2.6. Antioxidant activity2.6.1. DPP

2.6. Antioxidant activity
2.6.1. DPPH radical-scavenging assay
Antioxidant activity was assessed using the free radical scavenging activity of the samples evaluated with the stable radical 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), according to the method described by Wang and Gao (2013) with some modifications. Five grams of fresh tissue with 25 mL of an aqueous solution of acetone (50%, v/v) was extracted, and 50 μL of this extract was diluted with 150 μL of acetone solution. Then, 40 μL of this diluted extract was used for the assay. An aliquot (160 μL) of the DPPH solution (3.3 mg/50 mL pure ethanol) was used in each well. The mixtures were then kept at room temperature in the dark for 60 min, and the reduction of DPPH radical was measured at 517 nm against a ฃ blank (aqueous solution of acetone) without extract using a UV–visible spectrophotometer (UV/VIS spectrometer, infinite
M200 Pro, Switzerland). The DPPH radical scavenging activity was calculated as follows (Sánchez-González et al., 2011):
Scavenging activity % ð Þ¼Ac−As Ac  100 where AC is the absorbance of the control reaction and AS is the absorbance
of the treatment sample.
2.6.2. Reducing power assay
The ability of samples to reduce iron (III) was determined according to the method of Yildirim, Mavi, and Kara (2001). Briefly, 100 μL of the sample was mixed with 250 μL of 0.2 M phosphate buffer (pH 6.6) and 250 μL of 1% (w/v) potassium ferricyanide solution. The reaction mixtures were incubated for 30 min at 50 °C. After incubation, 250 μL of 10% (w/v) TCA was added and the reaction mixtures were then centrifuged at 10,000 ×g for 10 min. Finally, 250 μL of the supernatant solution from each sample mixture was mixed with 250 μL of distilled water and 50 μL of 0.1% (w/v) ferric chloride. After a-10 min reaction time, the absorbance of the resulting solutions was measured at 700 nm. Increased absorbance of the reaction mixture indicated increased reducing power. The control was conducted in the same manner, except that distilled water was used instead of sample. Values presented are the mean of triplicate analyses.
2.7. Statistical analysis
The results were analyzed by a multifactor analysis of variance (ANOVA) with a 95% significance level and differences among treatments were carried out using the Tukey's range test (P ≤ 0.05) using GraphPad Prism, version 5.02 (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA, USA).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.6 กิจกรรมสารต้านอนุมูลอิสระ2.6.1. DPPH scavenging อนุมูล assayอนุมูลถูกประเมินโดยใช้อนุมูลอิสระการ scavenging กิจกรรมตัวอย่างที่ประเมินกับการมั่นคงรุนแรง 2.2 นไดฟีนิลได-1-picrylhydrazyl (DPPH), ตามวิธีการอธิบาย โดยวังและ Gao (2013) มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง 5 กรัมของเนื้อเยื่อสดกับการละลายของอะซิโตน (50%, v/v) ปริมาตร 25 มิลลิลิตรถูกแยก และ μL 50 ของสารสกัดนี้ถูกเจือจาง ด้วย μL 150 ของอะซิโตน แล้ว μL 40 ของสารสกัดนี้เจือจางที่ใช้สำหรับการทดสอบ เป็นส่วนลงตัว (160 μL) ของสารละลาย DPPH (เอทานอ 3.3 mg/50 mL) มาใช้ในแต่ละอย่าง ส่วนผสมแล้วถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องในมืดสำหรับ 60 นาที และการลดลงของอนุมูล DPPH โดยวัดที่ 517 nm กับฃที่ว่างเปล่า (ละลายของอะซิโตน) โดยไม่ต้องแยกใช้สเปคยูวี – มองเห็นได้ (UV/VIS สเปกโตรมิเตอร์ อนันต์M200 Pro