The direct singleplex amplification

The direct singleplex amplifications of all six species-specific primers used in this study were first performed using voucher meat samples. This was done to test the primers’ efficiency and specificity and to evaluate the possibility of applying direct PCR for meat authentication. The result showed that direct PCR was successful in identifying meat species from raw meat samples. In these experiments, each species-specific primer pair produced PCR products only from its target species and generated the expected PCR products of 100, 119, 133, 155, 253, and 311 bp for pork (Sus scrofa), lamb/mutton (Ovis aries), chicken (Gallus gallus), ostrich meat (Struthio camelus), horsemeat (Equus ferus caballus) and beef (Bos indicus), respectively. No PCR product was observed from the negative controls. Direct amplification from a large sample size (>1 mm2) could occasionally cause amplification failure; further dilution (1:10 to 1:100) of pre-PCR solution using sterile water resolved this problem (data not shown).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Amplifications singleplex โดยตรงของทั้งหมดหก species-specific สังกะสี วัสดุใช้ในการศึกษานี้ได้ก่อนดำเนินการโดยใช้ตัวอย่างเนื้อสำคัญ นี้ถูกทำ การทดสอบประสิทธิภาพของไพรเมอร์และ specificity และ เพื่อประเมินความเป็นไปได้ของการใช้ PCR โดยตรงสำหรับการตรวจสอบเนื้อ ผลพบว่า PCR โดยตรงคือประสบความสำเร็จในการระบุชนิดเนื้อจากตัวอย่างเนื้อดิบ ในการทดลองเหล่านี้ แต่ละคู่พื้น species-specific ผลิตผลิตภัณฑ์ PCR จากชนิดของเป้าหมาย และสร้างผลิตภัณฑ์ PCR คาด 100, 119, 133, 155, 253 และ 311 bp หมู (Sus scrofa), mutton แกะ (Ovis aries), ไก่ (Gallus gallus), เนื้อนกกระจอกเทศ (Struthio camelus), horsemeat (อีคูส ferus caballus) และเนื้อ (บอสหม้อ), ตามลำดับ ผลิตภัณฑ์ PCR ไม่ถูกตรวจสอบจากตัวควบคุมเป็นค่าลบ โดยตรงขยายจากขนาดตัวอย่างขนาดใหญ่ (> มม 2 ได้ภาย 1) บางครั้งอาจทำให้ขยายความล้มเหลว เพิ่มเติม เจือจาง (1:10 ถึง 1: 100) ของ PCR ก่อนใช้ใส่น้ำแก้ไขปัญหานี้ (ข้อมูลไม่แสดง)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

amplifications singleplex โดยตรงของทั้งหกไพรเมอร์สายพันธุ์เฉพาะที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้มีการดำเนินการเป็นครั้งแรกโดยใช้ตัวอย่างเนื้อบัตรกำนัล นี้ทำเพื่อทดสอบประสิทธิภาพการใช้ไพรเมอร์ 'และความจำเพาะและประเมินความเป็นไปได้ของการใช้วิธี PCR โดยตรงสำหรับการตรวจสอบเนื้อ ผลการทดลองพบว่าวิธี PCR โดยตรงก็ประสบความสำเร็จในการระบุสายพันธุ์เนื้อจากตัวอย่างเนื้อดิบ ในการทดลองเหล่านี้แต่ละไพรเมอร์สายพันธุ์เฉพาะคู่ผลิตผลิตภัณฑ์ PCR จากสายพันธุ์เป้าหมายและสร้างผลิตภัณฑ์ที่คาดว่า PCR 100, 119, 133, 155, 253 และ 311 bp สำหรับหมู (Sus เร็ว ๆ ป่า), เนื้อแกะ / เนื้อแกะ (แกะ ราศีเมษ) ไก่ (กางเกงกางเกง), เนื้อนกกระจอกเทศ (Struthio Camelus) เนื้อม้า (Equus ferus ลับ) และเนื้อวัว (Bos indicus) ตามลำดับ ไม่มีสินค้า PCR พบว่าจากการควบคุมเชิงลบ โดยตรงจากการขยายขนาดของกลุ่มตัวอย่างขนาดใหญ่ (> 1 mm2) บางครั้งอาจทำให้เกิดความล้มเหลวในการขยาย; การลดสัดส่วนต่อไป (1:10 ถึง 1: 100) ของการแก้ปัญหาก่อน-PCR โดยใช้น้ำหมันแก้ไขปัญหานี้ (ไม่ได้แสดงข้อมูล)