2.3.1. Proteases (endopeptidases)Th

2.3.1. Proteases (endopeptidases)
The level of soluble protein in pooled sampleswas determined using
themethod described by Bradford (1976). Trypsin activity was assayed
according to Erlanger et al. (1961), using BAPNA (N-α-Benzoyl-DLarginine
p-nitroanilide) as substrate. The mixtures were incubated at
37 °C and the absorbance of the reaction products was measured at
410 nm. Chymotrypsin activity was measured by the method of
Hummel (1959), asmodified by Applebaum et al. (2001), using BTEE
(N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester) as substrate. The mixtures were
incubated at 37 °C and the absorbance of the reaction products was
measured at 256 nm. The reaction of trypsinwas stopped by adding 30%
acetic acid. One unit of enzyme activitywas defined as 1 μg nitroanilide
released per minute, using a molar extinction coefficient of 8.8 for
trypsin and of 964 for chymotrypsin.
Leucine aminopeptidase was measured at 37 °C as suggested by
Appel (1974), using leucine P-nitroanilide as substrate. The reaction
of leucine aminopeptidase was stopped by adding 30% acetic acid. The
mixtures were incubated at 37 °C and the absorbance of the reaction
products was measured at 410 nm. One unit of enzyme activity was
defined as 1 μg nitroanilide released per minute, using a molar
extinction coefficient of 8.2.
Acid proteinase (pepsin) activity was evaluated as described by
Sarath et al. (1989), using 2% hemoglobin as substrate. The enzyme
crude extracts and the substrate were incubated at 37 °C and the
absorbance of the reaction products measured at 280 nm. One unit of
enzyme activity was defined as 1 μg tyrosine released per minute,
using the molar extinction coefficient of 0.005.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3.1 โปรตีเอส (endopeptidases)
ระดับของโปรตีนที่ละลายใน sampleswas pooled การพิจารณาโดยใช้
อธิบาย themethod โดยแบรดฟอ (1976) กิจกรรม trypsin ได้รับการวิเคราะห์
ตามเลน, et al (1961) โดยใช้ BAPNA (N-α-Benzoyl-DLarginine
P-nitroanilide) เป็นสารตั้งต้น ผสมถูกบ่มที่
อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสและการดูดกลืนแสงของผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาวัดที่
410 นาโนเมตร กิจกรรม chymotrypsin วัดโดยวิธีของ
ฮัมเมล (1959) โดย asmodified Applebaum et al, (2001) โดยใช้ BTEE
(N-Benzoyl-L-tyrosine เอทิลเอสเตอร์) เป็นสารตั้งต้น ผสมได้รับการ
บ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสและการดูดกลืนแสงของผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาที่ถูก
วัดที่ 256 นาโนเมตร ปฏิกิริยาของ trypsinwas หยุดโดยการเพิ่ม 30%
กรดอะซิติก หนึ่งหน่วยของเอนไซม์ activitywas กำหนดเป็น nitroanilide 1 ไมโครกรัม
การปล่อยตัวต่อนาทีโดยใช้ค่าสัมประสิทธิ์การสูญเสียฟันกราม 8.8 สำหรับ
trypsin และ 964 สำหรับ chymotrypsin.
aminopeptidase Leucine วัดที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสตามที่แนะนำโดย
แตะ (1974) โดยใช้ leucine P-nitroanilide เป็นสารตั้งต้น ปฏิกิริยา
ของ aminopeptidase leucine ก็หยุดโดยการเพิ่มกรดอะซิติก 30%
ผสมถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสและการดูดกลืนแสงของการเกิดปฏิกิริยาที่
ผลิตภัณฑ์ได้รับการวัดที่ 410 นาโนเมตร หนึ่งหน่วยของเอนไซม์ที่ถูก
กำหนดให้เป็น nitroanilide 1 ไมโครกรัมต่อนาทีปล่อยออกมาโดยใช้กราม
ค่าสัมประสิทธิ์การสูญพันธุ์ของ 8.2.
กรดโปร (น้ำย่อย) กิจกรรมที่ได้รับการประเมินตามที่อธิบาย
Sarath et al, (1989) โดยใช้ฮีโมโกล 2% เป็นสารตั้งต้น เอนไซม์
สารสกัดและสารตั้งต้นที่ถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสและ
การดูดกลืนแสงของผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาวัดที่ 280 นาโนเมตร หนึ่งหน่วยของ
เอนไซม์ถูกกำหนดเป็นซายน์ 1 ไมโครกรัมการปล่อยตัวต่อนาที
โดยใช้ค่าสัมประสิทธิ์การสูญเสียฟันกราม 0.005