IntroductionHemophilia A is an inhe

Introduction
Hemophilia A is an inherited X-linked, recessive hemorrhagic disorder caused by a deficiency of clotting factor VIII (FVIII) and is commonly treated by FVIII replacement. Concentrated FVIII products are derived from human plasma or produced recombinantly. Advances in viral-screening and -inactivation methods have improved the safety of plasma-derived products. Furthermore, the infectious risk of recombinant FVIII products is lowered by excluding human- or animal-derived proteins from cell culture solutions [1]. However, FVIII concen- trates remain extraordinarily expensive, and frequent injections are required for FVIII replenishment, especially with severe hemophilia A patients.
Since hemophilia A is a single-gene disorder and small increases in FVIII levels exert a curative influence, the dis- ease is a good candidate for gene therapy. However, prob- lems are associated with gene therapy, such as the development of leukemia and decreased target-protein expression following cytotoxic CD8 T-cell induction against viral vector-derived capsid epitopes [2]. Nevertheless, a sin- gle injection of an adeno-associated virus serotype 8 vector in patients with severe hemophilia B caused prolonged factor IX (FIX) overexpression and clinical improvement [3]. How- ever, viral vectors employed in gene therapy cannot deliver the F8 gene due to its large size. Therefore, truncated F8 gene variants, such as a B-domain-deleted variant, have been used, but successful hemophilia A gene therapy using viral vectors has not been achieved clinically. A recent study using a hemophilia A mouse model demonstrated that trans- ducing the entire F8 gene via the piggyBac vector improved clotting activity [4]. However, as the vector preferentially integrates near transcriptional start sites [5], insertional mutagenesis and genotoxicity remain significant concerns.
As the liver is the major site of FVIII synthesis, liver transplantation is effective in hemophilia A patients [6]; however, the lack of donor organs hinders clinical applica- tions. Recent studies revealed that the main source of FVIII is liver sinusoidal endothelial cells (LSECs), and transplanta- tion experiments using murine or human LSECs in hemophi- lia A mice demonstrated symptomatic improvement [7]. However, such transplantation requires a donor liver from which LSECs can be isolated, and contamination with different donor cells remains a potential problem. Several therapies have been investigated using cells capable of differentiating into LSECs [8–11].
Considering their potential for multilineage development and illimitable proliferation potential, embryonic stem (ES) cells may enable cell transplantation therapy. Fair et al. [12] reported that injecting mouse ES cells into the livers of hemophilia B mice corrected FIX deficiency. However, there have been few reports describing cell therapy for hemophilia A using ES cells. Previously, we established
