Extraction and purification of the

Extraction and purification of the supernatant from the binding
assays for AFM1 determination were performed as described by
Fernandes, Correa, Rosim, Kobashigawa, and Oliveira (2012), with
some adaptations proposed by the manufacturer of the immunoaffinity
columns (NeoColumn, Neogen, Neogen Europe Ltd.,
Scotland, UK). Identification and quantification of the AFM1 residues
was achieved by injecting 20 ml of sample extracts in a high
performance liquid chromatography (HPLC), using a Shimadzu
(Kyoto, Japan) 10VP liquid chromatograph with a 10 AXL fluorescence
detector (excitation at 366nmand emission above 428 nm). A
Synergy Fusion column (4.6  150 mm, 4 mm, Phenomenex, Torrance,
CA, USA) and a Shim-Pack pre-column (4 10 mm, 5 mmCLC
G-ODS) were used. The systemwas stabilized for one hour at a flow
rate of 1 mL/min at room temperature with an isocratic mobile
phase containing water, acetonitrile and methanol (60:20:20).
Under these conditions, the retention time for AFM1 was approximately
5.7 min. Calibration curve of AFM1 was prepared using
standard solutions of AFM1 (Sigma, St Louis, MO, USA) previously
evaluated according to Scott (1990), at concentrations of 0.5,1.0, 2.5,
5.0 and 10.0 ng mL
1. The determination limit of the analytical
method was 0.01 ng mL
1, considered the minimum amount of
AFM1 that could generate a chromatographic peak three times over
the baseline standard deviation.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สกัดและทำให้บริสุทธิ์ของ supernatant จากการรวมสำหรับการกำหนด AFM1 assays ดำเนินตามที่อธิบายไว้โดยFernandes ต่อ Rosim, Kobashigawa และ Oliveira (2012), กับบางท้องที่นำเสนอ โดยผู้ผลิต immunoaffinityคอลัมน์ (NeoColumn, Neogen, Neogen ยุโรป จำกัดสก็อตแลนด์ สหราชอาณาจักร) รหัสและนับตก AFM1สำเร็จ โดย injecting 20 ml สารสกัดจากตัวอย่างในสูงประสิทธิภาพของเหลว chromatography (HPLC), Shimadzu ใช้Chromatograph เหลว 10VP (เกียวโต ญี่ปุ่น) กับ 10 AXL fluorescenceเครื่องตรวจจับ (ในการกระตุ้นที่เล็ดรอด 366nmand เหนือ 428 nm) Aคอลัมน์ฟิวชั่น synergy (4.6 150 mm, 4 mm, Phenomenex รันซ์CA, USA) และคอลัมน์ก่อน Shim Pack (4 10 มม. 5 mmCLCG-ODS) ใช้ Systemwas เสถียรชั่วโมงหนึ่งในขั้นตอนการอัตรา 1 มิลลิลิตร/นาทีที่อุณหภูมิห้องกับ isocratic คิดการเคลื่อนระยะที่ประกอบด้วยน้ำ acetonitrile และเมทานอล (60:20:20)ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้ เวลาเก็บข้อมูลสำหรับ AFM1 ถูกประมาณต่ำสุด 5.7 เทียบโค้งของ AFM1 ถูกเตรียมไว้ใช้โซลูชั่นมาตรฐานของ AFM1 (ซิก St Louis, MO สหรัฐอเมริกา) ก่อนหน้านี้ประเมินตาม (1990), สก็อตที่ความเข้มข้นของ 0.5,1.0, 2.55.0 และ 10.0 ng มล. 1 กำหนดขีดจำกัดของการวิเคราะห์ทางวิธี 0.01 ng mL 1 ถือว่าเป็นจำนวนน้อยที่สุดAFM1 ที่สามารถสร้างยอด chromatographic สามครั้งผ่านส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานพื้นฐาน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การสกัดและการทำให้บริสุทธิ์ของสารละลายที่มีผลผูกพันจาก
