Results and discussionThe separatio

Results and discussion
The separation of a standard mixture of type I
and type III porphyrin isomers and isocoproporphyrins
is shown in Fig. 1. The complete resolution
of the isomers on a 25cm x 5mm ODS-Hypersil
column required just 30min. Adequate separation of
the isomers can be achieved on a 10cm x 5mm
column in less than 25 min with minor adjustment of
the gradient system (see under 'H.p.l.c.).
In our study of the separation of coproporphyrin
isomers (Wright et al., 1983), we have shown that a
high molar concentration (1 M) of ammonium
acetate buffer and careful control of pH (5.15-5.20)
were important for achieving separation. These
conditions were also essential for the separation of
uroporphyrin and the intermediate porphyrins. The
use of a high molar concentration of buffer is also an
advantage, as it allows acid solutions of porphyrins
to be injected without damaging the reversed-phase
column. Strong acids such as the 25% (w/v) HCI
solution used to hydrolyse the porphyrin methyl
esters can be diluted with the ammonium acetate
buffer before sample injection. The ammonium
acetate buffer for the dilution, however, must contain
EDTA to prevent the formation of metalloporphyrins
on being left, owing to the presence of
metallic impurities (Cu, Fe, Mg) in ammonium
acetate.
The gradual conversion of porphyrins into
metalloporphyrins is demonstrated in Fig. 2. After
contact with 1 M-ammonium acetate buffer, pH 5.16,
for 2h an acid solution of uroporphyrin I and III
isomers was partially transformed into the metal
complexes (Fig. 2a). On being left overnight, the
porphyrins were almost completely converted into
metalloporphyrins (Fig. 2b). In the presence of
EDTA, however, no metalloporphyrins were detected
(Fig. 2c).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผลและการสนทนาชนิดแยกส่วนผสมมาตรฐานของผมพิมพ์ III porphyrin isomers และ isocoproporphyrinsจะแสดงใน Fig. 1 การแก้ปัญหาที่สมบูรณ์ของ isomers บน 25 ซม x 5 มม. ODS Hypersilคอลัมน์เพียง 30 นาทีเพียงพอแยกของที่จำเป็นisomers สามารถทำได้บนตัว 10 ซม. x 5 มม.คอลัมน์น้อยกว่า 25 นาทีกับการปรับปรุงเล็กน้อยระบบไล่ระดับสี (ดูภายใต้ ' H.p.l.c.)ในวิชาของเราแบ่งแยก coproporphyrinisomers (Wright และ al., 1983), เราได้แสดงที่เป็นสบความเข้มข้นสูง (1 M) ของแอมโมเนียบัฟเฟอร์ acetate และระมัดระวังควบคุม pH (5.15-5.20)มีความสำคัญสำหรับการบรรลุเป้าหมายแยก เหล่านี้ยังมีเงื่อนไขจำเป็นสำหรับการแบ่งแยกuroporphyrin และ porphyrins กลาง ที่ใช้สบเกลียวบัฟเฟอร์ก็มีประโยชน์ มันช่วยให้โซลูชั่นกรด porphyrinsจะมีหัวฉีดโดยไม่ทำลายที่กลับเฟสคอลัมน์ กรดที่แรงเช่น 25% (w/v) hciโซลูชันที่ใช้ hydrolyse porphyrin methylสามารถผสม esters กับ acetate แอมโมเนียบัฟเฟอร์ก่อนฉีดตัวอย่าง แอมโมเนียบัฟเฟอร์ acetate สำหรับเจือจาง ไร ต้องประกอบด้วยEDTA เพื่อป้องกันการก่อตัวของ metalloporphyrinsบนถูกซ้าย เพราะของสิ่งสกปรก (Cu, Fe, Mg) โลหะในแอมโมเนียacetateการแปลง porphyrins เป็นสมดุลmetalloporphyrins จะแสดงใน Fig. 2 หลังจากติดต่อกับบัฟเฟอร์ acetate M แอมโมเนีย 1, 5.16, pHสำหรับ 2h ในกรดโซลูชันของ uroporphyrin ฉันและ IIIisomers บางส่วนถูกเปลี่ยนเป็นโลหะสิ่งอำนวยความสะดวก (Fig. 2a) ในการทิ้งค้างคืนporphyrins ได้เกือบทั้งหมดถูกแปลงเป็นmetalloporphyrins (Fig. 2b) หน้าEDTA ไร metalloporphyrins ไม่พบกิน 2c)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

