Polyphenols have pKa values between 8 and 10 This causes them to be neutral to partially anionic in the tested pH range 6.6 to 8.0. The peak shapes of EGC, EGCg, ECg were affected significantly by an increase in pH. The polyphenols showed extensive peak tailing and distortion above pH 7.6 (results not shown). The catechins are chemically unstable in an alkaline environment and this may cause the peak distortions. Ascorbic acid showed an increased leading front with a decrease in pH. The peak shapes of gallic acid, caffeine, theanine and pNP were unaffected by pH changes in this range. The optimum pH was chosen as 7 because peak shapes did not improve with further decrease in pH. Lower pH only increased the analysis time and not the resolution of the analytes. The SDS concentration was tested in the range 25–200 mM. An increase in the SDS concentration helped to resolve the different analytes. An increase in surfactant concentration showed an increase in the capacity factor (k9) of all analytes except for theanine, gallic acid and ascorbic acid. They had a higher affinity for the bulk phase than for the micellar phase and their ionic properties influenced their separation. Ascorbic acid and gallic acid are organic acid anions at pH 7.0. They do not interact with the micellar phase and their negative migration mobility against the electrosmotic flow (EOF) effects their separation. Theanine, a zwitterion with an overall charge of zero, elutes near the EOF. This is probably because theanine is retained only slightly when the hydrocarbon side-chain and the a-amino group form weak interactions with the surfactant The concentration of 100 mM SDS provided good resolution of almost all the compounds. Higher SDS concentrations did not increase the resolution, caused peak broadening and unacceptable high Joule heating. Phosphate and borate were tested as possible background electrolytes. It was found that the catechins showed leading fronts when borate was present in the running buffer. The use of phosphate alone as the background electrolyte improved the peak shapes. The analytes were separated on their different hydrophobic interactions with the SDS (catechins and caffeine) as well as their ionic properties at pH 7.0 (gallic acid, ascorbic acid and pNP) Phosphate was tested as a background electrolyte in the concentration range 5–45 mM. A concentration of 25 mM was found to be optimal for the separation of the analytes. Methanol was used as organic modifier. A wide range of 0–10% (v/v) methanol was tested. The k9 of the catechins and caffeine decreased with an increase in percentage methanol, since the compounds became more soluble in the bulk phase. The methanol does not alter the solubility of the ionic analytes (theanine, gallic acid and ascorbic acid) in the bulk phase. A 6% (v/v) methanol concentration was considered optimal for the analysis of green and black tea samples because it provided the shortest analysis time with good resolution. Bottled tea samples required an optimal concentration of 5% (v/v) methanol to provide good resolution between ascorbic and EC. This increased the total separation time to 13 min. The applied voltage was varied from 10 to 20 kV The optimal voltage was selected as 14 kV because it was away from any cross-over points (near 12 and 17 kV) and the Joule heating was within the limits for the given type and length of capillary.
