Bacterial growth assayGrowth of Xcc

Bacterial growth assay
Growth of Xcc was measured in LB broth adjusted to pH 7 with
addition of MES buffer and amended with Hx (SigmaeAldrich, St.
Louis, MO ref.153745) at 0, 0.06, 0.6, 1.5, 3, 6, 10, and 20 mM. Xcc
was grown in LB broth overnight and the bacterial suspension was
centrifuged, washed and resuspended in 10 mM MgSO4. The
growth assay was carried out in a total volume of 300 mL in microtiter
wells using an initial bacterial density of 1.5  103 colonyforming
units (cfu) mL1 adjusted with a spectrophotometer set at
A600nm. Bacteria were incubated on a rotary shaker for 96 h at 26
̊
C
and optical density of the suspension was measured every 10 min
using a Bioscreen C Reader (Labsystems Oy, Helsinki, Finland) set at
A600nm. After the growth assay, a LIVE/DEAD® (Life Technologies
Corp, Carlsbad, CA, USA) test was performed to assess cell mortality
caused by Hx acid.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ทดสอบการเจริญเติบโตของแบคทีเรียเจริญเติบโตของ Xcc วัดในน้ำซุป LB ปรับค่าพีเอช 7 กับการเพิ่มขึ้นของบัฟเฟอร์mes และแก้ไขเพิ่มเติมกับ Hx (SigmaeAldrich เซนต์หลุยส์, มิสซูรี่ ref.153745) ที่ 0, 0.06, 0.6, 1.5, 3, 6, 10 และ 20 มิลลิเมตร Xcc ถูกปลูกในน้ำซุป LB ในชั่วข้ามคืนและระงับเชื้อแบคทีเรียที่ถูกปั่นล้างและresuspended 10 มิลลิ MgSO4 ทดสอบการเจริญเติบโตได้ดำเนินการในปริมาณรวม 300 มิลลิลิตรในไมโครหลุมโดยใช้ความหนาแน่นเริ่มต้นของแบคทีเรีย1.5? colonyforming 103 หน่วย (cfu) มิลลิลิตร 1 ปรับได้ด้วยสเปกที่ตั้งA600nm แบคทีเรียที่ถูกบ่มในเครื่องปั่นหมุน 96 ชั่วโมงที่ 26 ̊ C และความหนาแน่นของแสงของการระงับวัดทุก 10 นาทีใช้Bioscreen C อ่าน (Labsystems Oy, เฮลซิงกิ, ฟินแลนด์) ตั้งอยู่ที่A600nm หลังจากการทดสอบการเจริญเติบโตที่สด / DEAD® (ไลฟ์เทคโนโลยีส์คอร์ป, คาร์ลส, CA, USA) ได้ดำเนินการทดสอบเพื่อประเมินอัตราการตายของเซลล์ที่เกิดจากกรดHx

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเติบโตของแบคทีเรีย (
xcc วัดน้ำปอนด์ค่า pH 7
2 เดือนบัฟเฟอร์และที่แก้ไขเพิ่มเติมกับ HX ( sigmaealdrich St .
หลุยส์ โม ref.153745 ) ที่ 0 , 0.1 , 0.6 , 1.5 , 3 , 6 , 10 และ 20 มม. xcc
ปลูกใน LB broth ค้างคืนและระงับแบคทีเรียคือ
ไฟฟ้า , ล้างและ resuspended ใน MgSO4 ใ 10 มิลลิเมตร
วิธีการดำเนินการในปริมาณ 300 มล. ในบ่อไมโคร
ใช้ความหนาแน่นของแบคทีเรียเริ่มต้น 1.5  103 colonyforming
หน่วย ( CFU ) มล.  1 ปรับกับความตั้ง
a600nm . แบคทีเรียถูกบ่มในเครื่องปั่น Rotary สำหรับ 96 H ที่ 26

C
̊และความหนาแน่นของแสงที่ถูกระงับวัดทุก 10 นาที
ใช้ bioscreen C อ่าน ( labsystems โอย เฮลซิงกิฟินแลนด์ ) ชุดละ
a600nm . หลังจากการทดสอบการถ่ายทอดสด / ตาย® ( เทคโนโลยีกับชีวิต
คอร์ป , Carlsbad , CA , USA ) ทดสอบทำการประเมินเซลล์ตายที่เกิดจากกรด HX
.