และอภิปรายผล
การแยกส่วนผสมมาตรฐานของผมชนิด
และประเภทที่สามไอโซเมอ porphyrin และ isocoproporphyrins
แสดงในรูป 1. ความละเอียดสมบูรณ์
ของสารอินทรีย์ใน 25cm x 5mm ODS-Hypersil
คอลัมน์ที่ต้องการเพียงแค่ 30 นาที แยกเพียงพอของ
สารอินทรีย์ที่สามารถประสบความสำเร็จใน 10cm x 5mm
คอลัมน์ในเวลาน้อยกว่า 25 นาทีที่มีการปรับเล็กน้อยของ
ระบบการไล่ระดับสี (ดูใต้ 'HPLC).
ในการศึกษาของเราแยก coproporphyrin
ไอโซเมอ (ไรท์ et al., 1983) เราได้แสดงให้เห็นว่า
มีความเข้มข้นสูงกราม (1 M) ของแอมโมเนียม
อะซิเตทบัฟเฟอร์ระวังและการควบคุมค่า pH (5.15-5.20)
มีความสำคัญเพื่อให้บรรลุการแยก เหล่านี้
เงื่อนไขที่ยังเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการแยก
uroporphyrin และ porphyrins กลาง
การใช้ความเข้มข้นสูงกรามของบัฟเฟอร์ยังเป็น
ประโยชน์ที่จะช่วยให้การแก้ปัญหาของกรด porphyrins
จะได้รับการฉีดโดยไม่ทำลายเฟสย้อนกลับ
คอลัมน์ กรดแก่เช่น 25% (w / v) HCI
วิธีการแก้ปัญหาที่ใช้ในการสลาย porphyrin เมทิล
เอสเทอสามารถเจือจางด้วยแอมโมเนียมอะซิเตท
บัฟเฟอร์ก่อนที่จะฉีดตัวอย่าง แอมโมเนียม
อะซิเตทบัฟเฟอร์สำหรับการเจือจาง แต่ต้องมี
EDTA เพื่อป้องกันการก่อตัวของ metalloporphyrins
บนถูกทิ้งไว้เนื่องจากการปรากฏตัวของ
สิ่งสกปรกโลหะ (Cu, Fe, Mg) ในแอมโมเนียม
อะซิเตท.
แปลงค่อยๆ porphyrins เป็น
metalloporphyrins จะแสดงให้เห็น ในรูป 2. หลังจาก
ติดต่อกับ 1 บัฟเฟอร์อะซิเตท M-แอมโมเนียมค่า pH 5.16,
สำหรับ 2H สารละลายกรดของ uroporphyrin I และ III
สารอินทรีย์บางส่วนก็กลายเป็นโลหะ
คอมเพล็กซ์ (รูป. 2a) เมื่อวันที่ถูกทิ้งไว้ค้างคืนที่
porphyrins ถูกแปลงเกือบทั้งหมดเป็น
metalloporphyrins (รูปที่ 2b.) ในการปรากฏตัวของ
EDTA แต่ metalloporphyrins ไม่มีการตรวจพบ
(รูป. 2c)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผลและการอภิปราย
แยกส่วนผสมมาตรฐานของประเภท และประเภทที่ 3 คือ

isocoproporphyrins Porphyrin และแสดงไว้ในรูปที่ 1 ความสมบูรณ์ของสารอินทรีย์ใน

25 ซม. x 5mm ODS ขนคอลัมน์ที่ต้องการแค่ 30 นาที พอแยก
สารอินทรีย์สามารถทำได้บน 10cm x 5mm
คอลัมน์น้อยกว่า 25 นาทีกับการปรับเล็ก ๆน้อย ๆจาก
ระบบไล่ระดับ ( ดูได้ที่ ' h.p.l.c.)
ในการศึกษาของเราในการแยก coproporphyrin
ไอโซเมอร์ ( Wright et al . , 1983 ) , เราได้แสดงให้เห็นว่า
สูง ( 1 ) ค่าความเข้มข้นของแอมโมเนียมอะซิเตทบัฟเฟอร์
และการควบคุมระวัง Ph ( 5.15-5.20 )
สำคัญเพื่อให้บรรลุแยก เงื่อนไขเหล่านี้
ก็จำเป็นสำหรับการแยก
uroporphyrin และพอร์ไฟรินกลาง
ใช้ของกรามสมาธิสูงของบัฟเฟอร์เป็น
ประโยชน์ตามที่มันช่วยให้กรดโซลูชั่นของพอร์ไฟริน
ให้ฉีดโดยไม่ทำลาย reversed-phase
คอลัมน์ กรดที่แข็งแกร่งเช่น 25 % ( w / v ) โดยโซลูชั่นสุดที่ใช้

Porphyrin เมทิลเอสเทอร์สามารถเจือจางด้วยแอมโมเนียมอะซิ
บัฟเฟอร์ก่อนฉีดตัวอย่าง แอมโมเนีย
อาซีเตตบัฟเฟอร์สำหรับการ อย่างไรก็ตามต้องประกอบด้วย
EDTA เพื่อป้องกันการก่อตัวของ metalloporphyrins
เมื่อถูกทิ้ง เพราะการปรากฏตัวของ
สิ่งสกปรกโลหะ ( Cu , Fe , Mg ) น้ำ

เตท ค่อยๆเปลี่ยนแปลงพอร์ไฟรินเข้าไป
metalloporphyrins แสดงให้เห็นในรูปที่ 2 หลังจาก
ติดต่อกับบัฟเฟอร์ พีเอชน้ำนม 1 m-ammonium 5.16
สำหรับ 2H , กรดและสารละลาย uroporphyrin 3
ไอโซเมอร์คือเปลี่ยนบางส่วนเป็นสารประกอบเชิงซ้อนโลหะ
( รูปที่ 2A ) เป็นซ้ายข้ามคืน
พอร์ไฟรินเกือบสมบูรณ์แปลงเป็น
metalloporphyrins ( รูปที่ 2B ) ในการแสดงตนของ
ตามลำดับ อย่างไรก็ตาม ไม่พบว่ามี metalloporphyrins
( รูปที่ 2 )