As reference method matrix-assisted laser desorption ionization
time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS) analysis was
applied for the verification of the extracted pea saponins. For this
purpose, 2,5-dihydrobenzoic acid (DHB) was prepared in a concentration
of 20 mg/mL in a solution of acetonitrile and 0.1% trifluoroacetic acid (30/
70; v/v, TA30). Furthermore, 2,6-dihydroxyacetophenone (DHAP) with a
concentration of 10 mg/mL in tetrahydrofuran served as a matrix for
analysis of the purified SPE extracts. Calibration was conducted with a
peptide calibration standard II (Bruker Daltonik GmbH, Bremen,
Germany) containing nine standard peptides within a range of m/z
700–3500. In this case, α-cyano-4-hydroxycinnamic acid (HCCA) served
as matrix and was solved in TA30 to saturation at room temperature. The
solving process was assisted by ultrasound. Excess of matrix was spun
down (10.621 x g, 5 min) and only the homogenous transparent phase
was used. According to the dried droplet methodology, equal volumes
of sample, peptide calibration standard and appropriate matrix were
mixed and 0.5 μL of the mixture was applied onto a standard steel target.
After drying at room temperature, the measurement was performed in a
MALDI-TOF/TOF mass spectrometer (ultrafleXtreme, Bruker Daltonik
GmbH, Bremen, Germany) at positive ion mode in a range of m/z
700–3500 Da. The evaluation of the mass spectra was carried out by
the software FlexAnalysis 3.0 (Bruker Daltonik GmbH, Bremen,
Germany)
As reference method matrix-assisted laser desorption ionizationtime-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS) analysis wasapplied for the verification of the extracted pea saponins. For thispurpose, 2,5-dihydrobenzoic acid (DHB) was prepared in a concentrationof 20 mg/mL in a solution of acetonitrile and 0.1% trifluoroacetic acid (30/70; v/v, TA30). Furthermore, 2,6-dihydroxyacetophenone (DHAP) with aconcentration of 10 mg/mL in tetrahydrofuran served as a matrix foranalysis of the purified SPE extracts. Calibration was conducted with apeptide calibration standard II (Bruker Daltonik GmbH, Bremen,Germany) containing nine standard peptides within a range of m/z700–3500. In this case, α-cyano-4-hydroxycinnamic acid (HCCA) servedas matrix and was solved in TA30 to saturation at room temperature. Thesolving process was assisted by ultrasound. Excess of matrix was spundown (10.621 x g, 5 min) and only the homogenous transparent phasewas used. According to the dried droplet methodology, equal volumesof sample, peptide calibration standard and appropriate matrix weremixed and 0.5 μL of the mixture was applied onto a standard steel target.After drying at room temperature, the measurement was performed in aMALDI-TOF/TOF mass spectrometer (ultrafleXtreme, Bruker DaltonikGmbH, Bremen, Germany) at positive ion mode in a range of m/z700–3500 Da. The evaluation of the mass spectra was carried out bythe software FlexAnalysis 3.0 (Bruker Daltonik GmbH, Bremen,Germany)
การแปล กรุณารอสักครู่..