mouse Ainv18 ES cells (tet-226aa/N6-Ainv18), which secrete human FVIII (hFVIII) by introducing the human F8 gene [13]. Here, we investigated ES-cell transplantation therapy against hemophilia A.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แนะนำHemophilia A เป็นการสืบทอดเชื่อม โยง X แก่นสานต์เลือดออกผิดปกติสาเหตุข้อบกพร่องของการแข็งตัวของปัจจัย VIII (FVIII) และมักได้รับการรักษา โดย FVIII แทน ผลิตภัณฑ์ FVIII เข้มข้นมาจากพลาสมามนุษย์ หรือผลิต recombinantly ความก้าวหน้าในวิธีการตรวจไวรัสและ - เลิกได้ปรับปรุงความปลอดภัยของผลิตภัณฑ์พลามาขึ้น นอกจากนี้ ความเสี่ยงติดเชื้อของ recombinant FVIII ผลิตภัณฑ์จะลดลง โดยรวมมามนุษย์ หรือสัตว์โปรตีนจากโซลูชันวัฒนธรรมเซลล์ [1] อย่างไรก็ตาม FVIII concen-trates ยังคงมีราคาแพงเป็นพิเศษ และฉีดบ่อยจำเป็นสำหรับเติม FVIII โดยเฉพาะอย่างยิ่งกับผู้ป่วยรุนแรง hemophilia Aตั้งแต่ hemophilia A มีความผิดปกติของยีนเดี่ยว และออกแรงเพิ่มเล็กน้อยในระดับ FVIII อิทธิพลแก้ dis-ง่ายคือ ผู้สมัครที่ดีสำหรับการรักษาด้วยยีน อย่างไรก็ตาม prob lems เกี่ยวข้องกับยีนบำบัด เช่นการพัฒนาของมะเร็งเม็ดเลือดขาวและโปรตีนลดลงเป้าหมายนิพจน์ต่อเหนี่ยวนำเซลล์ CD8 T เซลล์พิษกับ epitopes capsid เวกเตอร์มาไวรัส [2] อย่างไรก็ตาม เป็นบาปวฉีดเวกเตอร์ serotype 8 มีเกี่ยวข้อง adeno ไวรัสในผู้ป่วยรุนแรง hemophilia B เกิดจากการแสดงออกของ IX (แก้ไข) คูณเป็นเวลานานและปรับปรุงทางคลินิก [3] วิธี - เคย ไวรัสเวกเตอร์ในยีนบำบัดไม่ให้ยีน F8 เนื่องจากขนาดใหญ่ขึ้น ดังนั้น ตัด F8 ตัวแปรยีน เช่นตัวแปร B ลบโดเมน การใช้ แต่สำเร็จ hemophilia A ยีนบำบัดโดยใช้เวกเตอร์ไวรัสไม่ได้ทางคลินิก โดยใช้แบบจำลองเมาส์ hemophilia A การศึกษาล่าสุดแสดงให้เห็นว่าทรานส์ ducing ยีน F8 ทั้งผ่าน piggyBac เวกเตอร์ขึ้นแข็งตัวกิจกรรม [4] อย่างไรก็ตาม เป็นเวกเตอร์รวมเว็บใกล้เริ่ม transcriptional ไซต์ [5], insertional mutagenesis และ genotoxicity ยังคง ความกังวลที่สำคัญขณะที่ตับเป็นหลักของการสังเคราะห์ FVIII ปลูกถ่ายตับมีประสิทธิภาพในผู้ป่วย hemophilia A [6]; อย่างไรก็ตาม ไม่มีผู้บริจาคอวัยวะเป็นอุปสรรคต่อทางคลินิกอย่างหลากทุกระดับ การศึกษาล่าสุดพบว่า แหล่งที่มาหลักของ FVIII เซลล์บุผนังหลอดเลือดตับซายน์ (LSECs), และทางการค้า transplanta ทดลองการใช้ LSECs murine หรือมนุษย์ใน hemophi lia A หนูแสดงอาการพัฒนา [7] อย่างไรก็ตาม ปลูกถ่ายดังกล่าวต้องมีผู้บริจาคตับที่ LSECs สามารถแยก และปนเปื้อนกับผู้บริจาคต่าง ๆ เซลล์ยังคง เป็นปัญหาที่อาจเกิดขึ้น รักษาหลายที่ได้รับการตรวจสอบโดยใช้เซลล์สามารถแตกต่างใน LSECs [8-11]พิจารณาศักยภาพการพัฒนา multilineage และ illimitable แพร่กระจายเซลล์ต้นกำเนิดตัวอ่อน ศักยภาพ (ES) อาจให้การรักษาด้วยการปลูกถ่ายเซลล์ งาน et al. [12] รายงานว่า ฉีดเมาส์ ES เซลล์ในตับของหนู hemophilia B แก้ไขข้อบกพร่องการแก้ไข อย่างไรก็ตาม มีไม่กี่รายงานอธิบายเซลล์บำบัดสำหรับ hemophilia A ใช้ ES เซลล์ ก่อนหน้านี้ เราสร้างเมาส์ Ainv18 ES เซลล์ (tet-226aa/N6-Ainv18), ซึ่งหลั่ง FVIII มนุษย์ (hFVIII) โดยการนำยีน F8 มนุษย์ [13] ที่นี่ เราตรวจสอบรักษาปลูกถ่ายเซลล์ ES hemophilia a

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บทนำ
ฮีโมฟีเลียคือการได้รับการถ่ายทอด X-เชื่อมโยงความผิดปกติของโรคถอยเกิดจากการขาดปัจจัยการแข็งตัวของ VIII (FVIII) และได้รับการปฏิบัติโดยทั่วไปทดแทน FVIII เข้มข้นผลิตภัณฑ์ FVIII จะได้มาจากพลาสม่าของมนุษย์หรือผลิต recombinantly ความก้าวหน้าในการตรวจคัดกรองไวรัสและวิธีการ -inactivation มีการปรับปรุงความปลอดภัยของผลิตภัณฑ์พลาสม่าที่ได้มา นอกจากนี้ความเสี่ยงการติดเชื้อของผลิตภัณฑ์ FVIII recombinant จะลดลงโดยการยกเว้นโปรตีนมนุษย์หรือสัตว์ที่ได้มาจากการแก้ปัญหาการเพาะเลี้ยงเซลล์ [1] อย่างไรก็ตาม FVIII trates เข้มข้นยังคงมีราคาแพงเป็นพิเศษและฉีดบ่อยที่จำเป็นสำหรับการเติมเต็ม FVIII โดยเฉพาะอย่างยิ่งกับผู้ป่วยฮีโมฟีเลียอย่างรุนแรง.
