The insoluble fraction of the lysat

The insoluble fraction of the lysate was
removed by centrifugation at 47,000 g for 30 min at 4
C, and the
supernatant was filtered through a 0.2 mm pore-size filter and then
loaded onto a Talon Superflow resin (Clontech) equilibrated in
phosphate buffer (50 mM, pH 7) containing 300 mM NaCl and
10 mM imidazole to improve the interaction specificity in the affinity
chromatography step. The bound enzyme was eluted using
phosphate buffer (50 mM, pH 7) containing 300 mM NaCl and
150 mM imidazole.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มีตัวละลายเศษที่ lysateเอาออก โดย centrifugation ที่ g 47,000 ใน 30 นาทีที่ 4 C และsupernatant ถูกกรองผ่านตัวกรองรูพรุนขนาด 0.2 mm แล้วโหลดลงบนยาง Talon Superflow (Clontech) equilibrated ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (50 มม. pH 7) ประกอบด้วย 300 มม. NaCl และอิมิดาโซล 10 มม.ปรับปรุง specificity โต้ตอบในความสัมพันธ์ขั้นตอน chromatography เอนไซม์นี้ถูกผูกไว้ที่ eluted ใช้ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (50 มม. pH 7) ประกอบด้วย 300 มม. NaCl และอิมิดาโซล 150 มม.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ส่วนที่ไม่ละลายน้ำของ lysate
ถูกลบออกโดยการหมุนเหวี่ยงที่47,000 กรัมเป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิ 4
องศาเซลเซียสและใสถูกกรองผ่าน0.2
มมกรองรูพรุนขนาดแล้วโหลดลงบนเล็บSuperflow เรซิน (Clontech) equilibrated
ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์( 50 มิลลิพีเอช 7) ที่มี 300 มิลลิโซเดียมคลอไรด์และ
10 มิลลิ imidazole
เฉพาะเจาะจงในการปรับปรุงการทำงานร่วมกันในความสัมพันธ์ที่ขั้นตอนที่โค เอนไซม์ที่ถูกผูกไว้ถูกชะใช้ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (50 มิลลิพีเอช 7) ที่มี 300 มิลลิโซเดียมคลอไรด์และ 150 มิลลิ imidazole

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ส่วนที่ไม่ละลายใน lysate คือ
ลบออกโดยปั่นที่ 47 , 000 G สำหรับ 30 นาทีที่ 4
C และถูกกรองผ่านสูง
0.2 มม. ขนาดรู กรองแล้ว
โหลดไปยังครับ superflow เรซิน ( clontech )
equilibrated ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( 50 มม. , pH 7 ) ที่มีขนาด 300 มม. และ
อิมิดาโซล 10 มม. เพื่อเพิ่มปฏิสัมพันธ์เฉพาะเจาะจงในกลุ่ม
เทคนิคขั้นตอนตัวอย่างการใช้เอนไซม์ผูกพัน
ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( 50 มม. , pH 7 ) ที่มี 300 mM NaCl
อิมิดาโซลและ 150 มิลลิเมตร