สวิตเซอร์แลนด์) กิจกรรมการ scavenging อนุมูล DPPH ได้คำนวณดังต่อไปนี้ (สุดน่ารักถือ González et al. 2011):Scavenging กิจกรรม%ð Þ¼Ac−As Ac 100 ที่ AC เป็นค่าของตัวควบคุมปฏิกิริยาและเป็นเป็นค่าที่ตัวอย่างการรักษา2.6.2. ลดพลังงานทดสอบพิจารณาความสามารถของตัวอย่างการลดเหล็ก (III) ตามวิธีการของ Yildirim, Mavi และ Kara (2001) สั้น ๆ μL 100 ตัวอย่างถูกผสมกับ μL 250 0.2 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 6.6) และ 250 μL 1% (w/v) โพแทสเซียม ferricyanide โซลูชัน ส่วนผสมปฏิกิริยาได้รับการกก 30 นาทีที่อุณหภูมิ 50 องศาเซลเซียส หลังจากบ่ม เพิ่ม 250 μL 10% (w/v) TCA และผสมปฏิกิริยาแล้วได้ผลิตภัณฑ์ที่ 10,000 × g 10 นาที ในที่สุด 250 μL โซลูชัน supernatant จากส่วนผสมแต่ละอย่างถูกผสมกับ μL 250 ของน้ำกลั่นและ μL 50 ของคคลอไรด์ 0.1% (w/v) หลังจากเวลาปฏิกิริยา a-10 นาที โดยวัดค่าของการแก้ปัญหาผลที่ 700 nm ค่าที่เพิ่มขึ้นของส่วนผสมของปฏิกิริยาแสดงพลังงานลดลงเพิ่มขึ้น ควบคุมการดำเนินการในลักษณะเดียวกัน ใช้ยกเว้นว่าน้ำกลั่นแทนตัวอย่าง ค่าที่แสดงเป็นความหมายของการวิเคราะห์ตสแควร์2.7. สถิติวิเคราะห์ผลลัพธ์ได้วิเคราะห์ โดย multifactor วิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) กับระดับนัยสำคัญ 95% และความแตกต่างระหว่างการรักษาดำเนินการโดยใช้ Tukey ของช่วงทดสอบ (P ≤ 0.05) โดยใช้ปริซึม GraphPad รุ่น 5.02 (ซอฟต์แวร์ GraphPad, Inc., San Diego, CA, USA)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.6 ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ
2.6.1 DPPH รุนแรง-ขับทดสอบ
กิจกรรมต้านอนุมูลอิสระที่ได้รับการประเมินโดยใช้กิจกรรมอนุมูลอิสระของกลุ่มตัวอย่างที่มีการประเมินเสถียรภาพรุนแรง 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) ตามวิธีการที่อธิบายโดย Wang และ Gao (2013) กับบางส่วน การปรับเปลี่ยน ห้ากรัมของเนื้อเยื่อสดกับ 25 มิลลิลิตรของสารละลายของอะซิโตน (50% v / v) ถูกสกัดและ 50 ไมโครลิตรของสารสกัดนี้ถูกเจือจางด้วย 150 ไมโครลิตรของสารละลายอะซีโตน จากนั้น 40 ไมโครลิตรของสารสกัดเจือจางนี้ถูกใช้สำหรับการทดสอบ หาร (160 ไมโครลิตร) ของการแก้ปัญหา DPPH (3.3 มก. / 50 มลเอทานอลบริสุทธิ์) ถูกนำมาใช้ในแต่ละดี ผสมถูกเก็บไว้แล้วที่อุณหภูมิห้องในที่มืดเป็นเวลา 60 นาทีและการลดลงของ DPPH รุนแรงวัดที่ 517 นาโนเมตรเทียบกับที่ว่างเปล่า (สารละลายของอะซิโตน) ฃโดยไม่ต้องสารสกัดใช้ spectrophotometer UV-มองเห็นได้ (UV / VIS สเปกโตรมิเตอร์ อนันต์
Pro M200, วิตเซอร์แลนด์) DPPH กิจกรรมต้านอนุมูลอิสระที่คำนวณได้ดังต่อไปนี้ (Sánchezอนซาเลซ, et al, 2011.)
กิจกรรมการขับ% d Þ¼Ac-As Ac? 100 ที่ AC คือการดูดกลืนแสงของการเกิดปฏิกิริยาการควบคุมและเป็นเป็นดูดกลืนแสง
ของตัวอย่างการรักษา.
2.6.2 ลดอำนาจการทดสอบ
ความสามารถของกลุ่มตัวอย่างในการลดเหล็ก (III) ถูกกำหนดตามวิธีการของ Yildirim, Mavi และ Kara นี้ (2001) สั้น ๆ , 100 ไมโครลิตรของกลุ่มตัวอย่างได้รับการผสมกับ 250 ไมโครลิตร 0.2 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 6.6) และ 250 ไมโครลิตร 1% (w / v) สารละลายโพแทสเซียม ferricyanide ผสมปฏิกิริยาถูกบ่มเป็นเวลา 30 นาทีที่ 50 ° C หลังจากการบ่ม 250 ไมโครลิตร 10% (w / v) TCA ถูกบันทึกและผสมปฏิกิริยาถูกปั่นแล้ว 10,000 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาที สุดท้าย 250 ไมโครลิตรของการแก้ปัญหาใสจากแต่ละส่วนผสมตัวอย่างผสมกับ 250 ไมโครลิตรของน้ำกลั่นและ 50 ไมโครลิตร 0.1% (w / v) เฟอริกคลอไรด์ หลังจาก-10 เวลาปฏิกิริยานาที, การดูดกลืนแสงของการแก้ปัญหาที่เกิดขึ้นได้รับการวัดที่ 700 นาโนเมตร เพิ่มขึ้นการดูดกลืนแสงของผสมปฏิกิริยาที่ระบุเพิ่มขึ้นลดอำนาจ การควบคุมได้ดำเนินการในลักษณะเดียวกันยกเว้นว่าน้ำกลั่นที่ถูกนำมาใช้แทนของกลุ่มตัวอย่าง ค่าที่นำเสนอมีค่าเฉลี่ยเพิ่มขึ้นสามเท่าวิเคราะห์.