การตรวจหาปริมาณ AFM1 ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้โดย
เฟอร์นันเดกอร์ Rosim, Kobashigawa และ Oliveira (2012) ที่มี
การดัดแปลงบางส่วนที่เสนอโดยผู้ผลิต immunoaffinity
คอลัมน์ (NeoColumn ?, Neogen, Neogen ยุโรป จำกัด ,
สกอตแลนด์สหราชอาณาจักร) การจำแนกชนิดและปริมาณของสารตกค้าง AFM1
ก็ประสบความสำเร็จโดยการฉีด 20 มล. ของสารสกัดจากตัวอย่างในสูง
ของเหลว chromatography ประสิทธิภาพ (HPLC) โดยใช้ Shimadzu
(เกียวโตญี่ปุ่น) 10VP chromatograph ของเหลวที่มีการเรืองแสง 10 AXL
เครื่องตรวจจับ (กระตุ้นที่ 366nmand การปล่อยก๊าซดังกล่าวข้างต้น 428 นาโนเมตร)
คอลัมน์ฟิวชั่นเนอร์จี้ (4.6? 150 มิลลิเมตร 4 มิลลิเมตร Phenomenex, Torrance,
CA, USA) และชิม-Pack ก่อนคอลัมน์ (4 10 มม 5 mmCLC
G-ODS) ถูกนำมาใช้ ด้วยระบบที่มีความเสถียรเป็นเวลาหนึ่งชั่วโมงในการไหล
อัตรา 1 มิลลิลิตร / นาทีที่อุณหภูมิห้องที่มีโทรศัพท์มือถือ isocratic
ขั้นตอนที่มีน้ำ acetonitrile และเมทานอล (60:20:20).
ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้เวลาการเก็บรักษาสำหรับ AFM1 ประมาณ
5.7 นาที . เส้นโค้งการสอบเทียบ AFM1 ถูกจัดทำขึ้นโดยใช้
สารละลายมาตรฐานของ AFM1 (Sigma, St Louis, MO, USA) ก่อนหน้านี้
การประเมินตามสกอตต์ (1990) ที่ระดับความเข้มข้นของ 0.5,1.0, 2.5,
5.0 และ 10.0 งะมิลลิลิตร 1 ขีด จำกัด ของความมุ่งมั่นของการวิเคราะห์
วิธีการเป็น 0.01 นาโนกรัมมิลลิลิตร 1 พิจารณาจำนวนเงินขั้นต่ำของ
AFM1 ที่สามารถสร้างยอดโครมาสามครั้งกว่า
พื้นฐานส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การสกัดและการทำให้บริสุทธิ์ของน่านจากวิธีผูก
สำหรับ afm1 กำหนดจำนวนตามที่อธิบายไว้โดย
Fernandes คอเรีย rosim kobashigawa , , , และ โอลิเวียร่า ( 2012 ) กับ
บางดัดแปลงที่เสนอโดยผู้ผลิตของ immunoaffinity
คอลัมน์ ( neocolumn  neogen neogen , ยุโรป , จำกัด ,
สกอตแลนด์สหราชอาณาจักร ) การจำแนกชนิดและปริมาณของ afm1 ตกค้าง
ทำโดยฉีด 20 มิลลิลิตร ตัวอย่างสารสกัดที่มีประสิทธิภาพสูง
liquid chromatography ( HPLC ) โดยใช้ Shimadzu
( โตเกียว , ญี่ปุ่น ) 10vp โครมาโทกราฟีของเหลวที่มี 10 แอคเซิลเรืองแสง
ตรวจจับ ( แบบที่ 366nmand มลพิษเหนือ 428 nm )
คอลัมน์ ) เป็นฟิวชั่น ( 4.6  150 มม. 4 มม. phenomenex ซ์
, , CA , USA ) และชิมฟรีก่อนคอลัมน์ ( 4  10 มม. , 5 g-ods mmclc
) สถิติที่ใช้การ systemwas คงที่เป็นเวลาหนึ่งชั่วโมง ที่อัตราการไหล
1 มิลลิลิตร / นาทีที่อุณหภูมิห้องกับ Isocratic มือถือ
เฟสที่มีน้ำ ไน และเมทานอล ( 60:20:20 ) .
ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้เวลาการเก็บรักษาสำหรับ afm1 ประมาณ 5 นาที รูปโค้งของ afm1

เตรียมใช้โซลูชั่นมาตรฐานของ afm1 ( ซิกม่า เซนต์ หลุยส์ , มิสซูรี , สหรัฐอเมริกา ) ก่อนหน้านี้
การประเมินผลตามที่สกอตต์ ( 1990 )ที่ระดับความเข้มข้น 0.5 , 1.0 , 2.5 , 5.0 และ 10.0 กรัมมิลลิลิตร

1 กำหนดขีด จำกัด ของวิธีการวิเคราะห์
คือ 0.01 ของมล
1 ถือว่าจำนวนเงินขั้นต่ำของ
afm1 ที่สามารถสร้างยอดและสามครั้ง
( ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน