ประกอบด้วยแป้งละลาย 0.2% แผ่นได้ floodedwith 1 ml ของไอโอดีน และกิจกรรมบวกถูก
กำหนดเป็น halo ชัดเจนทั่วอาณานิคมบนสีม่วงแบบ
พื้นหลัง [48] .
Cellulase กิจกรรม เซลล์ที่โตใน
เสริม ด้วย carboxymethylcellulose 0.5% [49] .
แผ่นถูกน้ำท่วมกับ 1 mg/ml ของคองโกแดง
โซลูชัน ซึ่ง poured ปิดหลัง 15 นาที แผ่น
มีเกลื่อน 1 M NaCl สำหรับ 15 นาทีบวก
cellulase กิจกรรมถูกกำหนดเป็น halo ชัดเจนสถาน
อาณานิคมบนพื้นหลังสีแดง [50] .
Chitinase กิจกรรม เซลล์ที่โตใน
ประกอบด้วย 2.5% บริสุทธิ์ไคทิน กิจกรรม Chitinase ถูก
ตรงตามสถานะการออนไลน์ของคุณปืนชัดเจน
รอบโคโลนี [48] .
กิจกรรมเอนไซม์ไลเปส เซลล์ที่โตใน
ประกอบด้วย tributyrin 1% มีระบุกิจกรรมของเอนไซม์ไลเปส
โดย halo ใสรอบโคโลนี [51] .
กิจกรรมรติเอส เซลล์ที่โตใน
เสริม ด้วยเคซีน 2% ที่ pH 6.5 รติเอส
กิจกรรมที่ระบุสถานะเป็นสีขาว
precipitate รอบ ๆ โคโลนี [49] .
กิจกรรมไซลาเนส เซลล์ที่โตใน
เสริม ด้วย xylan 0.5% [52] กิจกรรมไซลาเนส
เปิดเผย โดย halo ใสรอบโคโลนี
Pectinase กิจกรรม เซลล์เติบโตขึ้น 0.67% YNB
ปานกลาง pH 7.0 ประกอบด้วยเพกทิน 1% [26] แผ่น
ถูกน้ำท่วม ด้วย 1% hexadecyltrimethylammonium
โบรไมด์ และกิจกรรมที่ระบุ โดย halo ใส
ทั่วอาณานิคมบนพื้นหลังสีแดง [48] .
Esterase กิจกรรม เซลล์ที่โตใน
ประกอบด้วย peptone bacto 1%, 0.5% NaCl, 0.4%
CaCl2 * 2H2O และ 1% Tween 80 [53], และ esterase
กิจกรรมถูกบ่งชี้ โดย precipitate ขาวสถาน
อาณานิคม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

extracellular การตรวจการทำงานของเอนไซม์
การตรวจทั้งหมดถูกดำเนินการในกลาง YM ของแข็งเสริม
ด้วยกลูโคส 2% (ยกเว้นกรณีที่ระบุไว้เป็นอย่างอื่น) และ
พื้นผิวที่เหมาะสมสำหรับการทำงานของเอนไซม์ แผ่น
ถูกบ่มที่อุณหภูมิที่เหมาะสมในการเจริญเติบโตของ
เชื้อยีสต์บุคคลและกิจกรรมของเอนไซม์
กำหนดตามที่อธิบายไว้ด้านล่างกิจกรรม Amylolytic เซลล์มีการเจริญเติบโตในระดับปานกลางที่มี 0.2% แป้งที่ละลายน้ำได้ แผ่นเป็น floodedwith 1 มิลลิลิตรของสารละลายไอโอดีนและกิจกรรมในเชิงบวกที่ได้รับการกำหนดให้เป็นรัศมีที่ชัดเจนรอบอาณานิคมในสีม่วงพื้นหลัง [48] กิจกรรมเซลลูเลส เซลล์ที่มีปลูกอยู่ในสื่อเสริมด้วย 0.5% carboxymethylcellulose [49] แผ่นที่ถูกน้ำท่วมด้วย 1 mg / ml คองโกสีแดงการแก้ปัญหาที่ถูกเทออกหลังจาก 15 นาที แผ่นถูกน้ำท่วมแล้วด้วย 1 M โซเดียมคลอไรด์เป็นเวลา 15 นาที บวกกิจกรรมเซลลูเลสได้รับการกำหนดให้เป็นรัศมีที่ชัดเจนรอบอาณานิคมบนพื้นหลังสีแดง [50] กิจกรรมไคติเนส เซลล์มีการเจริญเติบโตในระดับปานกลางที่มี 2.5% ไคตินบริสุทธิ์ กิจกรรมไคติเนสได้รับการระบุโดยตรงจากการปรากฏตัวของรัศมีใสรอบโคโลนี [48] กิจกรรมเอนไซม์ไลเปส เซลล์มีการเจริญเติบโตในระดับปานกลางที่มี 1% tributyrin กิจกรรมเอนไซม์ไลเปสได้แสดงให้เห็นโดยชัดเจนรัศมีรอบอาณานิคม [51] กิจกรรมเอนไซม์โปรติเอ เซลล์ที่มีปลูกอยู่ในสื่อเสริมด้วย 2% เคซีนที่พีเอช 6.5 protease กิจกรรมได้รับการระบุโดยการปรากฏตัวของสีขาวตะกอนรอบอาณานิคม [49] กิจกรรมไซลาเนส เซลล์ที่มีปลูกอยู่ในสื่อเสริมด้วย 0.5% ไซแลน [52] กิจกรรมไซลาเนสได้รับการระบุโดยรัศมีใสรอบโคโลนีเพคติกิจกรรม เซลล์ที่ถูกปลูกใน 0.67% YNB กลางค่า pH 7.0 ที่มี 1% เพคติน [26] แผ่นที่ถูกน้ำท่วมด้วย 1% hexadecyltrimethylammonium โบรไมด์และกิจกรรมได้รับการระบุโดยรัศมีที่ชัดเจนรอบอาณานิคมบนพื้นหลังสีแดง [48] กิจกรรม Esterase เซลล์ที่ถูกปลูกในกลางประกอบด้วย 1% เปปโตน bacto 0.5% NaCl 0.4% CaCl2 * 2H2O และ 1% Tween 80 [53] และ esterase กิจกรรมได้รับการระบุโดยตะกอนสีขาวรอบอาณานิคม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