2.7 การวิเคราะห์ทางสถิติ
ผลการวิเคราะห์ข้อมูลโดยการวิเคราะห์ Multifactor ความแปรปรวน (ANOVA) ที่มีระดับความสำคัญ 95% และความแตกต่างระหว่างการรักษาที่ถูกดำเนินการโดยใช้การทดสอบช่วงของ Tukey (P ≤ 0.05) โดยใช้ปริซึม GraphPad, รุ่น 5.02 (GraphPad Software, Inc ซานดิเอโก, แคลิฟอร์เนีย, สหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.6 กิจกรรมของสารต้านอนุมูลอิสระดูแล . dpph หัวรุนแรง scavenging assayฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระและการกำจัดอนุมูลอิสระของกลุ่มตัวอย่างที่ประเมินด้วย 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl อนุมูลอิสระที่เสถียร ( dpph ) ตามวิธีการที่อธิบายโดยวังและเกา ( 2013 ) ที่มีการปรับเปลี่ยน ห้ากรัมเนื้อเยื่อสด 25 มิลลิลิตรของสารละลายอะซิโตน ( 50 % v / v ) ถูกสกัดและ 50 μลิตรสารสกัดนี้เจือจางด้วย 150 μ L สำหรับโซลูชั่น แล้ว 40 μ L นี้เจือจางสารสกัดถูกนำมาใช้สำหรับการทดสอบ เป็นส่วนลงตัว ( 160 μ L ) ของ dpph โซลูชั่น ( 3.3 มิลลิกรัม / 50 มิลลิลิตรเอทานอลบริสุทธิ์ ) ถูกใช้ในแต่ละครั้งได้อีกด้วย ผสมแล้วเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องในที่มืดนาน 60 นาที และการลดลงของ dpph หัวรุนแรงถูกวัดที่ 517 nm กับฃว่าง ( สารละลายอะซิโตน ) โดยไม่ต้องสกัดการมองเห็น– UV Spectrophotometer ( UV / VIS สเปกโตรมิเตอร์ อนันต์m200 Pro , สวิตเซอร์แลนด์ ) ที่เป็นตัวเร่งปฏิกิริยา dpph กิจกรรมคำนวณได้ดังนี้ ( ซันเชซ gonz . kgm lez et al . , 2011 )การกิจกรรมðÞ¼ ac − AC 100 ที่ AC คือการดูดกลืนแสงของปฏิกิริยาและเป็นค่าควบคุมใช้ในการรักษาดาวน์โหลด . การลดอำนาจการทดสอบความสามารถของตัวอย่างการลดเหล็ก ( III ) ถูกกำหนดตามวิธีการของ ยิลดิริม มาวี , และคาร่า ( 2001 ) สั้น 100 μ L ของตัวอย่างที่ผสมกับ 250 μล. 0.2 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 6.6 ) และ 250 μ L 1% ( w / v ) สารละลายเฟอร์ริกไซนาไนด์โพแทสเซียม ปฏิกิริยาผสมถูกบ่มเป็นเวลา 30 นาทีที่ 50 องศา หลังจากบ่ม , 250 μ L 10 % ( w / v ) บริษัทก็เพิ่ม และปฏิกิริยาที่ผสมแล้วระดับ 10 ×กรัมต่อ 10 นาทีสุดท้าย 250 μ L ของสารละลายจากแต่ละตัวอย่างผสมผสมกับ 250 μล. กลั่น น้ำ 50 ลิตรμ 0.1% ( w / v ) เฟอร์ริคคลอไรด์ - 10 นาทีหลังจากเวลาปฏิกิริยา ผลการวัดการดูดกลืนแสงของโซลูชั่นที่ 700 นาโนเมตร เพิ่มค่าการดูดกลืนแสงของปฏิกิริยาผสม พบเพิ่มขึ้น ลดอำนาจ ควบคุมดำเนินการในลักษณะเดียวกัน ยกเว้นว่าน้ำกลั่นแทนตัวอย่าง ค่าแสดงเป็นค่าเฉลี่ยการวิเคราะห์ทำสำเนาสามฉบับ .2.7 . สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูลวิเคราะห์ข้อมูลโดยการวิเคราะห์ความแปรปรวน ( ANOVA ) Multifactor กับ 95% ระดับและความแตกต่างระหว่างการทดลอง โดยใช้ช่วงของการทดสอบ ( P ≤ 0.05 ) โดยใช้ graphpad prism รุ่น 5.02 ( graphpad ซอฟต์แวร์ , Inc . , San Diego , CA , USA )