Synchytrium endobioticum sporangia of pathotypes 1, 2, 6, 8 and 18 were produced on young susceptible potato sprouts (cv. Deodara) by inoculating them with a wart compost according to the Spieckermann method described in the EPPO Diagnostic Protocol for S. endobioticum (Baayen and Stachewicz, 2004). After 10 week incubation under moist and dark conditions at 16–18 C mature (dark coloured) warts were harvested, freed from adhering soil by thorough agitation in tap water, and stored at )20 C. Thawed warts were homogenized to fine slurry using a pestle and mortar. Compost inocula of pathotypes 1, 2, 6, 8 and 18 were obtained from the Plant Protection Service, the Netherlands (Baayen et al., 2005). Sporangia were separated from the homogenate or compost by wet-sieving and centrifugation using the method of the Dutch Plant Protection Service (PPS method) as described below.
Non-chytrid pathogens listed in Table 1 were obtained from the collection held at Plant Research International, Wageningen, the Netherlands. Cultivation was according to current laboratory practice. For fungi this involved cultivation in potato dextrose broth (PDB; Oxoid DM 139) and extraction of DNA from freeze-dried mycelium using Puregene kit 02F01 (BIOzyme, Blaenavon, UK). For bacteria the methods of van Beckhoven et al. (2002) were used and for second stage Meloidogyne juvenile nematodes, the methods of Curran et al. (1986) and Zijlstra et al. (1997) were used. Chytrid DNA-preparations other than S. endobioticum and Synchytrium taraxaci were kindly provided by Dr. T. Turner, Duke University, NC, USA.
Soils and preparation of soil dilution series
In this study, four different artificially infested soils were used from Dutch agricultural fields. Potatoes had not been grown in these fields for at least 10 years. Soil samples were collected from the fields G13 located near Wageningen (loamy
Sporangia endobioticum Synchytrium ของ pathotypes 1, 2, 6, 8 และ 18 ถูกผลิตในหนุ่มมันไวต่อเกมแตกหน่อ (พันธุ์ Deodara) โดย inoculating กับปุ๋ย wart ตามวิธีของ Spieckermann ที่อธิบายไว้ในโพรโทคอวินิจฉัยสนพ.สำหรับ S. endobioticum (Baayen และ Stachewicz, 2004) หลังจากที่สัปดาห์ที่ 10 (สีดำ) เติบโตบ่มเพาะวิสาหกิจภายใต้เงื่อนไขที่ชุ่มชื่น และสีเข้มที่ 16 – 18 C ขจัดกระไฝหูดได้เก็บเกี่ยว รอดจากดินยึดมั่น โดยอาการกังวลต่ออย่างในน้ำประปา และจัดเก็บที่) 20 C. Thawed ขจัดกระไฝหูดได้ homogenized เป็นกลุ่มจะดีน้ำใช้ pestle และปูน ปุ๋ย inocula ของ pathotypes 1, 2, 6, 8 และ 18 ได้รับจากบริการพืชป้องกัน เนเธอร์แลนด์ (Baayen et al., 2005) Sporangia ถูกแยกออกจาก homogenate หรือปุ๋ยเปียก sieving และ centrifugation โดยใช้วิธีของดัตช์พืชป้องกันบริการ (วิธี PPS) ตามที่อธิบายไว้ด้านล่างโรค chytrid ไม่แสดงในตารางที่ 1 ได้รับมาจากการรวบรวมจัดขึ้นที่โรงงานวิจัยนานาชาติ อย่างไร Wageningen เนเธอร์แลนด์ เพาะปลูกได้ตามการฝึกปฏิบัติการปัจจุบัน สำหรับเชื้อรา นี้เกี่ยวข้องกับการเพาะปลูกในซุปมันฝรั่งขึ้น (PDB Oxoid DM 139) และการสกัดดีเอ็นเอจาก mycelium กรอบใช้ Puregene ชุด 02F01 (BIOzyme, Blaenavon สหราชอาณาจักร) สำหรับแบคทีเรีย ใช้วิธีของแวน Beckhoven et al. (2002) และสำหรับสองขั้น Meloidogyne เยาวชน nematodes ใช้วิธี Curran et al. (1986) และ Zijlstra et al. (1997) เตรียมดีเอ็นเอ Chytrid S. endobioticum และ Synchytrium taraxaci ได้กรุณาโดยดร.ต. Turner มหาวิทยาลัยดุ๊ก NC สหรัฐอเมริกาดินเนื้อปูนและเตรียมชุดดินเจือจางในการศึกษานี้ สี่แตกต่างสมยอมรบกวนดินเนื้อปูนได้ใช้จากเขตเกษตรดัตช์ มันก็ไม่ได้โตในฟิลด์เหล่านี้อย่างน้อย 10 ปี ตัวอย่างดินที่ถูกเก็บรวบรวมจากฟิลด์ G13 พักอย่างไร Wageningen (loamy
การแปล กรุณารอสักครู่..

Synchytrium endobioticum sporangia ของ pathotypes 1, 2, 6, 8 และ 18 มีการผลิตในกะหล่ำมันฝรั่งไวต่อหนุ่มสาว (พันธุ์. deodara) โดยการฉีดวัคซีนให้กับปุ๋ยหมักหูดตามวิธี Spieckermann อธิบายไว้ในพิธีสารสนพวินิจฉัยสำหรับเอส endobioticum (Baayen และ Stachewicz, 2004) หลังจาก 10 สัปดาห์บ่มภายใต้เงื่อนไขที่ชื้นและความมืดที่ 16-18 C ผู้ใหญ่ (สีเข้ม) หูดที่ถูกเก็บเกี่ยวเป็นอิสระจากการยึดมั่นในดินโดยการกวนอย่างละเอียดในน้ำประปาและเก็บไว้ที่) 20 ซีหูดถูกละลายหดหายไปสารละลายปรับใช้ สากและปูน inocula ของปุ๋ยหมัก pathotypes 1, 2, 6, 8 และ 18 ที่ได้รับจากการคุ้มครองพันธุ์พืชบริการเนเธอร์แลนด์ (Baayen et al., 2005) sporangia ถูกแยกออกจาก homogenate หรือปุ๋ยหมักโดย sieving เปียกและปั่นโดยใช้วิธีการในการให้บริการการป้องกันพืชดัตช์ (วิธี PPS) ตามที่ระบุไว้ด้านล่าง.
