Experimental
Transgenic rice
The transgenic endosperm-derived rice callus was generated by
combinatorial nuclear transformation which has been reported
earlier (Zhu et al., 2008). The three plasmids contained phytoene
synthase Zmpsy1, phytoene desaturase Pacrtl and b-carotene ketolase
CrtW from Brevundimonas sp. Strain SD212 (Nishida et al.,
2005). The latter gene was chemically synthesized according to
the codon usage of Brassica napus and fused to the full-length rice
alcohol dehydrogenase 5´ -untranslated region (Sugio et al., 2008)
and to the transit peptide sequence from pea ribulose-1, 5-bisphospate
carboxylase small subunit (Schreier et al., 1985). This
DNA fragment was inserted into plasmid GZ63 containing the
maize c-zein gene promoter and the nos terminator. The maize
psy1 cDNA (Buckner et al., 1996) was transferred into plasmid
p326 containing the wheat LWM glutenin promoter (Stoger et al.
1999) and nos terminator. The crtI gene from Pantoea ananatis (formerly
known as Erwinia uredovora) was fused in frame with the
transit peptide signal from the Phaseolus vulgaris small subunit of
ribulose bisphosphate carboxylase in plasmid pYPIET4 (Misawa
et al., 1994), amplified by PCR and then transferred to pHorp-P
containing the barley D-hordein promoter (Sørensen et al., 1996)
and the rice ADPGPP terminator. All transformation constructs
are based on pUC8 plasmids. Their maps are shown in Fig. 5. Transgenic
coloured calli were selected and cultured on MS selection
medium
ทดลองข้าวถั่วเหลืองแคลลัสข้าวเอนโดสเปิร์มมาถั่วเหลืองสร้างโดยปัญหานิวเคลียร์ที่เปลี่ยนแปลงซึ่งมีการรายงานก่อนหน้านี้ (Zhu et al., 2008) Phytoene plasmids สามอยู่synthase Zmpsy1, phytoene desaturase ketolase Pacrtl และบีแคโรทีนCrtW จาก Brevundimonas sp.ต้องใช้ SD212 (Nishida et al.,2005) ยีนหลังถูกสังเคราะห์สารเคมีตามการใช้รหัสพันธุกรรมของผัก napus และ fused กับข้าวปราศจาก5´ dehydrogenase แอลกอฮอล์-untranslated ภูมิภาค (Sugio et al., 2008)และลำดับเพปไทด์ส่งต่อจากดอกอัญชัญ ribulose-1, 5-bisphospatecarboxylase เล็กย่อย (Schreier และ al., 1985) นี้ส่วนดีเอ็นเอที่ใส่เข้าไปใน plasmid GZ63 ประกอบด้วยการโปรโมเตอร์ของยีน c zein ข้าวโพดและเทอร์มิเนเตอร์ชุดหมายเลข ข้าวโพดpsy1 cDNA (Buckner et al., 1996) ถูกโอนย้ายใน plasmidp326 ประกอบด้วยโปรโมเตอร์ glutenin ของข้าวสาลี LWM (Stoger et alปี 1999) และหมายเลขเทอร์มิเนเตอร์ ยีน crtI จาก Pantoea ananatis (ชื่อเดิมหรือที่เรียกว่า Erwinia uredovora) ถูก fused ในกรอบส่งต่อเพปไทด์สัญญาณจากย่อยขนาดเล็กของ vulgaris เขียวของcarboxylase bisphosphate ribulose ใน plasmid pYPIET4 (มิซาว่าร้อยเอ็ด al., 1994), ขยาย โดย PCR แล้ว โอนย้ายไป pHorp-Pประกอบด้วยผู้เสนอเงื่อนไข D hordein ข้าวบาร์เลย์ (Sørensen et al., 1996)และเทอร์มิเนเตอร์ ADPGPP ข้าว โครงสร้างการเปลี่ยนแปลงทั้งหมดตั้งอยู่บน pUC8 plasmids มีแสดงแผนที่ของพวกเขาใน Fig. 5 ถั่วเหลืองcalli สีเลือก และอ่างเลือก MSปานกลาง
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)
ทดลอง
ข้าวดัดแปรพันธุกรรม
พันธุ์ข้าว endosperm ที่ได้มาจากแคลลัสที่ถูกสร้างขึ้นโดย
การเปลี่ยนแปลงนิวเคลียร์ combinatorial ซึ่งได้รับการรายงาน
ก่อนหน้านี้ (Zhu et al., 2008) สามพลาสมิดที่มี phytoene
synthase Zmpsy1, phytoene desaturase Pacrtl และ ketolase ขแคโรทีน
จาก CrtW Brevundimonas SP สายพันธุ์ SD212 (Nishida et al.,
2005) ยีนหลังถูกสังเคราะห์ทางเคมีตาม
การใช้งานของ codon Brassica napus และผสมกับข้าวเต็มความยาว
dehydrogenase แอลกอฮอล์ 5'ภูมิภาค -untranslated (Sugio et al., 2008)
และเปปไทด์ลำดับการขนส่งจากถั่ว ribulose-1, 5 -bisphospate
คาร์บอกซิ subunit ขนาดเล็ก (Schreier et al., 1985) นี้
ชิ้นดีเอ็นเอถูกใส่เข้าไปในพลาสมิดที่มี GZ63
ข้าวโพดโปรโมเตอร์ของยีน C-Zein และเทอร์มิกัดกร่อน ข้าวโพด
ยีน psy1 (Buckner et al., 1996) ถูกย้ายเข้าไปในพลาสมิด
ที่มี p326 ก่อการ LWM ข้าวสาลี glutenin (Stoger et al.
