Preparative Biochemistry and Biotec

Preparative Biochemistry and Biotechnology, 44(5), 433-450.
L-Asparaginase (ASNase), an antileukemia enzyme, is facing problems with antigenicity in the blood. Modification of L-asparaginase from Cladosporium sp. was tried to obtain improved stability and improved functionality. In our experiment, modification of the enzyme was tried with bovine serum albumin, ovalbumin by crosslinking using glutaraldehyde, N-bromosuccinimide, and mono-methoxy polyethylene glycol. Modified enzymes were studied for activity, temperature stability, rate constants (kd), and protection to proteolytic digestion. Modification with ovalbumin resulted in improved enzyme activity that was 10-fold higher compared to native enzyme, while modification with bovine serum albumin through glutaraldehyde cross-linking resulted in high stability of L-asparaginase that was 8.5- and 7.62-fold more compared to native enzyme at 28°C and 37°C by the end of 24 hr. These effects were dependent on the quantity of conjugate formed. Modification also markedly prolonged L-asparaginase half-life and serum stability. N-Bromosuccinimide-modified ASNase presented greater stability with prolonged in vitro half-life of 144 hr to proteolytic digestion relative to unmodified enzyme (93 h). The present work could be seen as producing a modified L-asparaginase with improved activity and stability and can be a potential source for developing therapeutic agents for cancer treatment.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ชีวเคมีเตรียมและเทคโนโลยีชีวภาพ, 44 (5), 433-450. l
-asparaginase (asnase) เอนไซม์ antileukemia, กำลังเผชิญปัญหากับ antigenicity ในเลือด การเปลี่ยนแปลงของ L-asparaginase จาก Cladosporium เอสพี กำลังพยายามที่จะได้รับความมั่นคงที่ดีขึ้นและการทำงานที่ดีขึ้น ในการทดลองของเราการเปลี่ยนแปลงของเอนไซม์ที่ถูกพยายามกับซีรั่มอัลบูมิวัวovalbumin เชื่อมขวางโดยใช้ glutaraldehyde, n-bromosuccinimide และขาวดำเมท ธ อกซีไกลคอลลีน เอนไซม์ที่มีการปรับเปลี่ยนการศึกษาเป็นกิจกรรมที่มีความมั่นคงอุณหภูมิคงที่อัตรา (KD) และการป้องกันในการย่อยโปรตีน การปรับเปลี่ยนด้วย ovalbumin ผลให้กิจกรรมของเอนไซม์ที่ดีขึ้นนั้นเป็น 10 เท่าสูงกว่าเมื่อเทียบกับเอนไซม์พื้นเมืองในขณะที่การปรับเปลี่ยนด้วยซีรั่มอัลบูมิวัวผ่าน glutaraldehyde ข้ามการเชื่อมโยงส่งผลให้มีความมั่นคงสูงของ L-asparaginase ที่ 8.5 และ 7.62 เท่าเมื่อเทียบกับเอนไซม์พื้นเมืองที่ 28 องศาเซลเซียสและ 37 องศาเซลเซียสในตอนท้ายของ 24 ชั่วโมง ผลกระทบเหล่านี้ก็ขึ้นอยู่กับปริมาณของผันเกิดขึ้น การปรับเปลี่ยนอย่างเห็นได้ชัดเป็นเวลานานยังครึ่งชีวิตและซีรั่มเสถียรภาพ L-asparaginaseasnase n-bromosuccinimide แก้ไขที่นำเสนอความมีเสถียรภาพมากขึ้นด้วยเป็นเวลานานในครึ่งชีวิตหลอดทดลองจาก 144 ต่อชั่วโมงในการย่อยอาหารโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับเอนไซม์ที่ยังไม่แปร (93 ชั่วโมง) การทำงานในปัจจุบันอาจจะเห็นเป็นผลิต L-asparaginase แก้ไขด้วยกิจกรรมที่ดีขึ้นและความมีเสถียรภาพและสามารถเป็นแหล่งที่มีศักยภาพในการพัฒนาตัวแทนในการรักษาสำหรับการรักษาโรคมะเร็ง.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Preparative ชีวเคมีและเทคโนโลยีชีวภาพ 44(5), 433-450.
