The tetrazolium salt 3(4,5-dimethyl

The tetrazolium salt 3(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) is reduced to formazan by the succinate dehydrogenase system of active mitochondria, and hence, specifically used to assay for the viable cells, such as measurement of cell proliferation, cytotoxicity, and cell number. However, in the present study we have shown that some component specifically present in M199 but not in RPMI 1640 media can reduce MTT to formazan in the absence of a living system. Further study revealed that ascorbic acid reduced MTT to formazan, which was profoundly increased by a very small amount of retinol, whereas retinol alone had no effect. Oxidation of ascorbic acid by H(2)O(2) destroyed its ability to reduce MTT. The rate of MTT reduction was directly proportional to the concentration of MTT in the absence of retinol, but approached a zero-order state beyond a certain concentration of MTT in the presence of retinol. Furthermore, retinol remained unchanged after the completion of the reaction. Taken together, these results showed that retinol acts as a reductase that catalyzes the reduction of MTT to formazan using ascorbic acid as the cosubstrate (electron donor).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เกลือ tetrazolium 3 (4,5-dimethylthiazol-2-YL) -2, โบรไมด์ 5 diphenyltetrazolium (MTT) จะลดลงไป formazan โดยระบบ succinate dehydrogenase ของ mitochondria ที่ใช้งานอยู่และด้วยเหตุที่ใช้เฉพาะเพื่อตรวจหาเซลล์ที่ทำงานได้ เช่นการวัดการเพิ่มจำนวนเซลล์, พิษและจำนวนเซลล์ อย่างไรก็ตามในการศึกษาครั้งนี้เราได้แสดงให้เห็นว่าองค์ประกอบบางอย่างโดยเฉพาะในปัจจุบัน M199 แต่ไม่ได้อยู่ใน RPMI 1640 สื่อสามารถลด MTT เพื่อ formazan ในกรณีที่ไม่มีระบบที่มีชีวิต การศึกษาเพิ่มเติมพบว่าวิตามินซีลดลง MTT เพื่อ formazan ซึ่งได้รับการเพิ่มขึ้นอย่างสุดซึ้งตามจำนวนเงินที่น้อยมากของเรติน, เรตินคนเดียวในขณะที่ไม่มีผล การเกิดออกซิเดชันของวิตามินซีจากเอช (2) O (2) ทำลายความสามารถในการลด MTT อัตราการลดลง MTT เป็นสัดส่วนโดยตรงกับความเข้มข้นของ MTT ในกรณีที่ไม่มีเรติน แต่เข้าหารัฐศูนย์สั่งซื้อเกินกว่าความเข้มข้นที่แน่นอนของ MTT ในการปรากฏตัวของเรติน นอกจากนี้เรตินยังคงไม่เปลี่ยนแปลงหลังจากเสร็จสิ้นการเกิดปฏิกิริยา ที่ร่วมกันผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่าเรตินทำหน้าที่เป็น reductase ที่กระตุ้นการลดลงของ MTT เพื่อ formazan ใช้วิตามินซีเป็น cosubstrate (การบริจาคอิเล็กตรอน)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การ tetrazolium เกลือ 3 ( 4,5-dimethylthiazol-2-yl ) - 2 5-diphenyltetrazolium โบรไมด์ ( MTT ) ลดลง โดยระบบปฏิบัติการซิเนสที่ใช้งาน ) , และดังนั้นจึงใช้เฉพาะการทดสอบกับเซลล์ได้ เช่น การวัดเซลล์ proliferation เซลล์และเซลล์จำนวน อย่างไรก็ตามในการศึกษาเราได้แสดงให้เห็นว่าบางส่วน โดยเฉพาะในปัจจุบัน แต่ไม่ใช่ใน RPMI 1640 เปรียบเทียบสื่อสามารถลด MTT เพื่อปฏิบัติการในการขาดของระบบชีวิต . ผลการศึกษาพบว่า กรดแอสคอร์บิกลดลง MTT เพื่อปฏิบัติการ ซึ่งเพิ่มขึ้นอย่างสุดซึ้ง โดยปริมาณที่น้อยมากของเรตินอล และเรตินอย่างเดียวไม่มีผลครับออกซิเดชันของกรดแอสคอร์บิกโดย H ( 2 ) โดย ( 2 ) ทำลายความสามารถในการลดยา . อัตราการลดลงของ MTT คือเป็นสัดส่วนโดยตรงกับความเข้มข้นของยาในการขาดงานของเรตินอล แต่เข้าหาศูนย์สั่งรัฐเกินความเข้มข้นที่แน่นอนของ MTT ในการแสดงตนของเรตินอล . นอกจากนี้ retinol , ยังคงไม่เปลี่ยนแปลงหลังจากที่เสร็จสมบูรณ์ของปฏิกิริยา ถ่ายด้วยกันพบว่า เรตินอล ทําหน้าที่เป็นเทสที่กระตุ้นการลดลงของ MTT เพื่อปฏิบัติการใช้กรดแอสคอร์บิคเป็น cosubstrate
( ผู้บริจาคอิเล็กตรอน )