developedfor proteolysis [9,12,15,1

developed
for proteolysis [9,12,15,18,19]. Most of these studies have focused
on rapid digestion and reduction of sample volume. So far,
there is no study yet on a multienzymatic reaction system and
analysis of posttranslational modification in protein. In the current
study, we showed a simple and rapid analytical method for the
identification of protein sequence by using tandem proteaseimmobilized
microreactors. Proteolysis by the tandem microreactors
showed higher sequence coverage, which is a remarkable
result compared with that of the single microreactor or in-solution
digestion (Table 1). In addition, the tandem microreactor composed
of a protease-immobilized microreactor and a phosphatase-
immobilized microreactor showed the capability to localize
the phosphorylation site(s) in phosphoproteins. The current analytical
method is much simpler than the other conventional methods
[6–8]; for example, the phosphoprotein is just flowed through
the microreactor, and it eliminates purification of digests from the
reaction system without any enrichment strategies. These interesting
features are superior advantages of our approach using the enzyme-
immobilized microreactors over the conventional methods.
In addition, it is known that in-solution digestion by trypsin can induce
artificial modifications such as asparagine deamidation [22]
and N-terminal glutamine cyclization [23,24] on target protein
due to the elevated temperature and alkaline pH buffers used during
digestion. Proteolysis by our protease-immobilized microreactors
was achieved within a short period of time (10 min) at 30 C,
thereby suggesting these artificial modifications as a remote
possibility.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

พัฒนาสำหรับ proteolysis [9,12,15,18,19] ส่วนใหญ่ของการศึกษาเหล่านี้ได้มุ่งเน้นการย่อยอาหารอย่างรวดเร็วและการลดปริมาณตัวอย่าง เพื่อห่างไกลมีการศึกษาไม่ได้ระบบปฏิกิริยา multienzymatic และการวิเคราะห์การแก้ไข posttranslational โปรตีน ในปัจจุบันการศึกษา เราพบวิธีวิเคราะห์อย่างง่าย และรวดเร็วสำหรับการการระบุของลำดับโปรตีนโดยใช้ proteaseimmobilized ควบคู่microreactors Proteolysis โดย microreactors ควบคู่แสดงให้เห็นว่าคลุมลำดับสูง ซึ่งเป็นที่โดดเด่นผลการเปรียบเทียบกับที่ microreactor เดียวหรือในโซลูชันการย่อยอาหาร (ตารางที่ 1) นอกจากนี้ microreactor ควบคู่ประกอบด้วยmicroreactor ที่ตรึงรติเอสและฟอสฟาเตส-ตรึง microreactor แสดงให้เห็นว่าความสามารถในการแปลเป็นภาษาไม่ phosphorylation ใน phosphoproteins ปัจจุบันวิเคราะห์วิธีง่ายกว่าวิธีการอื่น ๆ ทั่วไป[6-8]; เช่น phosphoprotein เพิ่งไหลผ่านการ microreactor และช่วยทำให้บริสุทธิ์ของถูกย่อยด้วยจากการระบบปฏิกิริยา โดยกลยุทธ์การเพิ่มคุณค่า เหล่านี้น่าสนใจมีข้อดีเหนือกว่าวิธีการใช้เอนไซม์-ตรึง microreactors ผ่านวิธีการทั่วไปนอกจากนี้ เป็นที่รู้จักกันว่า สามารถก่อให้เกิดการย่อยอาหารในโซลูชัน โดยทริปซินประดิษฐ์ดัดแปลงเช่น deamidation asparagine [22]และ N-เทอร์มินัลกลูตา cyclization [23,24] ในโปรตีนเป้าหมายเนื่อง จากอุณหภูมิสูง และด่างสารละลายบัฟเฟอร์ pH ใช้ระหว่างการย่อยอาหาร Proteolysis โดย microreactors ของเราตรึงรติเอสสำเร็จภายในระยะเวลาสั้น ๆ ของเวลา (10 นาที) 30 Cจึงแนะนำให้ปรับเปลี่ยนเหล่านี้ประดิษฐ์เป็นรีโมทความเป็นไปได้