L-Asparaginase (ASNase), เอนไซม์ antileukemia จะเผชิญปัญหา มี antigenicity ในเลือด ปรับเปลี่ยนของ L-asparaginase จาก Cladosporium sp.ได้พยายามขอรับการปรับปรุงเสถียรภาพและปรับปรุงฟังก์ชันการทำงาน ในการทดลองของเรา เปลี่ยนแปลงของเอนไซม์นี้ได้พยายามกับวัว serum albumin ovalbumin โดย crosslinking ใช้ glutaraldehyde, N bromosuccinimide และโมโน methoxy polyethylene glycol เอนไซม์แก้ไขได้ศึกษาในกิจกรรม ความเสถียรของอุณหภูมิ ค่าคงที่อัตรา (kd), และการป้องกันการย่อยอาหาร proteolytic แก้ไข ด้วย ovalbumin ส่งผลให้กิจกรรมของเอนไซม์ดีขึ้นว่า 10-fold สูงเมื่อเปรียบเทียบกับเอนไซม์พื้นเมือง ในขณะที่ปรับเปลี่ยนกับวัว serum albumin ผ่าน glutaraldehyde cross-linking ให้เสถียรภาพสูงของ L-asparaginase ที่ 8.5 - และ 7.62 - fold มากกว่าเมื่อเปรียบเทียบกับเอนไซม์ดั้งเดิมที่ 28 ° C และ 37 ° C โดย 24 ชั่วโมง ลักษณะพิเศษเหล่านี้ขึ้นอยู่กับปริมาณของค่าสังยุคเกิดขึ้นได้ เปลี่ยนแปลงอย่างเด่นชัดยังนาน L-asparaginase เสถียรภาพ half-life และเซรั่ม ASNase N Bromosuccinimide-แก้ไขนำเสนอยิ่งขึ้นกับ half-life ในนานชม 144 เพื่อย่อยอาหาร proteolytic สัมพันธ์ unmodified เอนไซม์ (93 h) งานนำเสนอสามารถเห็นผลิต asparaginase L แก้ไขปรับปรุงกิจกรรมและความมั่นคง และสามารถเป็นแหล่งที่มีศักยภาพสำหรับการพัฒนาตัวแทนยาสำหรับรักษามะเร็ง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เตรียมชีวเคมี เทคโนโลยีชีวภาพ และ 44 ( 5 ) 433-450 .
L - asparaginase ( asnase )เอนไซม์ antileukemia ที่หันหน้าเข้าหาปัญหาที่เกิดขึ้นกับ antigenicity ในเลือด การปรับเปลี่ยนของ L - asparaginase จาก cladosporium SP นั้นก็พยายามที่จะขอรับการทำงานดีขึ้นและการทรงตัวที่ดีขึ้น ในการทดลองของเราการปรับเปลี่ยนของเอนไซม์ที่ได้พยายามด้วยไข่ขาวซีรัมวัวอีกovalbumin โดย crosslinking glutaraldehyde โดยใช้ N - bromosuccinimide และโมโน - methoxy โพลีเอททีลีน. เอ็นไซม์แก้ไขได้ศึกษาสำหรับกิจกรรมความมั่นคง อุณหภูมิ ค่าคงที่อัตรา(, kd )และการป้องกันระบบย่อยอาหาร proteolytic การปรับเปลี่ยนด้วย ovalbumin ส่งผลให้ในการทำงานของเอนไซม์มากขึ้นซึ่งเป็น 10 เท่าสูงขึ้นเมื่อเทียบกับในการเอนไซม์พื้นเมืองในขณะที่การแก้ไขกับวัวอีกเจลมาสก์มอยเจอร์ไรเซอร์ไข่ขาวผ่าน glutaraldehyde ข้ามการเชื่อมโยงทำให้ เสถียรภาพ ในระดับสูงของ L - asparaginase ที่ 8.5 - และใบ 7.62 เท่ามากกว่าเมื่อเปรียบเทียบกับคนพื้นเมืองเอนไซม์ที่ 28 ° C และ 37 ° C ในปลายปี 24 ชั่วโมงนี้ส่งผลมีขึ้นอยู่กับปริมาณของผัน(คำกริยา)จัดตั้ง. การแก้ไขยังมี เสถียรภาพ อย่างชัดเจนเป็นเวลานานครึ่งชีวิตและเจลมาสก์มอยเจอร์ไรเซอร์ L - asparaginaseasnase N - bromosuccinimide - แก้ไขนำเสนอ เสถียรภาพ มากยิ่งขึ้นพร้อมด้วยเป็นเวลานานใน Vitro แบบครึ่งชีวิตของ 144 ชั่วโมงในการจำแนก proteolytic เมื่อเทียบกับเอนไซม์ไม่แน่นอน( 93 ชั่วโมง) งานนี้ไม่ได้รับการมองในฐานะที่เป็นการผลิตได้รับการแก้ไข L - asparaginase พร้อมด้วย เสถียรภาพ และการทำกิจกรรมและได้รับการปรับปรุงจะสามารถเป็นที่ที่มี ศักยภาพ ในการพัฒนา Agent เพื่อการบำบัดโรคในการบำบัดโรคมะเร็ง.