เชื้อโรคไม่ chytrid ระบุไว้ในตารางที่ 1 ที่ได้รับจากคอลเลกชันที่จัดขึ้นที่โรงงานวิจัยนานาชาติ Wageningen เนเธอร์แลนด์ การเพาะปลูกเป็นไปตามการปฏิบัติในห้องปฏิบัติการในปัจจุบัน สำหรับเชื้อรานี้มีส่วนร่วมในการเพาะปลูกองุ่นน้ำซุปมันฝรั่ง (PDB; Oxoid DM 139) และการสกัดดีเอ็นเอจากเส้นใยแห้งโดยใช้ชุด Puregene 02F01 (BIOzyme, Blaenavon สหราชอาณาจักร) สำหรับแบคทีเรียวิธีการของรถตู้ Beckhoven et al, (2002) ถูกนำมาใช้และขั้นตอนที่สองไส้เดือนฝอย Meloidogyne เด็กและเยาวชน, วิธีการของเคอร์แร et al, (1986) และ Zijlstra et al, (1997) ถูกนำมาใช้ chytrid ดีเอ็นเอการเตรียมการอื่นที่ไม่ใช่เอส endobioticum และ Synchytrium taraxaci ได้ให้ความกรุณาโดยดร. ทีเทอร์เนอมหาวิทยาลัยดุ๊ก, NC, USA. ดินและการเตรียมดินชุดลดสัดส่วนในการศึกษานี้ที่แตกต่างกันสี่ดินรบกวนเทียมถูกนำมาใช้จากดัตช์การเกษตรสาขา มันฝรั่งไม่ได้รับการเติบโตในสาขาเหล่านี้อย่างน้อย 10 ปี เก็บตัวอย่างดินจากฟิลด์ G13 อยู่ใกล้ Wageningen (ดินร่วนป
การแปล กรุณารอสักครู่..

synchytrium endobioticum สปอแรงเกียของ pathotypes 1 , 2 , 6 , 8 และ 18 ที่หนุ่มไวหน่อมันฝรั่งพันธุ์ deodara ) โดยการฉีดวัคซีนให้กับหูดปุ๋ยหมักตามวิธีการที่อธิบายไว้ใน spieckermann ช่วยวินิจฉัยระบบ . endobioticum ( baayen และ stachewicz , 2004 )หลังจาก 10 สัปดาห์บ่มชื้นและมืดที่ 16 - 18 C ผู้ใหญ่ ( สีเข้ม ) หูดถูก harvested ปลดปล่อยจากดินที่ละเอียดมาก ในน้ำประปา และเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 20 องศาเซลเซียส ) ละลายหูดเป็นโฮโมกับสารละลายปรับใช้สากและครก ปุ๋ยหมัก inocula ของ pathotypes 1 , 2 , 6 , 8 และ 18 ที่ได้รับการป้องกันจากโรงงานบริการ , เนเธอร์แลนด์ ( baayen et al . ,2005 ) สปอแรงเกียถูกแยกออกจากปริมาณหรือปุ๋ยหมักโดยเปียก sieving และปั่นโดยใช้วิธีการคุ้มครองพืชดัตช์ Service ( PPS ) ) ตามที่อธิบายไว้ด้านล่าง ไม่ใช่ไคทริดเชื้อโรคอยู่ในโต๊ะ
1 ได้จากคอลเลกชันที่จัดขึ้นที่วิจัยพืชระหว่างประเทศ Wageningen , เนเธอร์แลนด์ การปลูก คือ การฝึกปฏิบัติการในปัจจุบันสำหรับเชื้อรานี้เกี่ยวข้องกับการเพาะปลูกใน potato dextrose broth ( PDB ; oxoid DM 139 ) และการสกัดดีเอ็นเอจากเส้นใยใช้พิวรียีนชุด 02f01 แห้ง ( ไบโอไซม์ blaenavon , UK ) สำหรับแบคทีเรีย วิธีการของ แวน beckhoven et al . ( 2002 ) จำนวนและชนิดที่สองเวทีเยาวชน ไส้เดือนฝอย วิธีการของเคอร์แรน et al . ( 1986 ) และ zijlstra et al . ( 1997 ) สถิติที่ใช้ไคทริดดีเอ็นเอการเตรียมนอกจากสหรัฐและ endobioticum synchytrium taraxaci ได้กรุณาให้ โดย ดร. วิชิต เทอร์เนอร์ , Duke University , NC , USA
ดินและการเตรียมดินเจือจางชุด
ในการศึกษานี้ สี่ต่างตั้งใจรบกวนดินจากเขตการเกษตรที่ใช้ภาษาดัตช์ ฝรั่งก็ไม่ได้ปลูกในเขตข้อมูลเหล่านี้อย่างน้อย 10 ปีเก็บตัวอย่างดินจากไร่ระหว่างตั้งอยู่ใกล้กับ Wageningen ( ดินร่วน
การแปล กรุณารอสักครู่..
