PCR was set up in 5Opl volume as de

PCR was set up in 5Opl volume as described by Kambhampati et
a/. (1992) in a thermal cycler (MJ Research; Model PTC-100-60).
The temperature profile for the amplification of the two rRNA gene
fragments was 95°C for 30 s, 40°C for 1 min and 72°C for 1 min for
ten cycles followed by twenty-five cycles of 95°C for 30 s, 50°C for
1 min and 72°C for 1 min. For the amplification of the NADH
dehydrogenase and the COI gene fragments, the temperature
profile was 95°C for 30 s, 45°C for 1 min and 72°C for 1 min for
thirty-five cycles. For both temperature profiles, an initial denatur-
ation step of 95°C for 3 min and a final extension step of 72°C for 7
min were added. After amplification, the products were electro-
phoresed on 1 Yo agarose gels containing 50,d per litre of 10 mglml
ethidium bromide. No contamination was detected in negative
controls

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

PCR ถูกตั้งค่าปริมาณการ 5Opl ตามที่อธิบายไว้ โดย Kambhampati et มี / (1992) ใน cycler ความร้อน (MJ วิจัย รุ่น PTC-100-60) โพรไฟล์อุณหภูมิสำหรับขยายของยีนใน rRNA สอง ชิ้นส่วนถูก 95° C สำหรับ 30 s, 40° C ใน 1 นาที และ 72 องศาเซลเซียสใน 1 นาทีสำหรับ รอบที่สิบตามรอบยี่สิบห้าของ 95° C สำหรับ 30 s, 50° C สำหรับ 1 นาทีและ 72 องศาเซลเซียสใน 1 นาที การขยายของ NADH dehydrogenase และบางส่วนของยีน COI อุณหภูมิ โพรไฟล์ถูก 95° C สำหรับ 30 s, 45° C 1 นาที และ 72 องศาเซลเซียสใน 1 นาทีสำหรับ สามสิบห้ารอบ สำหรับทั้งสองอุณหภูมิโพรไฟล์ การเริ่มต้น denatur- ขั้นตอนการ ation 95 องศาเซลเซียส 3 นาทีและขั้นสุดท้ายส่วนขยาย 72° C 7 เพิ่ม min หลังจากขยาย ผลิตภัณฑ์มี electro- phoresed บน 1 Yo agarose gels d 50 ที่มีต่อลิตรของ 10 mglove ชีวิต โบรไมด์ ethidium ปนไม่พบค่าลบ ตัวควบคุม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

PCR ถูกจัดตั้งขึ้นในปริมาณ 5Opl ตามที่อธิบายไว้โดย Kambhampati และ
/ (1992) ใน Cycler ความร้อน (MJ วิจัยรุ่น PTC-100-60).
อุณหภูมิสำหรับการขยายของทั้งสอง rRNA ยีน
เศษเป็น 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 วินาที, 40 ° C เป็นเวลา 1 นาทีและ 72 องศาเซลเซียส 1 นาทีสำหรับ
สิบรอบตามด้วยยี่สิบห้ารอบ 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 วินาที, 50 ° C เป็นเวลา
1 นาทีและ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาที สำหรับการขยายของ NADH
dehydrogenase และชิ้นส่วนของยีน COI อุณหภูมิ
รายละเอียดเป็น 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 วินาที, 45 ° C เป็นเวลา 1 นาทีและ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาทีสำหรับ
สามสิบห้ารอบ สำหรับส่วนกำหนดค่าอุณหภูมิทั้งสอง denatur- เริ่มต้น
ขั้นตอน ation 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 นาทีและขั้นตอนสุดท้ายของการขยาย 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 7
นาทีถูกเพิ่ม หลังจากที่ขยายผลิตภัณฑ์ได้ทางไฟฟ้า
phoresed เมื่อวันที่ 1 เจล agarose Yo มี 50, D ต่อลิตรของ 10 mglml
ethidium bromide การปนเปื้อนไม่ถูกตรวจพบในเชิงลบ
การควบคุม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

PCR ถูกเซ็ตอัพในหมวด 5opl ตามที่อธิบายไว้โดย kambhampati et
/ . ( 1992 ) ในรอบความร้อน ( การวิจัย รูปแบบ ptc-100-60 MJ )
อุณหภูมิสำหรับการเพิ่มปริมาณของยีนสอง rRNA
เศษ 95 องศา C 30 , 40 ° C เป็นเวลา 1 นาที 72 ° C เป็นเวลา 1 นาทีรอบสิบยี่สิบห้ารอบ
ตามด้วย 95 องศา C 30 , 50 ° C
1 นาที 72 ° C 1 นาทีสำหรับการเพิ่มปริมาณของแอมโมเนีย
เอนไซม์และยีนเศษลำปาง อุณหภูมิ 95 องศา C
โปรไฟล์ 30 , 45 ° C เป็นเวลา 1 นาที 72 ° C เป็นเวลา 1 นาที
สามสิบห้ารอบ ทั้งรูปแบบของอุณหภูมิ การเริ่มต้น denatur -
ation ขั้นตอน 95 °องศาเซลเซียสนาน 3 นาที และสุดท้ายการก้าวของ 72 ° C
7 นาทีเพิ่ม หลังจากขยายผลิตภัณฑ์ electro -
phoresed 1 โย่ ( เจลบรรจุ 50มต่อลิตร 10 โบรไมด์คู่ mglml

ไม่มีการปนเปื้อนที่ตรวจพบในการควบคุมลบ