2 . ทดลอง
2.1 . การเตรียมวัสดุเลี้ยงสาหร่ายและสาหร่ายที่ใช้ในการทดลองทั้งหมด
( มีซีนเดสมัส acutus utex มูลค่า ) สาหร่ายที่เพาะเลี้ยงใน autotrophically 5500 L
ปิดท่อ photobioreactor แนวตั้งอยู่ในเรือนกระจก
ใช้ยูเรียอาหารที่ 0.14 กรัม / ลิตรยูเรีย [ 14 ] ตาม
อุณหภูมิของวัฒนธรรมสื่อไม่ได้ควบคุม และมีค่า
ระหว่าง 18 และ 43 Cหลังการเก็บเกี่ยวและ dewatering , สาหร่าย
( 10 – 15% ของแข็งแห้งในเตาอบที่อุณหภูมิ 60 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ชีวมวลจากสาหร่าย
เก็บเกี่ยวเดี่ยว ( 1.1 กิโลกรัมน้ำหนักแห้ง ) ใช้ทั้งหมด
การทดลอง สาหร่ายอบแห้ง ( ความชื้น 3% ) ต่อมา
บดในเครื่องบดกาแฟจนสาหร่ายพบอนุภาค
น้อยกว่า 150 ไมโครเมตร หลังจากบดและก่อนที่ขั้นตอนการสกัดทั้งหมด
สาหร่ายมีความร้อนถึง 100 C 24 h เพื่อเอาน้ำที่เหลือ
( < ความชื้น 1% ) ตัวทำละลายอินทรีย์ทั้งหมดเป็นเกรด 3
และถูกใช้โดยไม่บริสุทธิ์เพิ่มเติม BF3 ในเมทานอล
( 10 % โดยน้ำหนัก BF3 , Sigma –ดิช ) คือใช้สำหรับกระบวนการทรานส์เอสเทอริฟิเคชั่นของ
ไขมัน สารสกัด ส่วนผสม ชื่อเสียง ( 99.9% บริสุทธิ์ ซิกม่า Aldrich
– ) ถูกใช้เป็นมาตรฐานและเมทิล heptadecanoate ( 17:0 ) ถูกใช้เป็น
มาตรฐานการวิเคราะห์ชื่อเสียงภายในเนื้อหา
2.2 . ไบลท์และ Dyer การสกัด
ไขมันสกัดโดยการผสมเมทานอลคลอโรฟอร์ม ( คล้ายเนื้อเยื่อประสาน
น้ำ ( 1:1:0.9 , V / V / V ) อัตราส่วนนี้จะขึ้นอยู่กับการประเมินของ Dyer
) [ 6 ] หลังจากวาง 5 กรัมของสาหร่ายในเออร์เลนเมเยอร์ขวด
25 มิลลิลิตร ( 50 มล เมทานอล และ 20 มิลลิลิตร คล้ายเนื้อเยื่อประสานน้ำ
ถูกเทลงไปในขวด ผสม แล้วเขย่าเพื่อ
10 นาทีหลังจากที่เพิ่มอีก 25 มิลลิลิตร คลอโรฟอร์ม และ 25 ml
คล้ายเนื้อเยื่อประสานน้ำที่ถูกเทลงไปในขวด ผสมส่วนผสมแล้ว
เขย่าสำหรับรอบระยะเวลาที่ระบุ เมื่อแยกเสร็จ
ผสมทันทีกรองเอาสาหร่าย
หลีกเลี่ยงการสกัดไขมันเพิ่มเติม ส่วนผสมจะถูกโอนไปยัง
ช่องทางตัวให้แยกของอินทรีย์และสารละลาย
ชั้นหลังจากที่ชั้นคลอโรฟอร์มระเหยใช้
ระเหยหมุนเพื่อทิ้งสกัดลิปิด น้ำหนักของไขมันถูกบันทึกไว้ได้
.
2.3 เฮกเซนการสกัดที่สภาวะแวดล้อม
สาหร่าย ( 5 กรัม ) และเฮกเซน ( 100 มล. ) ถูกวางไว้ในขวดเขย่าสำหรับเออร์เลนเมเยอร์
และกำหนดเวลา เมื่อสกัด
สมบูรณ์ ส่วนผสมจะถูกกรองเอาสาหร่าย
เหลือใด ๆเฮกเซนถูกลบออกด้วยเครื่องระเหยแบบหมุนและน้ำหนักของไขมันที่ถูกบันทึกไว้ได้
.
