were usedfor PCR amplification of t

were used
for PCR amplification of the targeted locus in samples analyzed. Ampli-
fication reactions were carried out in 20 μl volumes containing 50 mM
of (NH4)2SO4 (pH 8.8 at 25 C°), 100 mM of Tris–HCl (pH 8.4 at
25 °C), 3.75 mM of MgSO4, 0.00002% Tween 20, 0.005% gelatin (Fluka,
Germany), 0.3 mM of each dNTP (Fermentas, Lithuania), 1.5 unit of
Taq polymerase (Fermentas, Lithuania), and 7.5 μM of each primer.
Using a thermocycler (Eppendorf, Germany), these reactions were
subjected to a cycle of 2 min at 94 °C followed by 30 cycles; each of
which consisted of 94 °C for 10 s, 48 °C for 10 s, and 72 °C for 1 min. A
final extension cycle was performed at 72 °C for 2 min. Generated PCR
products were electrophoresed on 1.8% ethidium bromide (Fluka)-
stained agarose (EuroClone, Italy) gels in 0.5X Tris Borate EDTA (TBE).
A 100 bp ladder (Vivantis, Malaysia) was used to estimate the approximate
molecular weight of amplicons. Electrophoresis was performed at
85 V for 2 h, and amplification profiles were photographed under UV
light using Gel Documentation System (GDS8000, UVP).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ถูกนำมาใช้สำหรับกระบือของทีเป็นเป้าหมายในการวิเคราะห์ตัวอย่าง Ampli-fication ปฏิกิริยาดำเนินการใน 20 μl ประกอบด้วย 50 มม.ของ (NH4) 2SO4 (pH 8.8 ที่ 25 C °), ทริสเรทติ้ง – HCl (pH 8.4 ที่ 100 mM25 ° C), MgSO4, 0.00002% 3.75 mM แต่ 20 วุ้น 0.005% (Flukaหน่วยเยอรมนี), 0.3 มม.ของ dNTP แต่ละ (Fermentas ลิทัวเนีย), 1.5Taq พอลิเมอเรส (Fermentas ลิทัวเนีย), และ 7.5 ไมครอนแต่ละพื้นใช้ thermocycler (Eppendorf เยอรมัน), ปฏิกิริยาเหล่านี้ได้ต้องทำวงจรของ 2 นาทีที่ 94 ° C ตาม ด้วยรอบ 30 แต่ละคนซึ่งประกอบด้วย 94 ° C เป็นเวลา 10 s, 48 ° C เป็นเวลา 10 s และ 72 ° C เป็นเวลา 1 นาที Aวงจรขยายขั้นสุดท้ายทำที่ 72 ° C เป็นเวลา 2 นาทีสร้าง PCRผลิตภัณฑ์ถูก electrophoresed บนโบรไมด์ ethidium 1.8% (Fluka) -ย้อมเจล agarose (EuroClone อิตาลี) ใน 0.5 X ทริสเรทติ้ง Borate EDTA (TBE)บันได bp 100 (Vivantis มาเลเซีย) ใช้ในการประมาณการคร่าว ๆน้ำหนักโมเลกุลของ amplicons ทำที่อิ85 V 2 h และขยายโพรไฟล์ได้ถ่ายภาพภายใต้ UVแสงที่ใช้ระบบเอกสารเจล (GDS8000, UVP)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ถูกนำมาใช้
สำหรับการขยาย PCR ของสถานทีที่กำหนดเป้าหมายในการวิเคราะห์ตัวอย่าง ตะแกรง
ปฏิกิริยาการตรวจได้ดำเนินการใน 20 เล่มไมโครลิตรที่มีขนาด 50 มม
ของ (NH4) 2SO4 (pH 8.8 ที่ 25 C °), 100 มิลลิเมตร Tris-HCl (pH 8.4 ที่
25 ° C) 3.75 มม MgSO4, 0.00002% Tween 20, 0.005% เจลาติน (Fluka,
เยอรมนี), 0.3 mm ของแต่ละ dNTP (Fermentas ลิทัวเนีย) 1.5 หน่วย
Taq โพลิเมอร์ (Fermentas ลิทัวเนีย) และ 7.5 ไมครอนของแต่ละไพรเมอร์.
ใช้ thermocycler A (Eppendorf, เยอรมนี) ปฏิกิริยาเหล่านี้ถูก
ยัดเยียดให้วงจรของ 2 นาทีที่ 94 ° C ตามด้วย 30 รอบ; แต่ละ
ซึ่งประกอบด้วย 94 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 วินาที, 48 ° C เป็นเวลา 10 วินาทีและ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาที
วงจรขยายสุดท้ายที่ได้ดำเนินการที่ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 2 นาที สร้าง PCR
ผลิตภัณฑ์ถูก electrophoresed บน 1.8% ethidium bromide (Fluka) -
. ย้อมสี agarose (EuroClone, อิตาลี) เจลใน 0.5 เท่าทริสบอเรต EDTA (TBE)
100 bp บันได (Vivantis มาเลเซีย) ถูกนำมาใช้ในการประมาณโดยประมาณ
น้ำหนักโมเลกุลของ amplicons electrophoresis ถูกดำเนินการใน
85 V เป็นเวลา 2 ชั่วโมงและโปรไฟล์ขยายถูกถ่ายภาพภายใต้แสงยูวี
แสงการใช้ระบบเอกสารเจล (GDS8000, UVP)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เคยใช้สำหรับการขยาย PCR ในตัวอย่างของเป้าหมายที่ตนวิเคราะห์ ampli -ปฏิกิริยา fication ได้ดําเนินการใน 20 μ L ปริมาณบรรจุ 50 มม.( NH4 ) 2so4 ( 8.8 pH อุณหภูมิ 25 ° ) , 100 มม. ของทริส– HCl ( pH 8.4 ที่25 ° C ) , 3.75 มม. MgSO4 ใเมอร์ , tween 20 , 0.005 % ( fluka เจลาติน ,เยอรมัน ) , 0.3 มม. ของแต่ละ dntp ( fermentas , ลิทัวเนีย ) 1.5 หน่วยทัค พอลิเมอเรส ( fermentas , ลิทัวเนีย ) , และ 7.5 μ M แต่ละรองพื้นการใช้เทอร์โมไซเคล ์ ( เพนดอร์ฟ , เยอรมนี ) , ปฏิกิริยาเหล่านี้รับรอบ 2 นาทีที่ 94 ° C ตามด้วย 30 รอบ แต่ละแห่งซึ่งประกอบด้วย 94 ° C 10 , 48 องศา C 10 , และ 72 ° C เป็นเวลา 1 นาที เป็นวงจรขยายสุดท้ายแสดงที่ 72 ° C 2 นาทีสร้างดีเอ็นเอผลิตภัณฑ์ electrophoresed ที่ 1.8% ทิเดียมโบรไมด์ ( fluka )เปรอะเปื้อน , ( euroclone , อิตาลี ) เจลในบริษัทบอเรต ( ทีบี ( EDTA )บันได 100 BP ( vivantis มาเลเซีย ) คือใช้ในการประมาณการโดยประมาณน้ำหนักโมเลกุลของ amplicons . วิธีทำที่85 V 2 ชั่วโมง และได้ถ่ายภาพภายใต้แสงยูวีแบบโปรไฟล์แสงที่ใช้ระบบเอกสาร เจล ( gds8000 uvp , )