พบว่าเอนไซม์สามารถใช้
จำนวนปานกลาง การแข็งเสริม
กลูโคส 2 % ( เว้นแต่จะระบุเป็นอย่างอื่น ) และ
( เหมาะสมสำหรับกิจกรรมของเอนไซม์ จาน
อุณหภูมิการเจริญเติบโตที่เหมาะสมอุณหภูมิ
ยีสต์แต่ละแยก และกิจกรรมเอนไซม์
กำหนดตามที่อธิบายไว้ด้านล่าง .



ไมโลไลติกกิจกรรม เซลล์เติบโตขึ้นในระดับปานกลาง
ที่มี 0.2 % ละลายแป้ง แผ่นเป็น floodedwith 1 มิลลิลิตร สารละลายไอโอดีน และกิจกรรมทางบวก
เรียกว่าชัดเจน รัศมีรอบโคโลนีบนพื้นหลังสีม่วง
[ 48 ] .
กิจกรรมเอนไซม์ . เซลล์เติบโตปานกลาง
เสริมด้วย 0.5% กรณีศึกษา : [ 49 ] .
จานเต็มไปด้วย 1 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตรของสารละลายคองโกแดง
ซึ่งถูกเทออกจากจาน
หลังจาก 15 นาทีแล้วน้ำท่วมด้วย 1 โมลาร์เป็นเวลา 15 นาที บวก
เอนไซม์กิจกรรมกำหนดชัดเจน รัศมีรอบ
อาณานิคมบนพื้นหลังสีแดง [ 50 ] .
กิจกรรมของเอนไซม์ . เซลล์เติบโตในระดับปานกลาง
ประกอบด้วย 2.5% ไคตินบริสุทธิ์ กิจกรรมของเอนไซม์ถูก
พบโดยตรง โดยการแสดงตนของชัดเจน รัศมี
รอบอาณานิคม [ 48 ] .
กิจกรรมเอนไซม์ . เซลล์เติบโตในระดับปานกลางที่ร้อยละ 1
tributyrin .กิจกรรมพบพบ
โดยรัศมีชัดเจนรอบอาณานิคม [ 51 ] .
กิจกรรมโปรติเอส เซลล์เติบโตในระดับปานกลาง
เสริมด้วย 2% เคซีนพีเอช 6.5 . กิจกรรมของเอนไซม์โปรติเอส
ถูกระบุโดยการแสดงตนของตะกอนสีขาว
รอบอาณานิคม [ 49 ] .
กิจกรรมของไซลาเนส เซลล์ที่เติบโตในอาหารที่มีไซแลน 0.5% )
[ 52 ] ไซลาเนส
ถูกพบโดยรัศมีใสรอบโคโลนี .
กิจกรรมเอนไซม์ . เซลล์ที่โตใน 0.67 % ynb
medium พีเอช 7.0 ที่ประกอบด้วย 1% เพคติน [ 26 ] จาน
เต็มไปด้วย 1% hexadecyltrimethylammonium
โบรไมด์ และกิจกรรมที่ถูกระบุโดยชัดเจน รัศมี
รอบโคโลนีบนพื้นหลังสีแดง [ 48 ] .
กิจกรรม 4 . เซลล์เติบโตในระดับปานกลาง
ประกอบด้วย Bacto extract 1% , 0.5% NaCl 0.4%
ผลิต * 2H2O-dx และ tween 80 [ 53 ] , และกิจกรรม ,
ถูกระบุโดยตะกอนสีขาวรอบ
อาณานิคม