เป็นวิธีการอ้างอิงเมทริกซ์ช่วยไอออนไนซ์เลเซอร์คายเวลาของเที่ยวบินมวลสาร (MALDI-TOF-MS) การวิเคราะห์ถูกนำมาใช้สำหรับการตรวจสอบของที่สกัดsaponins ถั่ว สำหรับเรื่องนี้วัตถุประสงค์กรด 2,5-dihydrobenzoic (DHB) ถูกจัดทำขึ้นในความเข้มข้น 20 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรในการแก้ปัญหาของ acetonitrile และ 0.1% กรด TRIFLUOROACETIC (30/70 v / V TA30) นอกจากนี้ 2,6-dihydroxyacetophenone (DHAP) ที่มีความเข้มข้น10 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรใน tetrahydrofuran ทำหน้าที่เป็นเมทริกซ์สำหรับการวิเคราะห์สารสกัดจากเอสพีอีบริสุทธิ์ สอบเทียบได้ดำเนินการกับการสอบเทียบมาตรฐานเปปไทด์ที่สอง (Bruker Daltonik GmbH, เบรเมนประเทศเยอรมนี) ที่มีมาตรฐานเก้าเปปไทด์ที่อยู่ในช่วงของม. / z 700-3500 ในกรณีนี้α-สีน้ำเงิน-4-hydroxycinnamic กรด (HCCA) ทำหน้าที่เป็นเมทริกซ์และได้รับการแก้ไขในTA30 อิ่มตัวที่อุณหภูมิห้อง กระบวนการแก้รับการช่วยเหลือจากอัลตราซาวนด์ ส่วนเกินของเมทริกซ์ก็หมุนตัวลง (10.621 XG 5 นาที) และมีเพียงขั้นตอนโปร่งใสคุณสมบัติเหมือนกันถูกนำมาใช้ ตามวิธีการหยดแห้งปริมาณที่เท่ากันของตัวอย่างการสอบเทียบเปปไทด์ที่ได้มาตรฐานและเมทริกซ์ที่เหมาะสมถูกผสมและ0.5 ไมโครลิตรผสมถูกนำมาใช้บนเป้าหมายเหล็กมาตรฐาน. หลังจากการอบแห้งที่อุณหภูมิห้องวัดได้ดำเนินการในMALDI-TOF / TOF สเปกโตรมิเตอร์มวล (ultrafleXtreme, Bruker Daltonik GmbH, เบรเมนเยอรมนี) ในโหมดไอออนในเชิงบวกในช่วงของม. / z 700-3500 ดา การประเมินผลของสเปกตรัมมวลได้ดำเนินการโดยซอฟต์แวร์ FlexAnalysis 3.0 (Bruker Daltonik GmbH, เบรเมน, เยอรมนี)
การแปล กรุณารอสักครู่..

เป็นข้อมูลอ้างอิงวิธีเมทริกซ์ช่วยเลเซอร์การคายไอ
ครั้ง - ของ - เครื่องแมสสเปกโตรเมทรี ( maldi-tof-ms ) การวิเคราะห์
ประยุกต์สำหรับการแยกถั่ว saponins . สำหรับวัตถุประสงค์นี้
, 2,5-dihydrobenzoic acid ( dhb ) ถูกเตรียมไว้ในความเข้มข้น
20 mg / ml ในสารละลายไนและ 0.1% กรดไตรฟลูออโรอะซิติก ( 30 : 70 ; V / V , ta30 ) นอกจากนี้ 26-dihydroxyacetophenone ( Dhap ) กับ
ความเข้มข้น 10 มก. / มล. ในเตตระไฮโดรฟแรนทำหน้าที่เป็นเมทริกซ์สำหรับการวิเคราะห์สารสกัดบริสุทธิ์
. การสอบเทียบและสอบเทียบมาตรฐานกับ
เปปไทด์ 2 ( BRUKER daltonik GmbH , เบรเมน
เยอรมนี ) ที่มีเก้าเปปมาตรฐานภายในช่วงของ M / Z
700 - 3 , 500 ในกรณีนี้ cyano-4-hydroxycinnamic กรดแอลฟา ( hcca ) เสิร์ฟ
เป็นเมทริกซ์และการแก้ไขใน ta30 จะอิ่มตัวที่อุณหภูมิ ห้อง กระบวนการแก้ปัญหา
ถูกช่วยโดยอัลตราซาวด์ ส่วนเกินของเมทริกซ์ถูกปั่น
ลง ( 10.621 x G , 5 นาที ) และมีเพียงเนื้อเดียว โปร่งใสระยะ
ถูกใช้ ไปตามทางหยดแห้ง เท่ากับปริมาณ
ตัวอย่างการสอบเทียบมาตรฐานและเหมาะสมคือ เปปไทด์ ผสมและเมทริกซ์
05 μ l ส่วนผสมจะถูกนำมาใช้บนชิ้นงานเหล็กมาตรฐาน
หลังจากการอบแห้งที่อุณหภูมิห้อง การวัดแสดงใน maldi-tof
/ tof แมสสเปกโตรมิเตอร์ ( ultraflextreme บรุคเกอร์ , daltonik
GmbH , เบรเมน , เยอรมัน ) ในโหมดของประจุบวกในช่วงของ M / Z
700 – 3500 ดา . การประเมินของมวลนี้กระทำโดยซอฟต์แวร์ flexanalysis 3.0 (
daltonik BRUKER GmbH , เบรเมิน , เยอรมนี
การแปล กรุณารอสักครู่..