ตั้งแต่ฮีโมฟีเลียเป็นโรคเดียวของยีนและการเพิ่มขึ้นของขนาดเล็กในระดับ FVIII สำแดงอิทธิพลแก้ความสะดวกปรากฏ เป็นผู้สมัครที่ดีสำหรับการรักษาด้วยยีน อย่างไรก็ตาม LEMS กำหนดปัญหาที่มีความเกี่ยวข้องกับยีนบำบัดเช่นการพัฒนาของโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาวและลดลงการแสดงออกของโปรตีนเป้าหมายต่อไปเหนี่ยวนำ CD8 T-cell cytotoxic ต่อต้านไวรัสเวกเตอร์ที่ได้มาจาก epitopes capsid [2] อย่างไรก็ตามการฉีด GLE บาปของ adeno-associated ไวรัส serotype 8 เวกเตอร์ในผู้ป่วยฮีโมฟีเลีย B รุนแรงที่เกิดจากปัจจัยทรงเครื่องเป็นเวลานาน (FIX) แสดงออกและการพัฒนาทางคลินิก [3] อย่างไรก็ตามการที่เคยเป็นพาหะของเชื้อไวรัสที่ใช้ในการรักษาด้วยยีนไม่สามารถส่งมอบยีน F8 เนื่องจากขนาดใหญ่ ดังนั้นการตัดทอน F8 สายพันธุ์ของยีนเช่นตัวแปร B-โดเมนลบได้ถูกนำมาใช้ แต่ฮีโมฟีเลียที่ประสบความสำเร็จยีนบำบัดโดยใช้พาหะไวรัสยังไม่ได้รับความสำเร็จในทางคลินิก ผลการศึกษาล่าสุดโดยใช้ฮีโมฟีเลียรูปแบบเมาส์แสดงให้เห็นว่าทรานส์ ducing ยีน F8 ทั้งหมดผ่านทางเวกเตอร์ piggyBac การปรับปรุงกิจกรรมการแข็งตัว [4] . แต่เป็นเวกเตอร์พิเศษรวมใกล้ถอดรหัสเริ่มต้นเว็บไซต์ [5], แทรก mutagenesis และพันธุกรรมยังคงกังวลอย่างมีนัยสำคัญ
ในฐานะที่เป็นตับเป็นเว็บไซต์หลักของการสังเคราะห์ FVIII, ปลูกถ่ายตับที่มีประสิทธิภาพในผู้ป่วยฮีโมฟีเลีย [6]; แต่ขาดของอวัยวะบริจาคเป็นอุปสรรคต่อการประยุกต์ใช้ทางคลินิก tions การศึกษาล่าสุดพบว่าแหล่งที่มาหลักของ FVIII เป็นตับไซน์เซลล์บุผนังหลอดเลือด (LSECs) และการทดลองการใช้ transplanta- หมาหรือ LSECs มนุษยชนใน Lia hemophi- หนูแสดงให้เห็นถึงการปรับปรุงอาการ [7] อย่างไรก็ตามการปลูกดังกล่าวต้องมีผู้บริจาคตับจากการที่ LSECs สามารถแยกและการปนเปื้อนกับผู้บริจาคเซลล์ที่แตกต่างกันยังคงเป็นปัญหาที่อาจเกิดขึ้น การรักษาหลายคนได้รับการตรวจสอบโดยใช้เซลล์ความสามารถในการสร้างความแตกต่างเข้า LSECs [8-11].
พิจารณาศักยภาพของพวกเขาสำหรับการพัฒนา multilineage และศักยภาพในการขยายไม่มีที่สิ้นสุด, ต้นกำเนิดตัวอ่อน (ES) เซลล์อาจช่วยให้การรักษาด้วยเซลล์ปลูก แฟร์ et al, [12] รายงานว่าการฉีดเซลล์เมาส์ ES เข้าไปในตับของหนูฮีโมฟีเลียบีแก้ไขการขาดการแก้ไข อย่างไรก็ตามมีการรายงานไม่กี่อธิบายการรักษาด้วยเซลล์สำหรับฮีโมฟีเลียโดยใช้เซลล์ ES ก่อนหน้านี้เราสร้าง
เซลล์เมาส์ Ainv18 ES (Tet-226aa / N6-Ainv18) ซึ่งหลั่ง FVIII มนุษย์ (hFVIII) โดยการแนะนำยีน F8 มนุษย์ [13] ที่นี่เราตรวจสอบการรักษาด้วยการปลูกถ่ายเซลล์ ES-กับฮีโมฟีเลียเอ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แนะนำและเป็นการสืบทอด x-linked ด้อย , เลือดออกโรคที่เกิดจากการขาดปัจจัยการแข็งตัวของเลือดที่ 8 ( VWF ) และโดยทั่วไปการรักษาโดยการทดแทนเอ็กซอน . เข้มข้น VWF