2.4 . ร้อนอัดเฮกเซนสกัด
5 กรัมของสาหร่ายถูกโหลดลงเครื่องนึ่ง ( 300 มล. )
100 มิลลิลิตรของน้ำ . นึ่งถูกลบโดยใช้ก๊าซอาร์กอน
, ร้อนถึงอุณหภูมิที่ต้องการ ( 220 , 235 หรือ 250 C ) และจัดขึ้น
สำหรับ 5 หรือ 10 นาที ความดันภายในเส้นเลือดถูกตรวจสอบ
การใช้มาตรวัดความดันและความเร็วรอบการกวนปรับ
300 รอบต่อนาที หลังจากการสกัดเสร็จนึ่งคือ
เย็นที่อุณหภูมิห้อง และ depressurized . สกัดผสม
ถูกกรองเพื่อแยก สาหร่าย เศษ และเฮกเซนถูกลบออก
ด้วยเครื่องโรตารี่ สารสกัดจากไขมันมีน้ำหนัก gravimetrically
ได้รับไขมันดิบผลผลิต .
2.5 สกัดด้วยเฮกเซน
15 กรัมของสาหร่ายแห้ง ถูกวางอยู่ในเซลลูโลสปลอกมือ
( 25 มม. 28 มม. บัตร , OD , 100 มม. ความยาว ) ภายใน 1
ระบาย การสกัดได้ อย่างต่อเนื่องที่อุณหภูมิ 80 องศาเซลเซียสนาน 12 ชั่วโมง ใช้
ของเฮกเซน 250 ml . หลังละลายออกสกัดไขมันคือ gravimetrically quantified
.
2.6 ไขมันไขมันดิบผลผลิตสาหร่ายวิเคราะห์
ถูกคำนวณโดยการหารน้ำหนักดิบ
โดยน้ำหนักไขมัน สาหร่ายแห้ง นำไขมัน ( 400 มก. )
transesterified 80 C 2 H ใช้ 4 ml ของ BF3 ในเมทานอล
หาชื่อเสียง เนื้อหา หลังจากปฏิกิริยาสมบูรณ์และคลอโรฟอร์ม
คล้ายเนื้อเยื่อประสานน้ำ ( 5 ml แต่ละ ) เพิ่ม 3
กำหนด ชั้นล่างก็รวบรวม
ตัวทําละลายหายไปหมด transesterified ผลิตภัณฑ์วิเคราะห์
โดย Agilent 6890 แก๊สโครมาโตกราฟ - แมสสเปกโทรมิเตอร์
พร้อมกับ hp-88 คอลัมน์ ( 100 เมตรความยาว , 0.25 มม. ความหนา 0.2 lmfilm บัตร ,
) โซลูชั่นของเมทิล heptadecanoate ในเฮปเทน
5 mg / ml ) ใช้เป็นมาตรฐานภายในการวิเคราะห์ชื่อเสียง .
3 มิลลิลิตรของสารละลายมาตรฐานภายในเพิ่ม 75 มิลลิกรัม
transesterified ผลิตภัณฑ์สำหรับการเตรียมการของกลุ่มตัวอย่าง
ตัวอย่าง( 1 ) ฉีดจะอุณหภูมิเตาอบ เริ่มต้น 50 C หลังจาก
ฉีดเตาให้ความร้อนที่ 10 องศาเซลเซียส / นาทีถึง 170 C 5 องศาเซลเซียส / นาที
210 องศาเซลเซียส และจัดขึ้นเป็นเวลา 10 นาที แล้วตอน 5 องศาเซลเซียส / นาที 230 C และจัดขึ้น
6 นาที อัตราการไหลของแก๊สตัวพา ( เขา ) คือ 1 มิลลิลิตร / นาที หัวฉีดและเครื่องตรวจจับอุณหภูมิ
ตั้งไว้ที่ 260 C
ไอออนแหล่งอุณหภูมิ 280 องศาเซลเซียส ในขณะที่อุณหภูมิ
อินเตอร์เฟซ260 ค . อิเล็กตรอนกระทบ ( EI ) มวลสเปกตรัม และวัดที่เป็น ionizing
พลังงาน 70 EV โดยการสแกนจาก 50 เป็น 500 m / Z .
ดีในตัวอย่างที่ระบุเปรียบเทียบความคงทนครั้งยอดชื่อเสียง
ที่มีมาตรฐานของแท้ และยังได้รับการยืนยันโดยการวัดสเปกตรัมของ Ei
มวล .
การแปล กรุณารอสักครู่..