We describe here the construction o

We describe here the construction of a new version of the Escherichia coli-Streptomyces shuttle
cloning vector pIJ6902, which carries the original thiostrepton-inducible PtipA as well as the
integrative and cloning systems, but with the E. coli low copy number replication control of the F
(fertility) factor. The rationale of this construct was to provide a shuttle cloning vector enabling the
cloning of genes whose expression is toxic in E. coli while keeping the efficient regulated expression
system for Streptomyces as its ascendant vector pIJ6902. This new vector named pDYN6902
(10,975 bp) showed a copy-number reduced 12 times compared to that of pIJ6902 and indeed a
decreased expression of the cloned gene. It was also shown to allow the successful cloning in E. coli
of a deleterious gene, i.e. I-SceI meganuclease encoding gene.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เราถึงสร้างเวอร์ชันใหม่ของ Escherichia coli Streptomyces รถรับ-ส่งโคลนเวกเตอร์ pIJ6902 ซึ่งดำเนิน PtipA thiostrepton inducible เดิมตลอดจนระบบแบบบูรณาการ และโคลน แต่ กับ E. coli สำเนาต่ำเลขจำลองแบบตัวควบคุม F(อุดมสมบูรณ์) ปัจจัยการ ผลของโครงสร้างนี้ถูกเพื่อ ให้รถที่โคลนเวกเตอร์ทำการโคลนของนิพจน์ที่เป็นพิษใน E. coli ในขณะที่เก็บนิพจน์การควบคุมที่มีประสิทธิภาพระบบสำหรับ Streptomyces เป็น pIJ6902 ของเวกเตอร์ ascendant เวกเตอร์ใหม่นี้ชื่อ pDYN6902(10,975 bp) พบว่ามีจำนวนลดลง 12 ครั้งเปรียบเทียบกับ ของ pIJ6902 และแน่นอนค่าที่ลดลงของยีนโคลน มันถูกแสดงให้โคลนสำเร็จใน E. coliของตัวร้ายยีน เช่น-SceI meganuclease เข้ารหัสยีน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ที่นี่เราจะอธิบายการก่อสร้างรุ่นใหม่ของ Escherichia coli รถรับส่ง-Streptomyces
โคลนเวกเตอร์ pIJ6902 ซึ่งถือเดิม thiostrepton-inducible PtipA
รวมทั้งบูรณาการและระบบการโคลนแต่มีอีโคไลจำนวนสำเนาต่ำควบคุมการจำลองแบบของ F
(ความอุดมสมบูรณ์) ปัจจัย เหตุผลของการสร้างครั้งนี้เพื่อให้โคลนรถรับส่งเวกเตอร์ทำให้โคลนของยีนที่มีการแสดงออกเป็นพิษเชื้อ E. coli ในขณะที่การรักษาที่มีประสิทธิภาพการควบคุมการแสดงออกของระบบสำหรับStreptomyces เป็นเวกเตอร์ของลัคนา pIJ6902 นี้เวกเตอร์ใหม่ชื่อ pDYN6902 (10,975 bp) แสดงให้เห็นว่าการทำสำเนาจำนวนลดลง 12 เท่าเมื่อเทียบกับที่ของ pIJ6902 และแน่นอนการแสดงออกของยีนที่ลดลงของโคลน นอกจากนี้ยังถูกนำมาแสดงเพื่อให้ประสบความสำเร็จในการโคลนเชื้อ E. coli ของยีนที่เป็นอันตรายเช่น I-SCEI meganuclease ยีนเข้ารหัส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เราอธิบายที่นี่สร้างเวอร์ชันใหม่ของเชื้อ Escherichia coli ในแหล่งรับส่ง
โคลน pij6902 เวกเตอร์ซึ่งมีต้นฉบับ thiostrepton inducible ptipa เช่นเดียวกับ
ระบบบูรณาการและการโคลนนิ่ง แต่กับ E . coli ต่ำจำนวนสำเนาซ้ำควบคุม F
( อุดมสมบูรณ์ ) ปัจจัย เหตุผลนี้สร้างเพื่อให้รับส่งโคลนเวกเตอร์เปิด
การโคลนยีนที่มีการแสดงออกที่เป็นพิษใน E . coli ในขณะที่รักษาที่มีประสิทธิภาพการควบคุมการแสดงออก
ระบบ Streptomyces เป็นลัคนาเวกเตอร์ pij6902 . เวกเตอร์ใหม่นี้ชื่อว่า pdyn6902
( 10975 BP ) พบ คัดเลข 12 ครั้ง ลดลงเมื่อเทียบกับที่ของ pij6902 และแน่นอน
ลดลงการแสดงออกของยีนยีน มันยังแสดงให้ประสบความสำเร็จโคลนนิ่งใน E . coli
ของยีนที่เป็นอันตราย เช่น i-scei
meganuclease ยีน .