1999) และเทอร์มิกัดกร่อน ยีน crtI จาก Pantoea ananatis (เดิม
รู้จักกันในชื่อ Erwinia uredovora) ถูกหลอมรวมอยู่ในกรอบที่มี
สัญญาณเปปไทด์จากการขนส่ง Phaseolus vulgaris หน่วยย่อยเล็ก ๆ ของ
คาร์บอกซิ ribulose bisphosphate ในพลาสมิด pYPIET4 (Misawa
et al., 1994) ขยายโดยวิธี PCR และโอนแล้ว เพื่อ pHorp-P
มีข้าวบาร์เลย์ก่อการ D-hordein (Sørensen et al., 1996)
และข้าวเทอร์มิ ADPGPP สร้างการเปลี่ยนแปลงทั้งหมด
จะขึ้นอยู่กับพลาสมิด pUC8 แผนที่ของพวกเขาจะแสดงในรูป 5. ยีน
สีแคลลัสได้รับการคัดเลือกและเพาะเลี้ยงบน MS เลือก
ขนาดกลาง
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)
ทดลองดัดแปลงพันธุกรรมข้าว
ได้ข้าวพันธุ์เปอร์แคลลัสที่ถูกสร้างขึ้นโดย
เชิงการแปรนิวเคลียสซึ่งมีรายงาน
ก่อนหน้านี้ ( Zhu et al . , 2008 ) 3 ) มีโปรตีนไฟโทอีน
zmpsy1 pacrtl desaturase , และไฟโทอีน crtw ketolase
- จาก brevundimonas sp . สายพันธุ์ sd212 ( นิชิดะ
et al . , 2005 )ยีนเป็นสารเคมีสังเคราะห์หลังตาม
codon ใช้ผักกาดก้านขาวและผสมกับแบบเต็มตัวยาถ่ายข้าว
5 ภาคใหม่นี่ sugio et al . , 2008 )
และการขนส่งลำดับเปปไทด์จากถั่ว ribulose-1 5-bisphospate
, อวัยวะสืบพันธุ์เล็ก subunit ( ชเรเ ร์ et al . , 1985 ) ดีเอ็นเอถูกแทรกลงในนี้
gz63 ที่มีพลาสมิดข้าวโพด c-zein ยีนส่งเสริมและ NOS คนเหล็ก ข้าวโพด
psy1 cDNA ( Buckner et al . , 1996 ) ได้ย้ายเข้าสู่พลาสมิด
p326 ที่มีข้าวสาลีกลูเตนิน LWMComment โปรโมเตอร์ ( stoger et al .
2542 ) และ NOS คนเหล็ก การ crti ยีนจาก pantoea ananatis ( เดิม
เรียกว่าเชื้อ Erwinia uredovora ) คือผสมในกรอบกับ
การขนส่งเปปไทด์สัญญาณจาก phaseolus ขนาดเล็กรวมทั้ง
เพิ่มไรบูโลส bisphosphate อวัยวะสืบพันธุ์ในพลาสมิด pypiet4 ( มิ
et al . , 1994 ) , ขยายโดยวิธี PCR และจากนั้นย้ายไป phorp-p
ที่มีการ d-hordein ข้าวบาร์เลย์ ( ขึ้น rensen et al . , 1996 )
และข้าว adpgpp คนเหล็ก ทุกการเปลี่ยนแปลงโครงสร้าง
จะขึ้นอยู่กับ puc8 พลาส . แผนที่ของพวกเขาจะแสดงในรูปที่ 5 ต้น
สีและแคลลัสที่เพาะเลี้ยงบนอาหารสูตร MS ที่เลือก
ขนาดกลาง
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)