ผลิตภัณฑ์ได้มาจากพลาสมาหรือผลิต recombinantly . ความก้าวหน้าในการตรวจไวรัสและวิธีการทำให้มีการปรับปรุงความปลอดภัยของพลาสมาที่ได้ผลิตภัณฑ์ นอกจากนี้ ความเสี่ยงติดเชื้อผลิตภัณฑ์เอ็กซอนคอมจะลดลง โดยรวม คนหรือสัตว์ที่ได้รับโปรตีนจากเซลล์โซลูชั่น [ 1 ] อย่างไรก็ตาม เอ็กซอน concen - trates ยังโคตรแพง และฉีดบ่อยต้องเอ็กซอนให้สมบูรณ์ โดยเฉพาะกับโรคฮีโมฟีเลียอย่างรุนแรงในผู้ป่วยเนื่องจากโรคฮีโมฟีเลีย คือ ความผิดปกติของยีนเดี่ยวและเพิ่มขนาดเล็กในเอ็กซอนระดับออกแรงอิทธิพลงาน DIS - ง่าย เป็นผู้สมัครที่ดีสำหรับยีนบำบัด อย่างไรก็ตาม ปัญหา - lems เกี่ยวข้องกับยีนบำบัด เช่น การพัฒนาของโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาวและปริมาณโปรตีนพิษจากการแสดงออกตามเป้าหมายสำหรับการต่อต้านไวรัสที่ได้มาจากเปลือกเวกเตอร์ [ 2 ] อย่างไรก็ตาม บาป - สัมพันธ์ - Adeno ไวรัสซีโรไทป์ของจีลี่ฉีดยา 8 เวกเตอร์ในผู้ป่วยโรคฮีโมฟีเลีย ทำให้ปัจจัยรุนแรงเป็นเวลานาน 9 ( แก้ไข ) overexpression และการปรับปรุงทางคลินิก [ 3 ] วิธีที่เคยใช้ในการบำบัดยีนไวรัสเวกเตอร์ไม่ได้ส่ง F8 ยีนเนื่องจากขนาดใหญ่ ดังนั้น ตัดทอน F8 ยีนตัวแปร เช่น ตัวแปร b-domain-deleted ได้ แต่ความสำเร็จและยีนบำบัดการใช้เวกเตอร์ไวรัสยังไม่ประสบผลสำเร็จทางคลินิก . การศึกษาล่าสุดโดยใช้เอนไซม์พบว่าเมาส์แบบทรานส์ - ducing ยีน F8 ทั้งหมดผ่านทาง piggybac เวกเตอร์ปรับปรุง clotting กิจกรรม [ 4 ] แต่เป็นเวกเตอร์ preferentially รวมใกล้ลองเริ่มต้นเว็บไซต์ [ 5 ] , การ insertional แตกต่างยังคงความกังวลที่สำคัญเป็นตับเป็นเว็บไซต์หลักของการสังเคราะห์เอ็กซอน , การเปลี่ยนตับจะมีประสิทธิภาพในผู้ป่วยโรคฮีโมฟีเลีย [ 6 ] ; อย่างไรก็ตาม การขาดแคลนผู้บริจาคอวัยวะหนึ่งคลินิก สิ่งที่เห็นทั้งหมด - ยินดีด้วย . การศึกษาล่าสุดพบว่า แหล่งที่มาหลักของ Octapharma คือตับไซน์ endothelial เซลล์ ( lsecs ) และ transplanta , การทดลองใช้ ~ หรือมนุษย์ lsecs ใน hemophi - เลียหนูแสดงอาการการปรับปรุง [ 7 ] อย่างไรก็ตาม เช่นการปลูกถ่ายตับจากผู้บริจาคที่ต้อง lsecs สามารถแยกและการปนเปื้อนกับเซลล์ของผู้บริจาคที่แตกต่างกันยังคงเป็นปัญหาที่อาจเกิดขึ้น หลายปีได้ทำการศึกษาความสามารถของการใช้เซลล์ใน lsecs [ 8 – 11 ]พิจารณาศักยภาพของตนเองเพื่อพัฒนาศักยภาพและการ multilineage ไร้พรมแดน สเต็มเซลล์ตัวอ่อน ( ES ) อาจมีการปลูกถ่ายเซลล์บำบัด ยุติธรรม และคณะ [ 12 ] รายงานว่า การฉีดเซลล์เข้าไปในตับของหนูและโรคฮีโมฟีเลีย หนูแก้ไขแก้ไขความขาดแคลน อย่างไรก็ตาม มีรายงานว่าบางเซลล์บำบัดสำหรับโรคฮีโมฟีเลียใช้ ES เซลล์ ก่อนหน้านี้ เราก่อตั้งขึ้นเมาส์ ainv18 ES เซลล์ ( tet-226aa / n6-ainv18 ) ซึ่งหลั่งเอ็กซอนมนุษย์ ( hfviii ) โดยการนำยีน F8 มนุษย์ [ 13 ] ที่นี่ เราศึกษาการปลูกถ่ายเซลล์บำบัดกับโรคฮีโมฟีเลีย . . .