โพลีฟีนอลที่มีคุณค่า pKa ระหว่าง 8 และ 10 สาเหตุนี้พวกเขาจะเป็นกลางเพื่อประจุบางส่วนในการทดสอบระดับ pH 6.6 ถึง 8.0 . ยอดเขารูปร่างของ egc EGCG , ECG ได้รับผลกระทบอย่างมาก โดยเพิ่มขึ้นในสาขา polyphenols พบอย่างละเอียดสูงสุดตาม และการบิดเบือนข้างต้น pH 7.6 ( ผลลัพธ์ไม่แสดง ) catechins จะไม่เสถียรทางเคมีในสภาพแวดล้อมที่เป็นด่าง และอาจทำให้ยอดการบิดเบือน กรดแอสคอร์บิคแสดงเพิ่มขึ้น นำ หน้า กับ การลดลงของ pH ที่ยอดเขารูปร่างเพิ่มขึ้น , คาเฟอีน , theanine PNP และได้รับผลกระทบจากการเปลี่ยนแปลง pH ในช่วงนี้ พีเอชที่เหมาะสมที่ถูกเลือกเป็นเพราะรูปร่าง พีคไม่ได้ปรับปรุงด้วยการลด pH pH ลดลงแต่เพิ่มการวิเคราะห์เวลาและความละเอียดของสาร . โดยเฉพาะของการทดสอบในช่วง 25 - 200 มิลลิเมตร เพิ่มขึ้นใน SDS เข้มข้นช่วยแก้ปัญหากรณีต่าง ๆ การเพิ่มความเข้มข้นของสารลดแรงตึงผิวที่ใช้แสดงการเพิ่มขึ้นของปัจจัยผลิต ( K9 ) ของทุกกรณียกเว้น theanine , กรดแกลลิคและกรดแอสคอร์บิก . มี affinity สูงสำหรับช่วงขนาดใหญ่กว่าสำหรับไมเซลเฟสและคุณสมบัติการแยกไอออน อิทธิพลของพวกเขา คือกรดแอสคอร์บิคเพิ่มขึ้นเป็นกรดอินทรีย์แอนที่ pH 7.0 . พวกเขาจะไม่โต้ตอบกับไมเซลเฟสและลบของพวกเขากับการเคลื่อนย้ายไหล electrosmotic ( ช่วง ) ผลการแยกของพวกเขา theanine , ไอออนซึ่งมีประจุบวกและลบด้วยค่าใช้จ่ายโดยรวมของศูนย์ elutes ใกล้ช่วง . ทั้งนี้อาจเป็นเพราะ theanine ยังคงอยู่เพียงเล็กน้อยเมื่อไฮโดรคาร์บอนข้างโซ่ และ a-amino แบบฟอร์มกลุ่มอ่อนแอปฏิสัมพันธ์กับสารลดแรงตึงผิวความเข้มข้น 100 มม. ให้ความละเอียดของซีดีเกือบทั้งหมด สารประกอบ SDS เข้มข้นสูงไม่ได้เพิ่มความละเอียดจากยอดขยายและความร้อนจูลสูงไม่ได้ ฟอสเฟตและบอเรต มาใช้เป็นอิเล็กโทรไลต์ ความเป็นมาเป็นไป พบว่า catechins พบชั้นนำแนวหน้าเมื่ออยู่ในวิ่งบอเรตบัฟเฟอร์ การใช้ฟอสเฟตเป็นอิเล็กโทรไลต์หลังปรับปรุงยอดรูปร่าง การแยกสารในการโต้ตอบที่แตกต่างกัน ) กับ SDS ( catechins และคาเฟอีน ) รวมทั้งคุณสมบัติของไอออนที่ pH 7.0 ( ฝรั่งเศสกรดวิตามินซี PNP ) และใช้เป็นพื้นหลังของอิเล็กโทรไลต์ในช่วง 5 – 45 มิลลิเมตร ความเข้มข้น 25 มิลลิโมลาร์ พบว่าเป็นที่เหมาะสมสำหรับการแยกของสารที่วิเคราะห์ . เมทิลแอลกอฮอล์ใช้เป็นอินทรีย์ที่ . ช่วงกว้างของ 0 – 10 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) ส่วนคือการทดสอบ โดย K9 ของ catechins และคาเฟอีนเพิ่มสูงขึ้นร้อยละเมทานอล เนื่องจากสารประกอบเป็นละลายมากขึ้นในเฟสกลุ่ม สารไม่ได้เปลี่ยนแปลงการละลายของสารอิออนิก ( theanine , กรดแกลลิคและกรดแอสคอร์บิก ) ในเฟสกลุ่ม 6 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) ความเข้มข้นของเมทานอลถือว่าเหมาะสมสำหรับการวิเคราะห์ของเขียวและชาดำตัวอย่างเพราะมันให้เวลาสั้นที่สุดด้วยการวิเคราะห์ความละเอียดดี ตัวอย่างชาบรรจุขวดเป็นเหมาะสมของความเข้มข้น 5% ( v / v ) ส่วนที่จะให้ความละเอียดที่ดีระหว่างวิตามินซี EC นี้เพิ่มเวลาการแยกรวม 13 นาที ความต่างศักย์มีค่าตั้งแต่ 10 ถึง 20 กิโลโวลต์ แรงดันไฟฟ้าที่เหมาะสมได้รับเลือกเป็น 14 กิโล เพราะมันห่างจากจุดที่ข้าม ( ใกล้ 12 และ 17 กิโล ) และความร้อนจูลได้ภายในวงเงินที่ระบุชนิดและความยาวของฝอย
การแปล กรุณารอสักครู่..
